摘要：目的 探討高白細(xì)胞急性髓系白血?。╤yperleukocytic acute myeloid leukemia，HAML）患者治療前后血清可溶性細(xì)胞間粘附分子-1（sICAM-1）、可溶性血管細(xì)胞粘附分子（sVCAM-1）和可溶性CD44分子（sCD44）的表達(dá)水平及其臨床意義。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA），對(duì)15例初診高白細(xì)胞急性髓系白血?。╓BC>100×109/L）和40例非高白細(xì)胞急性髓系白血?。╪on-hyperleukocytic acute myeloid leukemia，NHAML）（WBC<100×109/L）患者治療前后的血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平進(jìn)行檢測(cè)并與正常人比較。結(jié)果 ①HAML組及NHAML組患者化療前血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，化療后，兩組中骨髓達(dá)到緩解者sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平下降，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；②化療前，HAML組患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平顯著高于NHAML組患者血清的水平（P<0. 05），HAML組緩解率40%低于NHAML組緩解率72.5%（P<0. 05）。結(jié)論 對(duì)于HAML患者，檢測(cè)血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平，有助于指導(dǎo)臨床治療，為病情監(jiān)測(cè)、療效觀察及預(yù)后判定提供了有價(jià)值的臨床指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：急性髓系白血??；高白細(xì)胞；sICAM-1；sVCAM-1；sCD44

高白細(xì)胞急性髓系白血?。℉AML）屬急性白血病中的高危類型，病情兇險(xiǎn)預(yù)后極差，目前白細(xì)胞單采術(shù)聯(lián)合化療是一種安全、有效的治療措施，但完全緩解病例仍是十分稀少，因此至今仍缺乏準(zhǔn)確地早期判斷其預(yù)后的指標(biāo)。目前國內(nèi)外對(duì)粘附分子在NHAML中的表達(dá)水平及臨床意義研究較多，但對(duì)其在HAML中相關(guān)報(bào)道較少，本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)可溶性粘附分子sICAM-1、sVCAM-1和sCD44在HAML治療前后的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，為臨床對(duì)HAML的診斷、病情進(jìn)展、療效及預(yù)后判斷提供相關(guān)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料

1.1.1 HAML組 15例HAML患者（非AML-M3）為2013年1月～2014年4月在濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院患者（WBC>100×109/L），男性8例，女性7例，年齡10～62歲，平均年齡36.8歲。其中M1 2例、M2 4例、M4 3例、M5 6例。NHAML組：40例NHAML患者（非AML-M3）為同時(shí)期隨機(jī)抽取的住院患者（WBC<100×109/L），男性24例，女性16例，年齡8～65歲，平均年齡34. 5歲。其中M1 5例、M2 10例、M4 11例、M5 14例。所有病例均符合張之南《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》第三版[1]，并排除早期死亡（Early death）、其他惡性血液病、心腦血管病、肝腎疾病、孕婦或哺乳期婦女。正常對(duì)照組：為門診健康體檢人群20例，其中男性11例，女性9例，年齡15～61歲，平均年齡38.3歲，均無感染性疾病，無心腦血管疾病，無肝腎疾病。

1.1.2聯(lián)合誘導(dǎo)緩解治療方案：HAML組患者采用羥基脲或羥基脲+阿糖胞苷降低白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC<50×109/L）后，與NHAML組患者應(yīng)用DA方案（柔紅霉素+阿糖胞苷）或HA方案（高三尖杉酯堿+阿糖胞苷）化療。

1.1.3療效判定 化療1個(gè)療程后行療效判定，評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)按張之南《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》第三版[1]，其中HAML組達(dá)到緩解（完全緩解+部分緩解）6例，NHAML組達(dá)到緩解（完全緩解+部分緩解）29例。

1.2方法 所有AML組患者分別在治療前、化療1療程后抽取清晨空腹靜脈血2mL，正常對(duì)照組直接抽取清晨空腹靜脈血2mL，注入無抗凝劑試管內(nèi)，2h內(nèi)，以3000 r/min，離心10 min，收集血清，于-20℃凍存待測(cè)。

血清sICAM-1、sCD44和sVCAM-1水平檢測(cè)：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），其中sICAM-1、sVCAM-1試劑盒為美國RD公司產(chǎn)品，代購自上海繼錦化學(xué)科技有限公司，sCD44試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司，操作方法嚴(yán)格按試劑盒說明進(jìn)行。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18. 0統(tǒng)計(jì)軟件包完成，組間比較采用方差分析、t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料均用（x±s）表示，P<0. 05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HAML組患者治療前后的血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平比較

HAML組共15例，治療前患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平較正常對(duì)照組顯著升高（P<0.05），化療1個(gè)療程后，達(dá)到緩解（完全緩解+部分緩解）共6例，緩解率40%，三種粘附分子表達(dá)水平顯著下降，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而與正常對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；化療后未緩解者9例，三種粘附分子表達(dá)水平下降，與治療前比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而與正常對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 NHAML組患者治療前后的血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平比較 NHAML組共40例，治療前患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平較正常對(duì)照組顯著升高（P<0.05），化療1個(gè)療程后，達(dá)到緩解（完全緩解+部分緩解）共29例，緩解率72.5%，三種粘附分子表達(dá)水平顯著下降，與治療前比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與正常對(duì)照組比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；化療后未緩解者11例，三種粘附分子表達(dá)水平下降，與治療前比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），與正常對(duì)照組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 HAML組患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平與NHAML組患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平治療前后比較 治療前，HAML組患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平高于NHAML組患者血清的水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），HAML組緩解率40%低于NHAML組緩解率72.5%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

細(xì)胞粘附分子（cell adhesion molecules，CAM）是眾多介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間相互接觸和結(jié)合分子的統(tǒng)稱，位于細(xì)胞表面或細(xì)胞基質(zhì)中，以受體和配體結(jié)合的形式發(fā)揮作用，AML細(xì)胞表達(dá)不同的粘附分子，粘附特性改變可能是白血病細(xì)胞異常增殖的原因，可溶性粘附分子（soluble adhesion molecules，sAM）是一類呈溶解狀態(tài)的粘附分子，仍具有結(jié)合抗原或受體的功能。正常狀態(tài)下sAM的含量相對(duì)穩(wěn)定，某些疾病狀態(tài)下可出現(xiàn)sAM的升高，其含量的改變與疾病的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后及復(fù)發(fā)呈一定的相關(guān)性。因此，檢測(cè)sAM的水平可能成為監(jiān)測(cè)某些疾病狀態(tài)的指征。

Syrigos等[2]檢測(cè)霍奇金淋巴瘤患者血清中的sICAM-1和sVCAM-1水平，發(fā)現(xiàn)初診患者血清水平均增高，且隨化療的進(jìn)行水平均逐漸下降。Graf等[3]在105例初發(fā)白血病患者中采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定骨髓原始細(xì)胞ICAM-1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)ICAM-1的表達(dá)水平較正常對(duì)照組明顯增高。李大啟等[4]的研究表明，多種惡性淋巴增殖性疾病包括惡性淋巴瘤、慢性淋巴細(xì)胞白血病及急性淋巴細(xì)胞白血病患者血清sICAM-1水平顯著升高。Hatzistilianou[5]等研究發(fā)現(xiàn)，血清sVCAM-1水平可用作監(jiān)測(cè)ALL患者活動(dòng)性及對(duì)治療的反應(yīng)，并可作為預(yù)測(cè)早期復(fù)發(fā)的指標(biāo)。國外研究表明[6]，sCD44在惡性腫瘤治療前和疾病進(jìn)展時(shí)升高，達(dá)完全緩解后降為正常。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，HAML組及NHAML組治療前患者血清的sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平均較正常對(duì)照組顯著升高，經(jīng)治療達(dá)緩解后，三種粘附分子水平顯著下降，與治療前比較明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在本實(shí)驗(yàn)中，白細(xì)胞計(jì)數(shù)越高者，血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平越高，其緩解率越低，治療效果也越差，而聯(lián)合化療可以降低粘附分子表達(dá)水平，提示，對(duì)于治療前高水平者，在治療上有機(jī)結(jié)合粘附分子靶向治療可望進(jìn)一步提高療效。因此，治療前血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44高水平可作為判斷 AML 預(yù)后不良指標(biāo)之一，治療后粘附分子表達(dá)水平的變化可反映AML不同的緩解程度。而且，治療后血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平反彈，是否可早期預(yù)示髓外浸潤或早期復(fù)發(fā)，還有待于進(jìn)一步大樣本隨訪監(jiān)測(cè)觀察研究。

綜上所述，動(dòng)態(tài)檢測(cè)血清sICAM-1、sVCAM-1和sCD44水平對(duì)于AML患者，特別是HAML患者的診斷、病情進(jìn)展、療效及預(yù)后判斷有一定的幫助。

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編輯/哈濤