摘要：目的 應(yīng)用正常人新鮮抗凝全血對我院1月份實驗室多臺血液分析儀進(jìn)行比對實驗，評價各血液分析儀各參數(shù)之間是否具有可比性，本次實驗研究的是在血液分析過程中臨床意義比較大的幾個參數(shù)：白細(xì)胞（WBC）紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積(HCT)、血小板（PLT）。方法 選擇本實驗室日本Sysmex公司生產(chǎn)的 XT一2000i（有配套可溯源的校準(zhǔn)物和質(zhì)控品）血細(xì)胞分析儀為參比儀器．先對一正常新鮮抗凝全血定值．用于校準(zhǔn)其它血細(xì)胞分析儀。校準(zhǔn)合格后每日選取一門診體檢人正常新鮮全血在各臺儀器上進(jìn)行測定，以參比儀器所測結(jié)果為靶值，其它兩臺儀器所測結(jié)果與參比儀器所測結(jié)果相比較，計算出WBC﹑RBC﹑HGB﹑HCT﹑PLT的差異百分比。當(dāng)差異百分比在允許范圍內(nèi)時表示在控，當(dāng)差異百分比超出允許范圍時表示失控。結(jié)果 我實驗室XT一2000i檢測結(jié)果與ABX-PENTRA120，邁瑞B(yǎng)C-5500比較，WBC、RBC、HGB、HCT 、PLT相關(guān)性較好，都在CLIA'88允許誤差范圍的l/4控制限范圍內(nèi)，實驗結(jié)果可靠具有可比性。結(jié)論 同一實驗室不同儀器間利用新鮮抗凝全血標(biāo)本進(jìn)行比對測定，利用Excel數(shù)據(jù)點折線圖的功能，對差異百分?jǐn)?shù)作圖動態(tài)觀察．及時發(fā)現(xiàn)偶然誤差和系統(tǒng)誤差．查找原因并作相應(yīng)處理，可以使多臺血細(xì)胞分析儀的結(jié)果間具有可比性，減小差異率，達(dá)到了科學(xué)又經(jīng)濟(jì)的目的。

關(guān)鍵詞：新鮮抗凝全血；血液分析儀；比對

Applying Normal Person Fresh Anticoagulant Blood Carries out Comparison Test for Several Hematology Analyzers

YE Cheng-yan1，YAN Yuan1，ZHAO Xin2

(1.Maternal and Child Health Hospital of Sichuan Province，Chengdu 610041，Sichuan，China;2.The Seventh People's Hospital of Chengdu City，Chengdu 610000，Sichuan，China)

Abstract：ObjectiveApplying normal person fresh anticoagulant blood carries out comparison for several hematology analyzers which come from our laboratory in January，and evaluates whether there have been comparability among the parameter of the hematology analyzers.This experiment researches several parameters standing for the great clinical significance in the process of hemanalysis.MethodsThe Blood Cell Analyzer - XT-2000i (there are the calibrated matter and the control materials that are assorted and traced to the source) made in SYSMEX corporation of Japan is chosen to be reference instrument.First，fixing numerical value for fresh anticoagulant blood is so as to calibrate another Blood Cell Analyzers.After calibration is qualified，the normal and fresh blood from an outpatient will be chosen every day in order to be made determination on the instruments.Meanwhile，we regard the result measured by reference instrument as target value，compare it with the measured result of another two instruments and calculate discrepant percentage of WBC，RBC，HGB，HCT，PCT.When discrepant percentage comes within allowed range the result could be under control; when discrepant percentage exceeds allowed range，it could be out of control.ResultsComparing the measured result of XT-2000i in the laboratory with one of ABX-PENTRA120，MINDARY BC-5500，WBC，RBC，HGB，HCT，PCT all possess the better pertinence，which is in 1/4 control range of permitted error range of CLIA'88.The laboratory result is so reliable and has comparability.Conclusion Among different instruments in the same laboratory，making use of fresh anticoagulant blood specimen to advance comparison determination and taking advantage of the function of line chart made up of Excel's data points to dynamically examine discrepant percentage，quickly find accidentalerrorsystematic residuals，ask for reasons in order to carry out the homologous solution could create comparability among the results of several Blood Cell Analyzers，minish discrepant ratio so as to achieve scientific objective and economic purpose

Key words：Fresh blood；Hematology analyzer

血液分析儀是臨床實驗室進(jìn)行血細(xì)胞分析的常用儀器，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響患者疾病的診斷、治療和觀察，只有將血液分析儀檢測結(jié)果直接或間接溯源至參考方法［1~4］，并進(jìn)行良好的室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評價，才能更有效地保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。隨著臨床工作量不斷的增加，很多醫(yī)院已擁有多臺不同型號的血液分析儀，由于生產(chǎn)廠家、型號、測定原理、試劑、定標(biāo)物，質(zhì)控物等不盡相同，同一樣本在不同的儀器上測定結(jié)果可能存在明顯差異。加之現(xiàn)在血液質(zhì)控品價格昂貴，使用周期短，為了節(jié)約資金同時又要保證各臺血液分析儀測定結(jié)果的一致性，提高各參數(shù)的可比性，我們采用目前檢驗界比較認(rèn)同的一種方法應(yīng)用正常人新鮮抗凝全血進(jìn)行比對試驗，建立溯源體系，取得了良好效果。

1資料與方法

1.1一般資料日本Sysmex公司生產(chǎn)的XT一2000i用于定靶值的檢測系統(tǒng)儀器及其配套可溯源校準(zhǔn)品，法國生產(chǎn)的ABX-PENTRA120，深圳邁瑞B(yǎng)C-5500共3臺血液自動分析儀及其配套試劑。

1.2方法

1.2.1儀器的準(zhǔn)備工作 對各儀器作空白及攜帶污染率測定。(結(jié)果見表1）Sysmex XT一2000i由工程師定期全面保養(yǎng)和校準(zhǔn)，精密度參數(shù)在廠家允許范圍之內(nèi)，室內(nèi)質(zhì)控均在控，室間質(zhì)控結(jié)果優(yōu)良，作為參考儀器。ABX-PENTRA120和邁瑞B(yǎng)C-5500定期保養(yǎng)，精密度參數(shù)在廠家允許范圍之內(nèi)。

1.2.2 采集健康人EDTA-K2 抗凝新鮮全血15ml，混勻后分裝成3份，分別用于定靶值、校準(zhǔn)和校準(zhǔn)后驗證，室溫下保存，4 h內(nèi)完成試驗。

1.2.3 Sysmex XT一2000i校準(zhǔn)：用配套校準(zhǔn)品嚴(yán)格按校準(zhǔn)程序?qū)x器進(jìn)行校準(zhǔn)。校準(zhǔn)完成后進(jìn)行下一步實驗。

1.2.4取第1份血樣，在校準(zhǔn)后的儀器上連續(xù)測22次，去掉各參數(shù)中最高值和最低值，取20次結(jié)果平均值作為靶值。

1.2.5比對儀器的校準(zhǔn) 取第2份血樣分別在其余兩臺儀器上測定22次，去掉各參數(shù)中最高值和最低值，計算各參數(shù)的均值與靶值的偏差，偏差=[(比對儀器測定值一確定儀器測定值)／確定儀器測定值]×100％，若偏差WBC≤1.5％﹑RBC≤ 1.0％﹑Hb≤ 1.0％﹑HCT≤ 2.0％﹑PLT≤3.O％［5］。儀器無需校準(zhǔn)，反之須調(diào)整原校正系數(shù)，計算公式：新校正系數(shù)=(靶值÷均值)×原校正系數(shù)。符合各儀器要求，進(jìn)行下一步實驗。見表2。

1.2.6校準(zhǔn)的驗證實驗 取第3份血樣分別在經(jīng)校準(zhǔn)后的儀器上測定22次，去掉各參數(shù)中最高值和最低值，計算各參數(shù)的均值與靶值的偏差。見表3。

1.2.7新鮮抗凝全血比對實驗：每天取一門診體檢人EDTA-K2抗凝血分別在各臺血液分析儀上測2次，計算各參數(shù)的平均值，差異百分率=（測定值-均值）/均值×100％［6］。

1.2.8實驗數(shù)據(jù)的收集 收集本實驗室1月份的所有比對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 每日以一份正常新鮮全血進(jìn)行比對．參考L-J質(zhì)控圖的觀察方法和原則， 以差異百分?jǐn)?shù)0．00％靶值．以CLIA'88允許誤差范圍的l/4作為控制限．差異百分率可接受范圍設(shè)定：參照美國CLIA，88規(guī)定，WBC(T±15％)，RBC(T±6％)，HGB（T±7％），HCT（T±6％)，PLT(T±25％) ［7］，利用Excel數(shù)據(jù)點折線圖的功能，對差異百分?jǐn)?shù)作圖動態(tài)觀察．及時發(fā)現(xiàn)偶然誤差和系統(tǒng)誤差．查找原因并作相應(yīng)處理

2結(jié)果

2.1攜帶污染率的測定將一高值標(biāo)本連續(xù)測定3次，結(jié)果依次為H1、H2、H3，接著連續(xù)測定低值標(biāo)本3次，結(jié)果依次為L1、L2、L3。攜帶污染率計算公式為：(Ll-L3)／(H3一L3)×100％。

表1可以看出各儀器的攜帶污染率均不超過2﹪，符合實驗要求。(A: XT一2000i， B:ABX-PENTRA120， C:邁瑞B(yǎng)C-5500)

2.2 在XT一2000i血液分析儀上測的靶值為：WBC 6.83×10^9/L﹑RBC 5.52×10^12/L﹑HGB 135 g/L﹑HCT 0.439PLT 149×10^9/L. CV％分別為 1.04 0.75 0.62 0.85 1.02

2.3校準(zhǔn)前兩臺血液分析儀與XT-2000i靶值間的比較見表2。

B儀器的偏差在允許范圍內(nèi)，不需要再次校準(zhǔn)。C儀器的檢測參數(shù)（RBC）超出了允許范圍，須進(jìn)行校準(zhǔn)。（B:ABX-PENTRA120， C:邁瑞B(yǎng)C-5500）

2.4經(jīng)校準(zhǔn)后邁瑞B(yǎng)C-5500與XT-2000i靶值間的比較見表3。

2.5 比對數(shù)據(jù)統(tǒng)計見表4。

3臺儀器所檢測的項目的差異百分?jǐn)?shù)均在CLIA'88允許誤差范圍的l/4的控制限內(nèi)，表明3臺儀器的實驗結(jié)果具有可比性，能為臨床提供可靠的實驗數(shù)據(jù)。

3討論

血液分析儀操作簡便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，已經(jīng)成為各級醫(yī)院臨床檢驗專業(yè)的主要檢測手段。隨著醫(yī)院工作量的逐漸增大，很多醫(yī)院已擁有多臺不同品牌或不同型號的血液分析儀，但由于各廠家生產(chǎn)的血液分析儀采用的原理和試劑性質(zhì)不同，測定的結(jié)果存在潛在差異 。因此，為了保證血液分析儀檢測結(jié)果之間的一致性，除了要有完善的質(zhì)量控制體系，還必須建立合理的比對程序，即用可溯源的血液檢測系統(tǒng)定期對本實驗室用于常規(guī)檢測的血液分析儀進(jìn)行比對。由于儀器配套校準(zhǔn)物質(zhì)成本高、有效期短等多種原因，難以得到普遍推廣［8］。用\"定值\"的正常人新鮮全血進(jìn)行儀器比對為此提供了一條可行的途徑。我實驗室采用用XT-2000i血液分析儀作為規(guī)范操作檢測系統(tǒng)對正常人新鮮全血進(jìn)行定值及儀器比對，XT-2000i全自動血液分析儀每年由Sysmex公司專業(yè)人員用配套校準(zhǔn)品校準(zhǔn)1次，并且規(guī)范的開展室內(nèi)質(zhì)評管理，同時參加室間質(zhì)評成績優(yōu)良，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，所以可作為室內(nèi)質(zhì)控參比儀器。

本實驗室應(yīng)用定值健康人新鮮血進(jìn)行全血細(xì)胞計數(shù)的量值傳遞，對比對血液分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，利用患者的新鮮血常規(guī)樣本剩余血對比對儀全血細(xì)胞計數(shù)進(jìn)行有效的室內(nèi)質(zhì)量控制，取得了滿意的結(jié)果。對3臺血液分析儀作攜帶污染率測定，結(jié)果表明3臺血液分析儀的攜帶污染率均在要求的范圍內(nèi)，校準(zhǔn)前BC-5500的紅細(xì)胞測定值超出了實驗允許范圍，須校準(zhǔn)。經(jīng)校準(zhǔn)后的BC-5500測得的結(jié)果偏差小于校準(zhǔn)前測定的結(jié)果（P﹤0.05），有統(tǒng)計學(xué)意義。通過對3臺血液分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)后，收集我實驗室1月份（即校準(zhǔn)次月）的新鮮抗凝全血比對數(shù)據(jù)做統(tǒng)計學(xué)分析，結(jié)果見表（4）表明我實驗室3臺血液分析儀所測得結(jié)果具有可比性，能滿足臨床的需要。我實驗室采用新鮮抗凝全血進(jìn)行比對實驗，自動收集實驗數(shù)據(jù)，利用Excel數(shù)據(jù)點折線圖的功能，對差異百分?jǐn)?shù)作圖動態(tài)觀察．及時發(fā)現(xiàn)偶然誤差和系統(tǒng)誤差．查找原因并作相應(yīng)處理，具有可行性。

利用新鮮抗凝全血對多臺血液分析儀進(jìn)行質(zhì)量控制的過程中，為了保障實驗結(jié)果的可靠性，需做好一下幾個方面的工作：①參比儀器選擇：選擇性能良好、規(guī)范化操作的血液分析儀，其校準(zhǔn)、室內(nèi)質(zhì)控、室問質(zhì)評滿意，能保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確和穩(wěn)定性；具有可溯源的校準(zhǔn)物和質(zhì)控品；②健康人新鮮血選擇：以選擇對檢測無干擾因素存在、檢測結(jié)果處于正常參考范圍中值的健康人的血液為佳；③新鮮血定值和比對儀校準(zhǔn)：此工作前需對儀器進(jìn)行良好維護(hù)，確保性能測試符合要求，新鮮血采集后盡快進(jìn)行定值和校準(zhǔn)，定值和校準(zhǔn)時兩個儀器環(huán)境溫度需保持一致，在室溫18 C～25 C條件下4 h內(nèi)完成；④比對新鮮血準(zhǔn)備：使用EDTA-K2抗凝管，經(jīng)真空采血后顛倒混勻數(shù)次，避免出現(xiàn)凝塊，需選擇合適濃度且無PLT聚集、大PLT、有核RBC、RBC碎片、脂濁等提示的標(biāo)本；⑤比對結(jié)果可接受范圍的建立：由于不同血液分析儀的測試原理、重復(fù)性、抗干擾程度可能會有差別，建立自己的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)較直接采用某個標(biāo)準(zhǔn)更能反映儀器的質(zhì)量；⑥比對結(jié)果觀察方式選用：本實驗室在實驗室信息系統(tǒng)中建立了新鮮血比對、質(zhì)控功能，自動完成比對數(shù)據(jù)采集、計算、質(zhì)控圖顯示、失控現(xiàn)象提示功能，克服了數(shù)據(jù)人工記錄、計算的不便。

總之，本方法取材方便、操作簡單、經(jīng)濟(jì)有效，對目前同一實驗室擁有多臺血液分析儀進(jìn)行質(zhì)量控制，加強(qiáng)同一實驗室內(nèi)多臺血液分析儀間全血細(xì)胞計數(shù)準(zhǔn)確性和可比性有實際應(yīng)用價值。用正常人新鮮血液作為各儀器之間\"標(biāo)準(zhǔn)\"比對物，不僅經(jīng)濟(jì)方便，而且提高多臺血液分析儀在實際工作中的交替使用時結(jié)果的一致性，更好地服務(wù)了臨床工作，同時也減少患者重復(fù)檢查的醫(yī)療費用，合理有效的利用衛(wèi)生資源。

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編輯/許言