摘要：目的 分析DC-CIK細(xì)胞治療晚期惡性腫瘤的臨床意義。方法 對(duì)我院治療的50例Ⅲ、Ⅳ期惡性腫瘤患者化放療后1個(gè)月行DC-CIK細(xì)胞治療患者資料進(jìn)行回顧性分析，對(duì)接受DC-CIK治療4周期前后患者的癥狀、腫瘤負(fù)荷及T細(xì)胞亞群結(jié)果進(jìn)行隨訪(fǎng)觀察，評(píng)價(jià)治療有效率。結(jié)果 DC-CIK治療前后腫瘤客觀緩解率（ORR）為23.8%，CD3、CD4、CD8、CD16、CD56均有明顯的升高，生活質(zhì)量評(píng)分顯著改善，僅少數(shù)患者輸注過(guò)程中出現(xiàn)發(fā)熱，未見(jiàn)其他不良反應(yīng)。結(jié)論 采用DC-CIK細(xì)胞治療晚期惡性腫瘤患者能改善患者免疫功能，改善患者生活治療，延長(zhǎng)生存期，具有一定的臨床使用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：晚期惡性腫瘤；DC-CIK；過(guò)繼免疫治療

1資料與方法

1.1一般資料 選擇2012年9月～2013年10月在我院行放化療治療后1個(gè)月的晚期惡性腫瘤患者，Karnofsky評(píng)分>60分。

1.2 DC-CIK細(xì)胞制備與治療

1.2.1 CIK細(xì)胞的制備 采集PBMC，經(jīng)人淋巴細(xì)胞分離液密度梯度分離（2 000 r/min，離心20 min）。取白膜層細(xì)胞， 以生理鹽水洗滌3次，懸浮于含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×106/mL，第0 d加入IFN-γ 1000 U/mL，37℃5%CO 孵箱中培養(yǎng)。24 h后加入鼠抗人CD3單克隆抗體50 ng/mL、IL-1 100 U/mL、IL-2 500 U/mL，繼續(xù)培養(yǎng)。每3 d半量換液，補(bǔ)足細(xì)胞因子。

1.2.2 DC細(xì)胞的制備 在1.2.1獲得的貼壁的單個(gè)核細(xì)胞中加入含GM-CSF 1000 U/mL、rhIL-4 1000 U/mL的AIM2V培養(yǎng)基，在37℃、體積分?jǐn)?shù)為5% 的CO2中培養(yǎng)，換液1次/3 d。第3 d將腫瘤抗原加入DC培養(yǎng)液內(nèi)，第5 d加入腫瘤壞死因子2α（TNF2α）1000 U/rnl，共培養(yǎng)7～10 d。DC細(xì)胞皮下注射地1、3、5、7 d，CIK細(xì)胞回輸?shù)?、7 d。DC-CIK細(xì)胞治療4周期，1次/月。

1.3 T細(xì)胞亞群分析 空腹取5 mL靜脈血抗凝，利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行T細(xì)胞亞群檢測(cè)。

1.4 隨訪(fǎng) 所有入組病例全部隨訪(fǎng)，至2013年10月，隨訪(fǎng)6～12個(gè)月，中位隨訪(fǎng)10個(gè)月。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（x±s）表示，比較采用兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn)；生存資料分析采用Kaplan-Meier法及Log rank檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

2.1 DC-CIK細(xì)胞治療前后免疫指標(biāo)的變化 患者治療前外周血CD3、CD4、CD8 等免疫指標(biāo)均明顯降低，顯示晚期惡性腫瘤患者存在著嚴(yán)重細(xì)胞免疫功能缺陷。經(jīng)DC-CIK治療后上述指標(biāo)數(shù)值顯著提高（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.2治療后實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià) 50例患者均可評(píng)價(jià)療效。其中1例 CR（腎癌患者），9例PR （非小細(xì)胞肺癌4例，乳腺癌2例，胃癌1例，結(jié)腸癌1例，鼻咽癌1例），35例SD，5例PD （肝癌3例，小細(xì)胞肺癌1例，胰腺癌1例），ORR為20.0%。

2.3不良反應(yīng)情況 絕大部分患者輸注DC-CIK過(guò)程中無(wú)明顯不良反應(yīng)，僅5例出現(xiàn)一過(guò)性發(fā)熱，體溫最高為38.8℃，經(jīng)處理后很快緩解，未影響治療。

2.4癥狀改善情況 研究組平均提高17分，其中改善30例，穩(wěn)定15例，進(jìn)展5例。生物治療后kamofsky評(píng)分總提高率分別為90.0%。

3討論

細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞是繼淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞、腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞后的新型細(xì)胞，其增殖能力和殺傷活性顯著高于LAK細(xì)胞，主要效應(yīng)細(xì)胞是CD3+CD56+細(xì)胞，是一種安全的輔助治療手段[1]。

DC作為體內(nèi)功能強(qiáng)大的專(zhuān)職抗原遞呈細(xì)胞，在細(xì)胞毒性T細(xì)胞的活化過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用[2]。CIK細(xì)胞和DC聯(lián)合應(yīng)用，不僅可增強(qiáng)免疫效應(yīng)細(xì)胞的抗腫瘤活性，還可以使效應(yīng)細(xì)胞對(duì)腫瘤靶細(xì)胞的殺傷更具特異性。

體外及動(dòng)物研究證實(shí)CIK細(xì)胞具有增殖速度快、殺瘤活性高、殺瘤譜廣、對(duì)正常骨髓造血前體細(xì)胞毒性小等多種優(yōu)勢(shì)。單獨(dú)應(yīng)用CIK等免疫效應(yīng)細(xì)胞進(jìn)行過(guò)繼免疫治療時(shí)，部分患者的治療效果不太理想，這可能與腫瘤患者功能性DC細(xì)胞缺乏有關(guān)。DC作為體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原遞呈細(xì)胞，能誘導(dǎo)出抗原特異性細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng)（Cytotoxic T lymphocyte，C，IIJ），在人抗腫瘤免疫的治療中發(fā)揮了重要的作用。將CIK細(xì)胞和DC細(xì)胞聯(lián)合起來(lái)治療惡性腫瘤，將有助于解除部分腫瘤患者T細(xì)胞的免疫無(wú)能，從而最大程度發(fā)揮其協(xié)同抗腫瘤作用[3-4]。

術(shù)后輔助化療后，體內(nèi)化療敏感的殘存腫瘤細(xì)胞大部分得到清除，但化療會(huì)在一定程度上造成機(jī)體免疫功能的低下，因此化療結(jié)束后是免疫治療的較好時(shí)機(jī)。術(shù)后化療后進(jìn)行CIK細(xì)胞治療可改善患者免疫功能，延長(zhǎng)患者生存期。

晚期惡性腫瘤患者由于機(jī)體一般狀態(tài)差，KPS評(píng)分低，無(wú)法耐受手術(shù)、放療、化療等治療手段，而單純的姑息治療效果又不理想，因此尋找更有效、安全的治療手段成為目前研究關(guān)注的焦點(diǎn)。在眾多的治療手段中，生物治療憑借其獨(dú)特的作用逐漸發(fā)展成為腫瘤綜合治療的第四大模式，作為手術(shù)、放療、化療的有益補(bǔ)充。在這其中以DC-CIK細(xì)胞治療最具代表性，臨床應(yīng)用也最廣泛。本研究中90%晚期惡性腫瘤患者經(jīng)DC-CIK治療后生活質(zhì)量明顯改善，生存期延長(zhǎng)。

綜上所述：DC-CIK治療作為一種新的抗腫瘤方法，有一定的應(yīng)用前景和推廣價(jià)值，值得進(jìn)行更廣泛的臨床研究。

參考文獻(xiàn)：

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編輯/肖慧