摘要：目的探討EB病毒的Rta蛋白抗體IgG（Rta/IgG）在珠海地區(qū)鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)患者的臨床診斷價值。方法收集75例病理證實未經(jīng)治療的NPC患者血清、100例健康成人血清及肝癌、胃癌、肺癌、淋巴瘤、宮頸癌血清各19例。檢測①Rta/IgG在NPC、肝癌、胃癌、肺癌、淋巴瘤、宮頸癌、健康人群的表達水平；②Rta/IgG與鼻咽癌臨床分期關(guān)系；③Rta/IgG、VCA/IgA、Rta/IgG聯(lián)合VCA/IgA對鼻咽癌檢測率。結(jié)果①NPC患者Rta/IgG陽性率遠高于健康人水平，具有顯著性差異（P<0.01）；并高于其他癌種的陽性率，具有顯著性差異（P<0.01）。②Rta/IgG的表達與NPC臨床分期無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。③Rta/IgG、VCA/IgA及VCA/IgA聯(lián)合Rta/IgG檢測NPC的敏感度分別為81．3％、89．3％、94.6％；特異度分別為93％、84％、80%。結(jié)論①Rta/IgG是NPC早期輔助診斷及篩查的可靠的血清學(xué)指標(biāo)。②Rta/IgG的表達與NPC臨床分期無關(guān)。③Rta/IgG聯(lián)合VCA/IgA檢測提高了NPC的篩檢和診斷靈敏度。

關(guān)鍵詞：EB病毒Rta/IgG；VCA/IgA；鼻咽癌；診斷

To Evaluate the Clinical Value of Epstein-Barr Virus (EBV)'s Rta/IgG in the Diagnosis of Nasopharyngeal Carcinoma (NPC) Patients in Zhuhai

XU Qin，ZHENG Shui-hua，LIN Su-xiang

(Clinical Laboratory，The People's Second Hospital of Zhuhai City，Zhuhai 519000，Guangdong，China)

Abstract：ObjectiveTo evaluate the clinical value of Epstein-Barr virus (EBV) Rta/IgG in the diagnosis of nasopharyngeal carcinoma (NPC) patients in Zhuhai. Methods Rta/IgG and VCA/IgA was detected by enzyme-linkedimmunosorbent assay in 75 NPC patients，100 healthy adults and 60patients with different tumor.Results(1)Significant difference of Rta/IgG positive rate between NPC group and the healthy control group (P<0.01) as well as between NPC group and other carcinoma groups(P<0.01).(2)The expression levels of Rta/IgG in NPC patients serum were irrelative to the clinical stage of the tumor(P<0.05).(3)The sensitivity rates were 81.3% ，88.9%， 94.6% for Rta/IgG ，VCA/IgA ， Rta/IgG or VCA/IgA respectively， while the specificity rates were 94.6%，84%，80% respectively.ConclusionRta/IgGis a sensitive and specific serologic parameter for NPC diagnosis .but it is not a proper maker for evaluating clinical stage of NPC.The combined detection of Rta/IgG and VCA/IgA has referential value in diagnosing nasopharyngeal carcinoma patients in Zhuhai.

Key words：EBV Rta/IgG;VCA/IgA;Nasopharyngeal carcinoma(NPC);Diagnosis鼻咽癌（NPC)是我國華南地區(qū)的常見腫瘤，素有“廣東瘤”之稱。廣東省每年新發(fā)病例約5000例。NPC是一種源于鼻咽部上皮組織的一種惡性程度較高的腫瘤。篩選特異性的NPC將有助于NPC早發(fā)現(xiàn)、早診斷及早治療，提高NPC患者生存率。NPC發(fā)病與EB病毒密切相關(guān)，近年來研究表明，EB病毒裂解期基因BRLF1編碼蛋白Rta （RLF1transcription activator)是鼻咽部細胞開始分裂癌變的特異性分子靶標(biāo)，在NPC患者體內(nèi)可檢測出高水平Rta/IgG抗體表達，因此Rta/IgG被認(rèn)為是NPC篩查和診斷的新指標(biāo)[1-3]。2009年以來我科開展Rta/IgG和VCA/IgA聯(lián)合檢測，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 標(biāo)本來源收集2009年1月~2014年4月來我院確診未經(jīng)治療的NPC患者血清標(biāo)本75例，其中男性59例，女性16例，年齡20~82歲，臨床分期I期6例，II期30例，III期27例，Ⅳ期12例。全部病例均經(jīng)病理組織學(xué)檢查獲得確診。健康對照組為健康體檢者的血清標(biāo)本100例，其中男性69，女性31。年齡18~80歲。肝癌、胃癌、肺癌、淋巴瘤、乳腺癌、宮頸癌血清各19例。

1.2試劑 EB病毒Rta-IgG試劑盒（同聽生物技術(shù)有限公司）。VCA-IgA試劑盒（北京貝爾生物工程公司）

1.3方法 嚴(yán)格按試劑盒說明書進行操作。EB病毒VCA-IgA S/CO≥1.1為陽性，Rta-lgG S/CO≥1.0為陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 SPSS13.0軟件包進行統(tǒng)計分析；計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 Rta-IgG在不同人群的表達 檢測鼻咽癌、肝癌、胃癌、肺癌、淋巴瘤、乳腺癌、宮頸癌、健康人血清中Rta/IgG表達，結(jié)果表明NPC患者陽性率遠高于正常人水平，具有顯著性差異（P<0.01）；并且NPC患者檢出陽性率高于所有其他癌種的陽性率，具有顯著性差異（P<0.01）。Rta/IgG陽性檢出率在NPC組最高(81.3%)，健康人組（5.0%），其他癌種的陽性率值與正常人無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

2.2鼻咽癌患者血清Rta/IgG表達與臨床分期關(guān)系 比較不同臨床分期血清中Rta/IgG的表達，結(jié)果表明：鼻咽癌患者血清中Rta/IgG與臨床分期無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表2。

2.3 Rta/IgG、VCA/IgA及Rta/IgG聯(lián)合VCA/IgA檢測對鼻咽癌的檢出率比較 Rta/IgG、VCA/IgA及Rta/IgG聯(lián)合VCA/IgA檢測鼻咽癌患者血清，檢出率分別為：81.3%、88.0％、94.6％，見表3。

2.4 Rta/IgG、VCA/IgA及Rta/IgG聯(lián)合VCA/IgA檢測對鼻咽癌的應(yīng)用價值比較

Rta/IgG、VCA/IgA及Rta/IgG聯(lián)合VCA/IgA檢測，敏感度分別為81.3%、89.3％、94.6％；特異性分別為93%、84%、80%；Rta/IgG抗體和VCA/IgA抗體聯(lián)合檢測使診斷鼻咽癌的敏感度提高到94.6%高于單項Rta/IgG及單項VCA/IgA檢測，見表4。

3討論

EB病毒感染與鼻咽癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗EB病毒衣殼抗原(EB virus capsid，antigen，VCA)、抗早期抗原(early antigens，EA)的IgA抗體、EBV核抗原檢測已普遍應(yīng)用于鼻咽癌篩查、診斷、療效監(jiān)測及預(yù)后判斷。VCA/IgA抗體雖有較好的敏感性，但特異性較差，在健康人群有較高的假陽性率，不適于鼻咽癌篩查。EBV核抗原1（NA-l）檢測鼻咽癌，靈敏度較低，易出現(xiàn)漏檢；EA/IgA抗體檢測鼻咽癌具有較高特異性，但靈敏度較差[5]。近年研究發(fā)現(xiàn)鼻咽癌患者體內(nèi)可檢測出高水平的EB病毒BRLF1基因表達的Rta蛋白。Feng等[6]研究證明，ELISA法檢測Rta/lgG抗體可以作為檢測EB病毒的另一個新的指標(biāo)，提出Rta/lgG抗體可能是NPC腫瘤診斷的又一標(biāo)志物。

本文表1結(jié)果表明：①鼻咽癌組患者的Rta/lgG抗體陽性率顯著高于健康對照組具有顯著性差異（P<0.01）；②Rta/lgG在NPC中的表達高于其他腫瘤的陽性率，具有顯著性差異（P<0.01）。這兩點證實Rta/lgG是鼻咽癌血清學(xué)診斷的重要標(biāo)志物，可以用于鼻咽癌的輔助診斷。2006年曾毅院士用ELISA方法，發(fā)現(xiàn)NPC組的Rta/IgG抗體陽性率檢出率與健康組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。朱文良等也證實Rta/lgG水平在鼻咽癌陽性率高于其他癌種的陽性率，具有顯著性差異；肝癌、胃癌、肺癌、淋巴瘤患者Rta/lgG表達無顯著性差異。上述結(jié)果進一步證明血清中的Rta/IgG抗體是NPC診斷的重要標(biāo)志物，對NPC的篩檢和診斷有很高的靈敏度和特異性。本文表2結(jié)果表明:Rta/IgG并不隨著鼻咽癌患者的臨床分期越高而表達增加，提示鼻咽癌患者放療前血清Rta/IgG表達水平與臨床分期無關(guān)，結(jié)果與文獻報道一致[7-8]。由于臨床樣本數(shù)量有限，有待進一步的研究。本文表3結(jié)果表明Rta/IgG敏感度分別為81.3%，低于蔡永林[9]等報道的90.5%及朱文良[7]報道的82.1%，可能是由于所選用病例的地域間的差異，或本研究的病例數(shù)較少，有待進一步探討。表3結(jié)果表明VCA/lgA檢出率為89.3％，高于Rta/IgG抗體檢出率為81.3%，早基因抗原Rta/IgG抗體和抗晚期抗原VCA/IgA抗體二種標(biāo)志物聯(lián)合檢出率為提高到94.6％[5]，提示兩種標(biāo)志物聯(lián)合檢測，互相彌補缺陷，更大范圍地反映EB病毒溶解感染期的抗原表達，因此進行鼻咽癌篩查應(yīng)首選VCA/IgA+Rta/IgG聯(lián)合檢測，若用一種指標(biāo)進行鼻咽癌篩查應(yīng)首選VCA/lgA。本文表4結(jié)果表明VCA/lgA雖然敏感性較好（89.3%），但其在健康人群里有較高檢出率（16％），提示特異性較差，對鼻咽癌診斷還存在明顯不足，Rta/IgG的特異性高（93%）。Rta是EB病毒由潛伏感染至裂解癌變過程中早期基因表達產(chǎn)物，可捕捉鼻咽癌癌變發(fā)生的最早時刻，故應(yīng)用Rta/IgG抗體檢測鼻咽癌特異性高，是鼻咽癌臨床早期輔助診斷的首選。我們認(rèn)為VCA/IgA和Rta/IgG組合是鼻咽癌臨床血清學(xué)篩查和診斷非常有效的組合之一。

綜上所述，Rta/IgG是NPC早期輔助診斷及篩查的可靠的血清學(xué)指標(biāo)，對NPC的篩檢和診斷有較高的靈敏度和特異性。Rta/IgG聯(lián)合VCA/IgA檢測對NPC的篩檢和診斷有很高的靈敏度，對珠海地區(qū)NPC患者的診斷具有重要參考價值，Rta/IgG的表達與NPC臨床分期無關(guān)，Rta/IgG與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展、浸潤及轉(zhuǎn)移相關(guān)性不清，值得進一步探索。

參考文獻：

[1]Feng P，Ren L，C，Liu D，et al.Expression of EBV lytic gene BRLF1in nasopharyngeal carcinoma: potential use in diagnosis[J].Gen Virol，2000，81 (Pt 10) :2417-2423.

[2]Feng P，Chan SH，Soo MY，et al. Antibody response to EBV Rta protein in patients with nasopharygeal carcinoma.Cancer，2001，92 (7):1872-1880

[3]任軍，張曉梅，張曉光，等.以Rtac2/3為抗原用于鼻咽癌患者檢測的初步研究[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2006，26(11):1057-1059.

[4]吳文愉，陳國雄，吳子柏，等.早期發(fā)現(xiàn)和篩選鼻咽癌的EB病毒血清學(xué)檢測[J].癌癥，2006，25(2):250-256.

[5]陳文思，曹開源.EB病毒重組抗原Rta蛋白的表達及其在鼻咽癌審查中的應(yīng)用[D].中山大學(xué)碩士學(xué)位論文，2010.

[6]FengP，Chan SH，Rachel Soo MY，ct al. Antibody response to Epstci-Barr virus Rta protein in patients with nasopharngcal carcinoma[J]. Cancer，2001，92(7):1872-1880.

[7]朱文良，梁新強，章陽，等.EB病毒Rta蛋自抗體IgG在鼻咽癌診斷中的應(yīng)用[J].中國癌癥防治雜志，2009，1(3):211-213.

[8]蔡永林，鄭裕明，成積儒，等.EB病毒Rta/IgG.NA1/IgA.VCA/IgA抗體與鼻咽癌分期的關(guān)系[J].南方醫(yī)科人學(xué)學(xué)報，2010.30(3):509-511.

[9]蔡永林，鄭裕明，王偉，等.EB病毒抗體聯(lián)合檢測在鼻咽癌血清學(xué)診斷中的價值[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2010，30(12):2746-2748.編輯/肖慧