摘要：目的探討Lin28B蛋白在三陰乳腺癌的表達(dá)水平以及與臨床病理特征的關(guān)系。方法入選了47例三陰乳腺癌病例，分析Lin28B蛋白在癌組織和癌旁組織表達(dá)差異以及Lin28B蛋白與臨床病理特征的相關(guān)性。結(jié)果癌組織Lin28B陽性表達(dá)高于癌旁組織，兩者比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）；Lin28B蛋白在TNBC患者組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期以及Ki67表達(dá)存在正相關(guān)性，這些相關(guān)性均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。而與年齡、月經(jīng)狀態(tài)、腫塊大小之間無相關(guān)性（P<0.05）。結(jié)論Lin28B蛋白表達(dá)可能與TNBC的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，有望成為三陰乳腺癌的新的預(yù)測因子或治療靶點，但是需要更大臨床樣本和長期隨訪進(jìn)一步驗證。

關(guān)鍵詞：Lin28B蛋白；乳腺癌；病理特征

三陰性乳腺癌（TNBC）是指ER、PR與Her－2均陰性的乳腺癌。TNBC 具有獨特的生物學(xué)行為及臨床病理特征，是近幾年的研究熱點之一。目前研究發(fā)現(xiàn)Lin28B作為\"癌胚基因\"，參與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。本研究通過檢測TNBC的Lin28B蛋白表達(dá)水平，探討Lin28B蛋白在TNBC發(fā)生、發(fā)展的作用。

1資料與方法

1．1一般資料2007年1月1日~2013年12月31日在我院行乳腺癌根治術(shù)或改良根治術(shù)或乳腺腫塊穿刺病例，均為女性，術(shù)前未予放療、化療、內(nèi)分泌治療、免疫治療或抗腫瘤中成藥治療等。術(shù)前無其他惡性腫瘤病史或全身其他重要臟器嚴(yán)重疾病。均為浸潤性導(dǎo)管癌類型。

共入選了47例TNBC病例，年齡26~87歲，中位年齡48.5歲；絕經(jīng)前26例，絕經(jīng)后21例；G1級 13例，G2級27例，G3級 7例；T1 10例，T2 17例，T3 15例，T4 5例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性20例，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性27例；遠(yuǎn)處未轉(zhuǎn)移37例，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移10例；TNM分期中I期 7例，II期11 例，III期 19例，IV期10例；Ki67≥14%共27例，Ki67＜14%共20例。

1.2方法采用免疫組化二步法檢測所檢組織標(biāo)本的Lin28B蛋白表達(dá)情況。其中Lin28B一抗購自英國Abcam公司（ab71415），稀釋濃度1:10，PBS液代替一抗作為陰性對照。由2名富有經(jīng)驗的病理醫(yī)師采用雙盲法觀察，每張切片高倍鏡下計數(shù)5個視野，每個視野計數(shù)100個腫瘤細(xì)胞，以陽性細(xì)胞的百分率和染色深度為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評定。細(xì)胞漿或細(xì)胞膜中出現(xiàn)黃色、棕黃色顆粒為陽性染色，計數(shù)陽性染色細(xì)胞數(shù)≤lO％為陰性表達(dá)（－），陽性細(xì)胞數(shù)>10％為陽性表達(dá)，其中10~25%為1＋， 25~50% 為2＋，>50％為3＋，并作陰性對照。

1．3 統(tǒng)計學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。Wilcoxon符號秩檢驗和Spearman非參數(shù)檢驗分析相關(guān)數(shù)據(jù)。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果

2.1 Lin28B蛋白在癌組織和癌旁組織表達(dá)情況Lin28B在癌組織陽性率65.00％，癌旁組織陽性率20.00％。Lin28B陽性表達(dá)參考判讀標(biāo)準(zhǔn)以百分比表示，在癌組織和癌旁組織配對比較，采用Wilcoxon符號秩檢驗，癌組織Lin28B陽性表達(dá)高于癌旁組織，兩者比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.001，P

2.2 Lin28B蛋白與TNBC患者臨床病理特征的關(guān)系Lin28B蛋白在TNBC患者腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期以及Ki67表達(dá)存在正相關(guān)性，這些相關(guān)性均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。而與年齡、月經(jīng)狀態(tài)、腫塊大小之間無相關(guān)性（P<0.05），見表2。

3討論

Lin28B是近年發(fā)現(xiàn)與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)的一個新基因，在胚胎干細(xì)胞和發(fā)育組織中高表達(dá)，隨著細(xì)胞分化成熟后而逐漸表達(dá)降低或消失，參與維持干細(xì)胞\"干性\"；而在腫瘤組織異常表達(dá)增高，與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)。研究認(rèn)為Lin28B在人類腫瘤過表達(dá)的情況更為多見，Lin28B異常表達(dá)多見于肝癌、乳腺癌、腸癌等[1，2]。目前認(rèn)為Lin28B的功能發(fā)揮主要通過抑制let-7 microRNA家族來實現(xiàn)。let-7家族通過靶向作用c-myc、Lin28B、K-RAS等癌基因以及cyclinD1/2等細(xì)胞周期相關(guān)蛋白來抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用。

一項關(guān)于Lin28B和let-7在161例食管癌病例臨床研究中，顯示Lin28B在食管癌細(xì)胞表達(dá)高于非癌性上皮細(xì)胞，尤其腫瘤浸潤生長部分；Lin28B高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存預(yù)后差呈正相關(guān)，Lin28B高表達(dá)與let-7低表達(dá)顯著關(guān)聯(lián)；多因素分析表明Lin28B是食管癌的獨立預(yù)后因子；并且體內(nèi)實驗顯示Lin28B敲除的癌細(xì)胞在增殖和侵襲能力方面均較未處理的癌細(xì)胞減弱；所以認(rèn)為Lin28B高表達(dá)與食管癌進(jìn)展和預(yù)后不良相關(guān)，Lin28B通過增強(qiáng)食管癌細(xì)胞增殖和浸潤能力而發(fā)揮促癌作用的[3]。

本研究中Lin28B在癌組織表達(dá)明顯高于癌旁組織，這種差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。并且Lin28B表達(dá)與TNBC患者的組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期以及增殖指標(biāo)Ki67表達(dá)呈正相關(guān)（P<0.05），提示Lin28B表達(dá)在TNBC的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮作用。Sakurai等發(fā)現(xiàn)共檢測26例病例所有癌旁乳腺腺體都有Lin28B分布，16例癌組織也有表達(dá)，而且其表達(dá)水平明顯高于癌旁乳腺腺體，均分布在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)[4]。故本研究結(jié)果與既往相關(guān)研究結(jié)果相似。

有報道Lin28B則在三陰（ER-、PR-、Her-2-）乳腺癌中表達(dá)明顯上調(diào)；而且Lin28B表達(dá)是炎癥產(chǎn)生環(huán)路的一部分，通過NF- B轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其表達(dá)水平[5]，所以Lin28B表達(dá)在炎癥向惡性腫瘤轉(zhuǎn)變過程可能起著重要作用。

綜上所述，Lin28B表達(dá)可能與TNBC的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，有望成為TNBC的新的預(yù)測因子或治療靶點，但是需要更大臨床樣本和長期隨訪進(jìn)一步驗證。

參考文獻(xiàn)：

[1]岳樹強(qiáng)，向紅軍，楊雁靈，等.Lin－28B在原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J].中華普通外科雜志，2008，23(1):48-50.

[2]King CE， Cuatrecasas M， Castells A，et al. Lin28b promotes colon cancer progression and metastasis[J].Cancer Res，2011，71（12）:4260-4268.

[3]Hamano R，Miyata H，Yamasaki M，et al. High expression of Lin28 is associated with tumour aggressiveness and poor prognosis of patients in oesophagus cancer[J].Br J Cacner，2012，106（8）:1415-23.

[4]Sakurai M，Miki Y，Masuda M，et al.Lin28：a regulator of tumor-suppressing activity of let-7 microRNA in human breast cancer[J].J Steroid Biochem Mol Biol，2012，131（3-5）:101-6.

[5]Thornton JE，Gregory RI.How does Lin28 let-7 control development and disease[J].Trend Cell Biol，2012，22（9）：474－82.

編輯/孫杰