摘要：目的分析ABO血型鑒定的影響因素和風(fēng)險(xiǎn)控制。方法通過對導(dǎo)致ABO血型鑒定不符的影響因素的分析。結(jié)果通過正確識別與控制，能有效提高ABO血型鑒定的符合性。結(jié)論抗原抗體異常、ABO亞型是導(dǎo)致血型不符的常見原因，經(jīng)過適當(dāng)處理及規(guī)范操作，能正確鑒定ABO血型。

關(guān)鍵詞：ABO血型鑒定；抗原抗體；ABO亞型；控制措施

ABO 血型系統(tǒng)是輸血中最重要的，也是最早發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng)， 是在1900年由Landsteiner提出的。當(dāng)人體輸入ABO血型不符的血液時(shí)會(huì)產(chǎn)生迅速地、完全地血管內(nèi)溶血，會(huì)引起嚴(yán)重的輸血反應(yīng)，以至發(fā)生死亡事故。因此，血型鑒定正確與否是臨床輸血安全的先決條件。影響血型鑒定的因素有很多：抗原抗體因素、標(biāo)本因素、技術(shù)因素及工作人員因素等。如何正確的識別與控制血型鑒定的風(fēng)險(xiǎn)因素是保證臨床輸血安全、有效的關(guān)鍵。

1抗原因素

1.1抗原減弱 白血病可以影響N-乙酰半乳糖轉(zhuǎn)移酶或半乳糖轉(zhuǎn)移酶，導(dǎo)致患者紅細(xì)胞A抗原或B抗原弱化[1]。此外，何杰金氏病會(huì)抑制抗原表達(dá)，化療也會(huì)減弱血型抗原，類似白血病[2]。某些生理性的因素，如新生兒紅細(xì)胞所帶的A、B抗原位點(diǎn)數(shù)量少。

1.1.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 白血病、何杰金氏病這些患者在正定型時(shí)使凝集減弱或消失，易誤定為O型。新生兒因?yàn)榧t細(xì)胞抗原數(shù)量未發(fā)育到成人水平，現(xiàn)有的單克隆抗體檢測水平可能與其發(fā)生較弱的凝集甚至不凝集[3]。

1.2類B抗原 一些腸道感染患者，因受大腸桿菌O86感染，使紅細(xì)胞上獲得類B抗原。

1.2.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 血型鑒定時(shí)使A型誤判為AB型，O型誤判為B型。

1.3控制措施

1.3.1抗原減弱引起的ABO血型鑒定困難可通過放置4℃、并延長反應(yīng)時(shí)間后再作鑒定，并與微柱凝膠法、吸收放散試驗(yàn)聯(lián)合檢測，也可通過測定分泌型患者的唾液血型物質(zhì)來鑒定ABO血型。

1.3.2類B抗原當(dāng)病情好轉(zhuǎn)時(shí)會(huì)消失?？捎脴?biāo)準(zhǔn)A、B紅細(xì)胞測定患者血清中的凝集素，以確定受檢者真正血型。

2抗體因素

2.1抗體減弱或缺失 血型抗體為天然抗體，多為IgM。新出生的嬰兒因免疫系統(tǒng)尚未健全，還未產(chǎn)生抗體或抗體效價(jià)非常低，抗體水平生理性下降的老年人， 以及血液病、長期接受免疫抑制劑治療的腫瘤患者、丙種球蛋白缺乏癥患者等都能導(dǎo)致血清中抗體減弱。

2.1.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 抗體減弱會(huì)造成反定型的困難，引起ABO正反定型的不符。

2.2同種抗體 引起ABO血型正反定型結(jié)果不符的同種抗體主要有Rh、M N、P等血型系統(tǒng)的抗體。

2.2.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 當(dāng)出現(xiàn)反定型O細(xì)胞凝集而其自身對照細(xì)胞結(jié)果陰性時(shí)， 應(yīng)考慮同種抗體存在的可能性。

2.3不規(guī)則抗體 常見的影響血型鑒定的不規(guī)則抗體主要有抗M和抗P1。因?yàn)榭筂為天然抗體， 在日常的標(biāo)本中檢出率很高， P2人的血清中通常都含有抗P1。

2.3.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 抗P1同抗M一樣， 抗P1為4℃高反應(yīng)性抗體， 在室溫反應(yīng)也較強(qiáng)[4]。不規(guī)則抗體的存在勢必導(dǎo)致ABO正反定型結(jié)果的不符。

2.4自身冷抗體 一般正常人的冷凝集素的效價(jià)不高，一般在1∶16一下，當(dāng)環(huán)境溫度<4℃時(shí)才會(huì)產(chǎn)生凝集，但置37℃后凝集會(huì)消失。某些病理情況，如支原體肺炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫性溶血性貧血等疾病，患者血清中含有高效價(jià)的冷凝集素。

2.4.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 高效價(jià)的冷凝集素可致敏自身紅細(xì)胞發(fā)生凝集，使正定型時(shí)發(fā)生凝集現(xiàn)象，干擾血型判斷。

2.5控制措施

2.5.1抗體減弱或缺失引起的ABO鑒定困難，可通過增加血清量、延長反應(yīng)時(shí)間、放置4℃增強(qiáng)反應(yīng)或使用低離子強(qiáng)度的溶液來解決ABO正反定型的不符。

2.5.2現(xiàn)今隨著外來人員的不斷增加，Rh D陰性的檢出率也在上升，因此，Rh D已應(yīng)作為常規(guī)檢測項(xiàng)目，臨床應(yīng)選擇Rh同型的血液，以防止Rh陰性者接受RH陽性者血液后產(chǎn)生Rh抗體。如果再次輸入Rh陽性血液，即可導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)。

2.5.3可通過測定分泌型患者唾液中的血型物質(zhì)來鑒定ABO血型，非分泌型患者可加做如吸收放散試驗(yàn)。

2.5.4當(dāng)ABO正反定型不符，懷疑患者血清中含有高效價(jià)冷凝集素時(shí)，可將患者紅細(xì)胞和生理鹽水置37℃預(yù)溫，然后用生理鹽水反復(fù)洗滌受檢紅細(xì)胞，直到鏡檢紅細(xì)胞無凝集狀態(tài)，然后再做血型鑒定，并且環(huán)境溫度宜保持在20℃以上。

3疾病因素

3.1標(biāo)本溶血 引起標(biāo)本溶血的疾病主要見于較為嚴(yán)重的血管內(nèi)溶血，如：自身免疫性溶血性貧血、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿(PNH) 、G-6 PD缺乏等及某種原因?qū)е碌臋C(jī)械性損傷。

3.1.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 如果標(biāo)本完全溶血，則無法進(jìn)行ABO血型的鑒定。溶血的標(biāo)本凝集度減弱，對正反定型的結(jié)果判斷都有干擾。

3.2血漿成分異常 多發(fā)性骨髓瘤患者由于骨髓瘤細(xì)胞可以分泌異常結(jié)構(gòu)單一的免疫球蛋白， 造成正常免疫球蛋白合成不足， 血型抗體合成減少[5]。某些肝臟病、巨球蛋白血癥、傳染病( 結(jié)核等)等患者往往存在大量的異常球蛋白及心肌梗死、感染、外傷、腫瘤等疾病可引起患者體內(nèi)纖維蛋白增高。

3.2.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 血漿成分的這些異常改變均易使紅細(xì)胞在反定型時(shí)發(fā)生緡錢樣凝集，引起正反定型不符。

3.3控制措施

3.3.1實(shí)驗(yàn)室在收取患者標(biāo)本時(shí)應(yīng)嚴(yán)格把關(guān)，對于溶血標(biāo)本應(yīng)結(jié)合患者病史，排除人為引起的理化損傷。當(dāng)溶血引起血型鑒定結(jié)果判斷困難時(shí)，同時(shí)加做吸收放散試驗(yàn)或檢測分泌型患者的唾液中的血型物質(zhì)來幫助鑒定。

3.2當(dāng)患者因?yàn)榧膊≡驅(qū)е卵獫{成分異常而致使血型鑒定過程中紅細(xì)胞出現(xiàn)緡錢樣凝集時(shí)，只要在血清中加2~3滴生理鹽水，輕輕搖動(dòng)，凝集即可消失。

4 ABO亞型

4.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) ABO血型正反定型結(jié)果不一致的另一常見原因是亞型。這是由于紅細(xì)胞抗原性的減弱而造成的定型困難。

4.2控制措施 其主要鑒定方法有：在正定型中加做抗AB、抗A1、抗H，比較凝集的強(qiáng)度。在反定型中加做A1 C、A2 C。加做吸收放散試驗(yàn)，并可通過測定分泌型患者唾液中的血型物質(zhì)來幫助ABO亞型的定型。

5其他血漿（血清）因素

5.1藥物影響 主要為血漿擴(kuò)溶劑如右旋糖苷、聚維酮、羥乙基淀粉等[6]。

5.1.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 易使紅細(xì)胞發(fā)生緡錢狀凝集，干擾血型的鑒定。

5.2細(xì)菌污染 當(dāng)患者血清受到細(xì)菌污染時(shí)，可產(chǎn)生H物質(zhì)。

5.2.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 在反定型時(shí)引起全凝集。

5.3補(bǔ)體致敏 補(bǔ)體能溶解紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血小板等。某些物質(zhì)如葡聚糖、細(xì)菌、內(nèi)毒素、酵母多糖等能激活體內(nèi)補(bǔ)體。

5.3.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 當(dāng)患者血清中存在補(bǔ)體時(shí)，在反定型時(shí)可發(fā)生溶血現(xiàn)象而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

5.4正定型標(biāo)本未抗凝 未抗凝標(biāo)本的凝血塊上洗下的紅細(xì)胞會(huì)有不同程度的凝集。

5.4.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 正定型時(shí)會(huì)干擾結(jié)果的判斷。

5.5反定型使用抗凝標(biāo)本 ABO反定型如使用抗凝標(biāo)本的血漿，由于血漿中析出的纖維蛋白網(wǎng)住了試劑細(xì)胞中的紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集[7]。

5.5.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 反定型紅細(xì)胞易出現(xiàn)緡錢狀凝集，引起正反定型的不符。

5.6控制措施

5.6.1藥物引起的紅細(xì)胞緡錢狀凝集與疾病引起的解決方法一樣，可在試管中加2~3滴生理鹽水，輕輕搖動(dòng)，凝集即可消失。

5.6.2標(biāo)本被細(xì)菌污染后產(chǎn)生的H物質(zhì)，在反定型時(shí)引起全凝集，可用O型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞與受檢血清做鑒定。

5.6.3如血型鑒定時(shí)出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，排除其他原因后，懷疑有補(bǔ)體存在的情況下，應(yīng)將血清置56℃滅活后再做血型鑒定。

5.6.4正定型時(shí)標(biāo)本未抗凝，懸液中的紅細(xì)胞會(huì)有不同程度的凝集，但鏡檢會(huì)發(fā)現(xiàn)視野中的紅細(xì)胞除了有些小凝塊外，大部分是形態(tài)正常、分布均勻的。一般正定型要求使用抗凝標(biāo)本，這樣紅細(xì)胞不易被破壞，防止溶血。

5.6.5反定型使用抗凝的標(biāo)本，易出現(xiàn)緡錢狀凝集，因此建議盡量使用未抗凝標(biāo)本的血清做反定型。

6臍帶膠原蛋白

新生兒血型鑒定的標(biāo)本很多采自臍帶血，因?yàn)槟殠а写罅康哪z原蛋白，即\"華通膠\"[3]。

6.1鑒定風(fēng)險(xiǎn) 紅細(xì)胞表面吸附了這種膠原蛋白會(huì)造成紅細(xì)胞非特異性凝集，出現(xiàn)假陽性的結(jié)果，干擾正定型的結(jié)果判斷。

6.2控制措施 可用生理鹽水洗滌以吸取吸附于紅細(xì)胞上的華通膠、采用低離子溶液法、結(jié)合微柱凝膠法等，并可加做吸收放散試驗(yàn)。

血型鑒定雖然操作簡單，但要求檢驗(yàn)人員具有高度的責(zé)任感。在血型鑒定時(shí)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，認(rèn)真、仔細(xì)，對每一分待檢標(biāo)本負(fù)責(zé)。遇到血型鑒定困難時(shí)，要結(jié)合患者的病史和臨床診斷，并聯(lián)合其他血型鑒定實(shí)驗(yàn)（抗人球蛋白試驗(yàn)、吸收放散實(shí)驗(yàn)、唾液血型物質(zhì)鑒定、ABO亞型鑒定等實(shí)驗(yàn)）綜合分析，以確保血型鑒定結(jié)果的正確性。

參考文獻(xiàn)：

[1]董曉鋒.腫瘤患者ABO 血型鑒定正反定型結(jié)果不符原因分析[J].中國誤診學(xué)雜志，2006，6(8):1463.

[2]郭永芳，陸慧娟.白血病引起血型A、B抗原減弱H抗原升高1例[J].中國輸血雜志，1999，12(2):26．

[3]周金安，劉慧芳.新生兒血型鑒定的常見問題和處理[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32(19): 2285-2287.

[4]王藍(lán)鴿，周金安，魏晴.不規(guī)則抗體影響血型鑒定的處理和分析[J].臨床血液學(xué)雜志，2009，22(6):318-320.

[5]陳玲.53 例微柱凝膠卡氏法ABO正反定型不符原因的分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2011，13(4):359-360.

[6]周湘靜，陳碧樂，謝作聽，等.37 例血漿因素引起正反定型不符原因分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2006，35( 5):452-454.

[7]蘭彩炯，陳靜嫻，等.輸血免疫血液學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2011:132．

編輯/肖慧