摘要：目的 研究頭孢曲松在膽汁中的藥物濃度分布，為防治肝膽系統(tǒng)感染用藥提供參考。方法 家兔行膽總管造瘺術，靜脈注射頭孢曲松后不同時間采集膽汁標本，采用高效液相色譜法（HPLC）測定膽汁中的藥物濃度。用藥動學軟件分析并得出藥動學參數(shù)。結果 家兔靜脈注射頭孢曲松后迅速分布，在膽汁中達峰時間Tmax 為 (0.036±0.094)h；峰濃度Cmax為(1509.20±584.60)μg/ml；消除半衰期T1/2為(3.31±0.59)h。8h膽汁中藥物濃度仍遠超過膽道常見致病菌的MIC90。結論 頭孢曲松在膽汁中濃度很高且有效作用時間長，是預防和治療膽道感染較好的藥物。

關鍵詞：頭孢曲松；膽汁；濃度；分布；高效液相色譜法

Study on the Drug Concentration in Rabbit Bile of Ceftriaxone

ZHENG Jing-lei1， LIANG Li-jian2， WANG Zai-guo1， CHEN Liu-zhen1， HU Xia-rong1， HE Run-pei1， YE Zhen-wei1

(1. Department of Oncosurgery， Dongguan People's Hospital， Dongguan 523059，Guangdong，China; 2.Department of Hepatobiliary， Tthe First Affiliated Hospital， Sun Yat-sen University， Guangzhou 510080，Guangdong，China)

Abstract：ObjectiveTo study the distribution of ceftriaxone in rabbit bile.MethodsThe rabbits were administered i.v. with ceftriaxone and their drug concentrations in bile were measured by HPLC. Parameters of ceftriaxone were analyzed by Shanghai Hongneng pharmacokinetic sofeware， such as maximum concentration(Cmax)，peak time(Tmax)，half-life time(T1/2)，clearance(CL) and apparent volume of distribution(VD). Results After a single i.v. administration of 75mg/kg of ceftriaxone， Cmax（1509.20±584.60）μg/ml was reached at Tmax (0.036±0.094)h in bile. After 8h of the injection ，the concentration of ceftriaxoneremained much higher than the MIC90 of most biliary pathogens. Conclusion Ceftriaxone reaches high concentration in bile， which indicates that it is a practical and promising antibiotic for the treatment of biliary tract infection.

Key words：Ceftriaxone；Bile；Concentration；Distribution；HPLC膽道感染應優(yōu)選在膽汁中濃度高且有效作用時間長的抗生素[1，2]。頭孢曲松是第三代頭孢類抗生素，由于具有抗菌譜廣、殺菌效力強、半衰期長和副作用小等特點[3]，膽道感染革蘭陰性和革蘭陽性等常見致病菌對其較敏感，常用于膽道感染的防治。本文通過高效液相色譜法測定頭孢曲松膽汁中的濃度，了解其在膽汁中的分布代謝規(guī)律，匯報如下。

1資料與方法

1.1試劑和藥品實驗用抗生素：頭孢曲松，上海羅氏制藥公司生產，規(guī)格0.5g/支，批號：SH0060。

頭孢曲松對照品：中國藥品生物制品檢定所提供，批號：2480；

色譜純：乙腈；分析純：枸櫞酸鈉、枸櫞酸、磷酸氫二鉀、、磷酸二氫鉀、四庚基溴化銨；超純水。

1.2儀器高效液相色譜系統(tǒng)：島津LC-10AD泵， SCL-10A進樣器，SPD-10AV紫外檢測器， CTO-10A柱溫箱，N-2000雙通道色譜工作站；0.45um微孔濾膜；微量采樣器。

1.3實驗動物健康實驗用家兔7只（雄性4只，雌性3只），體重（2.5±0.5）kg，由中山大學動物實驗中心提供。

1.4方法

1.4.1家兔膽汁采集方法禁食12h，腹腔注射3%戊巴比妥全麻后，行膽總管造瘺術。留取空白膽汁標本后，靜脈注射頭孢曲松75mg/kg，給藥結束后分別在即時、15、30、45、60、90、120、180、240、360、480min收集膽汁標本1.5ml， -20℃低溫保存。

1.4.2膽汁藥物濃度測定采用HPLC法測定膽汁中頭孢曲松濃度。

1.4.2.1色譜條件色譜柱：Spherisorb ODS Sm C18， 5μ，150×4.6mm；流動相：0.8%四庚基溴化銨乙腈溶液-水-磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀4.0g和磷酸氫二鉀13.6g，溶于1000ml水中，調節(jié)pH=7.0) -枸櫞酸鹽緩沖液（取枸櫞酸鈉25.8g，置1000ml量瓶中，加水500ml使溶解，用20%枸櫞酸溶液調節(jié)Ph至5.0）（500：440：55：5）；流速：1ml/min；進樣量：20μl；柱溫：25℃；檢測波長：254nm。

1.4.2.2 膽汁樣品預處理[4]精密取膽汁200 l，加入乙腈至2ml，旋渦振蕩，離心（15000 rpm ）10min，取上清液經微孔濾膜過濾后進樣。

1.4.2.3 膽汁樣品藥物濃度和藥動學數(shù)據(jù)計算通過HPLC色譜儀測定各膽汁樣品頭孢曲松的色譜峰面積，計算其相應的藥物濃度。用上海宏能藥動學軟件處理，得出各項藥動學參數(shù)，如：峰濃度，達峰時間，半衰期，清除率， 表觀分布容積，曲線下面積等。

2結果

2.1頭孢曲松在膽汁中的濃度家兔靜脈注射頭孢曲松后膽汁中藥物濃度達峰時間極短，均在15min內達峰值；峰濃度很高（674.29~2398.22μg/ml）。用藥后8h仍可在膽汁中測到較高的藥物濃度。見表1。

2.2頭孢曲松在膽汁中的藥動學參數(shù)膽汁藥物濃度－時間數(shù)據(jù)用上海宏能藥動學軟件進行房室模型及非房室模型-統(tǒng)計矩分析，擬合結果顯示：頭孢曲松在家兔膽汁中的分布符合二房室模型，頭孢曲松峰濃度為(1509.20±584.60)μg/ml，半衰期為(3.29±0.62)h。見表2。

3討論

肝膽系統(tǒng)感染時合理選用抗生素應符合以下基本原則：①抗生素對致病菌敏感：抗生素的抗菌譜和當時當?shù)氐募毦退幥闆r是選擇抗生素主要的依據(jù)。應選擇對致病菌有較強活性、細菌耐藥性較少的廣譜抗生素；②抗生素在膽汁中濃度高：抗菌治療的最終目的是根除特定感染部位的微生物致病菌，這是通過在該部位達到和維持一定的抗菌藥物濃度來實現(xiàn)的，藥物濃度要達到或超過最低抑菌濃度（MIC）[6]。因而藥物的療效及抗菌活性取決于感染部位的藥物濃度。故肝膽系統(tǒng)感染時首選能在肝、膽組織和膽汁中形成較高濃度的抗菌藥物；③藥物的毒副作用小，盡可能經濟實惠。關于藥物的敏感性和毒副作用問題已受到廣泛重視，在臨床實踐中大都根據(jù)具體實際情況選用比較理想的藥物。因此在治療膽道感染選用抗生素時，除了應考慮藥物對致病菌的敏感性和殺菌力、血藥濃度、毒副作用等因素外，該抗生素在膽汁中的濃度非常重要。只有藥物的膽汁濃度高且對致病菌敏感，在膽道感染治療中才能達到好的效果[5]。頭孢曲松殺菌力強，毒副作用小，對大多數(shù)G＋和G－菌敏感，是治療膽道感染的常用藥物之一。目前關于頭孢曲松藥動學方面的資料絕大部分偏重于血藥濃度，而膽汁中的藥物濃度及半衰期等藥動學參數(shù)卻鮮有報道。

每種抗菌藥物由于藥物成分結構的不同而排泄途徑不一，膽汁中的藥物濃度與其脂溶性、蛋白結合程度、分子量等經肝細胞分泌相關因素有關。少數(shù)抗生素主要經肝膽排泄，部分經肝膽排泄的抗生素比較多，有的能在肝膽組織和膽汁中形成超高濃度，但有些抗生素則很少進入肝膽系統(tǒng)。由于抗生素在肝膽組織中的穿透力具有較大的差異，因而了解抗菌藥物在膽汁中的穿透力，能指導臨床上肝膽系統(tǒng)感染時正確選用在肝膽中分布較好、能達到有效治療濃度的抗菌藥物。本文采用HPLC法測定家兔膽汁中頭孢曲松的濃度，HPLC法具有高效、快速、準確、靈敏度高，且重現(xiàn)性好的優(yōu)點[6]。研究結果顯示，通過靜脈注射給藥后頭孢曲松在家兔膽汁中迅速分布，膽汁中藥物峰濃度為(1509.20±584.60)μg/ml；達峰時間為(0.036±0.094)h，消除半衰期為(3.31±0.59)h。給藥后8h膽藥濃度仍超過大多數(shù)膽道感染常見病原菌的最低抑菌濃度[7]。另外，本實驗觀測到全組7只實驗家兔中有3只家兔達最大峰濃度之后出現(xiàn)一個或多個小高峰，提示頭孢曲松在部分家兔膽道中的濃度并非完全呈線性下降，而是在有上升的波動中逐漸消除，原因可能是藥物不斷在家兔體內再分布后經肝膽系統(tǒng)排泄所致。可見， 頭孢曲松有大量原形藥物經膽道排泄，在膽汁中具有很高濃度且有效作用時間長，可作為預防和治療膽道感染較好的藥物。

參考文獻：

[1]Westphal JF， Brogard JM. Biliary Tract Infections-A Guide to Drug Treatment[J]. Drugs， 1999，57 (1): 81-91

[2]中華醫(yī)學會外科學分會膽道外科學組. 急性膽道系統(tǒng)感染的診斷和治療指南(2011版) [J]. 中華消化外科雜志，2011，10(1): 9-13.

[3]Leone M， Albanese J， Tod M， et al. Ceftriaxone (1 g intravenously) penetration into abdominal tissues when administered as antibiotic prophylaxis during nephrectomy[J]. J Chemother，2003，15(2):139-142.

[4]鄭驚雷，梁力建，黃文靜，等.高效液相色譜法測定膽汁中美羅培南的濃度[J].中國抗生素雜志，2007，32（9）：553-555，574

[5]鄭驚雷，梁力建，賴佳明. 膽道感染病原菌及其對抗生素敏感性變化的研究[J].中國實用外科雜志，2005，25（2）:80-82.

[6]徐叔云，卞如濂，陳修，主編.藥理實驗方法學[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002:740-742.

[7]Tanaka A， Takada T， Kawarada Y， et al. Antimicrobial therapy for acute cholangitis: Tokyo Guidelines[J]. J Hepatobiliary Pancreat Surg，2007， 14(1):59-67.編輯/哈濤