摘要：目的研究白芍炮制過(guò)程中，浸煮時(shí)間對(duì)芍藥苷含量的影響。方法采用高效液相色譜法測(cè)定芍藥苷含量，比較不同浸煮時(shí)間下，芍藥苷含量的變化；色譜條件：Xtimate C18(4.6×250mm，5μm)；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；流速：1 mL/min。結(jié)果在20.4~102 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9993，n=5），平均回收率96.124%，RSD=2.29%（n=5）；白芍在炮制過(guò)程中，浸煮時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)芍藥苷的含量存在較大影響。結(jié)論該方法不受其他成分的干擾，簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，能用于芍藥苷含量的測(cè)定，通過(guò)篩選合適的浸煮時(shí)間，有效提高了白芍藥材的品質(zhì)。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；浸煮時(shí)間；芍藥苷；含量測(cè)定

Effect of Processing in the Process of Digestion Time for Content of Main Components of Peony

SU Zuo-lin

(Guangxi Lingfeng Pharmaceutical Co.， Ltd.，Hezhou 542800，Guangxi，China)

Abstract：ObjectiveTo establish the different time of steeping and boiling affect the content of paeoniflorin in White Paeony Root. MethodsUse High Performance Liquid Chromatography to determine the content of paeoniflorin， compare with different time of steeping and boiling that the variation of the content of paeoniflorin. chromatographic condition:Xtimate C18(4.6mm×250mm，5μm); moving phase: acetonitrile-0.1%phosphoric acid(14:86) column temperature: 30℃. determine wavelength:230nm.flow rate:1mL/min. ResultsThere is a good linear relation during 20.4~102μg∕mL（r=0.9959，n=5），the average recovery rate 96.124%，RSD=2.29%（n=5）；the procedure of White Paeony Root processing，differenttime of steeping and boiling have a great effect on the content ofpaeoniflorin in White Paeony Root. ConclusionAs a result of other composition don't interference with the process ，it is accurate，simple and convenientant.For this reason ，the process can use to determine the content ofpaeoniflorin .

Key words：High performance liquid chromatography; Soaking time; Paeoniflorin; Content determination白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall的干燥根?？?、甘、澀，微寒。具有收斂止血，消腫生肌的功效，用于頭暈、脅痛、腹痛、四肢攣痛、血虛萎黃、月經(jīng)不調(diào)、自汗等[1]，主產(chǎn)于安徽、四川等地[2]。目前，多用芍藥苷的含量及總苷含量控制芍藥總苷質(zhì)量，芍藥苷為單萜類化合物，是芍藥的主要活性成分，具有水溶性，在芍藥炮制過(guò)程中需經(jīng)過(guò)沸水浸煮，控制浸煮時(shí)間對(duì)藥材中芍藥苷的保存具有重要意義。10版藥典一部的藥材炮制通則中規(guī)定[3]，凈藥材加水或液體輔料共煮至容易完全被吸盡，或切開內(nèi)無(wú)白心時(shí)，取出，干燥。但實(shí)際操作過(guò)程中炮制中浸煮時(shí)間過(guò)久芍藥苷隨浸煮液流失，或浸煮時(shí)間過(guò)短未能使藥材中蛋白質(zhì)完全變性導(dǎo)致的代謝損失。因此，本論文對(duì)于白芍不同浸煮時(shí)間下芍藥苷的含量進(jìn)行了測(cè)定，比較得出合適的浸煮時(shí)間，報(bào)道如下。

1儀器與試藥

1.1儀器 Agilent 1200液相色譜儀（美國(guó)安捷倫公司，四元泵，可變波長(zhǎng)檢測(cè)器G1314B），電子分析天平，KQ-100DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），艾科浦超純水系統(tǒng)AFZ-1001-U(艾科浦公司)。

1.2試劑和藥品 芍藥苷對(duì)照品（paeoniflorin。含量≥98%，上海金穗生物科技有限公司，批號(hào)：20130307），甲醇（美國(guó)TEDIA公司，色譜純），乙腈（美國(guó)TEDIA公司，色譜純），甲醇（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，分析純），乙醇（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，分析純），磷酸（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，分析純），水為艾科浦純水系統(tǒng)制備的超純水。白芍（購(gòu)于安徽省亳州），經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)賽恩斯新醫(yī)藥學(xué)院生藥教研室苑敏副教授鑒定為毛茛科植物白芍。

1.3方法與結(jié)果

1.3.1色譜條件 Xtimate C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；流速：1 mL/min。理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)≥2000。色譜圖見圖1、圖2。

1.3.2對(duì)照品溶液制備 精密稱取3.12 mg芍藥苷對(duì)照品，置于50 mL容量瓶中加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，過(guò)微孔濾膜，取續(xù)濾液，即得。

1.3.3供試品溶液的制備 分別取5種浸煮時(shí)間不同的藥材粉末各0.1 g，精密稱定，置50 mL容量瓶中，加稀乙醇（取529 mL加水稀釋至1000 mL即得。在20℃時(shí)含乙醇應(yīng)為49.5%~50.5%）35 mL，超聲處理（頻率45 KHz）30 min，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，用微孔濾膜（0.22 μm）過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。

1.3.4線性范圍考察 精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液2、4、6、8、10 μL依次進(jìn)樣，以進(jìn)樣量(X)為橫坐標(biāo)，峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，得回歸方程Y=12.182X-64.950（r=0.9993，n=5）。表明芍藥苷在20.4~102 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

1.3.5方法學(xué)考察

1.3.5.1重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品6份，分別測(cè)定含量，計(jì)算得RSD為1.80%，表明實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好。

1.3.5.2穩(wěn)定性試驗(yàn) 取未經(jīng)過(guò)浸煮的芍藥供試品溶液，精密吸取10 μL，按上述2.1色譜條件在0，2，4，8，12，24 h依次測(cè)定芍藥苷峰面積，計(jì)算得RSD為0.68%，表明實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性良好。

1.3.5.3加樣回收率實(shí)驗(yàn) 采用加樣回收法，取已知含量的白芍藥材5份，分別添加不同量的芍藥苷對(duì)照品，按上述色譜條件測(cè)定，根據(jù)回歸方程計(jì)算得平均回收率為96.12%，RSD為2.29%。

1.3.5樣品測(cè)定 分別取5種浸煮時(shí)間不同的藥材粉末各1.0 g，精密稱定，按上述供試品溶液制備方法操作，制得供試品溶液各取10 μL，注入高效液相色譜儀，按上述1.3.1中色譜條件測(cè)定，見表1、圖3。

圖3 芍藥苷含量與浸煮時(shí)間關(guān)系曲線

3討論

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以芍藥苷含量Y(%)對(duì)浸煮時(shí)間X(min)進(jìn)行回歸分析，得回歸方程Y=-0.0019X2+0.0802X+3.9427。芍藥藥材中芍藥苷的含量和浸煮時(shí)間成二次函數(shù)關(guān)系，浸煮時(shí)間以20 min前后最為合適，此時(shí)藥材中芍藥苷含量較高，炮制出的藥材品質(zhì)相對(duì)較高。

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[3]鮑邢杰，宿樹蘭.對(duì)《中國(guó)藥典》2010 版Ⅰ部中白芍中芍藥苷含量測(cè)定方法的探討[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2012，23(5):1309.編輯/肖慧