摘要：目的 探討CHB（慢乙肝）患者拉米夫定治療過程中HBV DNA定量結(jié)果的變化分析。方法 選取CHB患者254例，按拉米夫定藥物治療時(shí)間長(zhǎng)短的不同進(jìn)行分組，分別采用PCR熒光法進(jìn)行乙型肝炎病毒核酸的定量檢測(cè)，對(duì)測(cè)定獲得的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 拉米夫定治療不同時(shí)間分段的乙肝病毒基因陽(yáng)性率分別為38.89%、52.31%、66.67%、80.00%，隨著拉米夫定藥物治療時(shí)間的延長(zhǎng)，乙肝病毒基因的陽(yáng)性率逐漸上升。結(jié)論 長(zhǎng)時(shí)間應(yīng)用拉米夫定治療慢性乙型肝炎可以導(dǎo)致部分患者HBV DNA定量結(jié)果反彈性升高。

關(guān)鍵詞：慢性乙型肝炎；拉米夫定；HBV DNA定量

拉米夫定作為國(guó)內(nèi)首批的抗病毒藥物之一，因其在抑制病毒方面效果良好、不良反應(yīng)少、患者的耐受性好、價(jià)格適宜以及副作用少等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于臨床治療[1]。拉米夫定抵抗乙肝病毒基因的主要作用機(jī)制是抑制HBVR DNA聚合酶的形成，終止DNA鏈的進(jìn)一步延伸，阻止HBV的復(fù)制，但拉米夫定藥物并不能清除肝細(xì)胞核內(nèi)的cccDNA，cccDNA在體內(nèi)含量雖然很少但其半衰期很長(zhǎng)，因此長(zhǎng)時(shí)間使用拉米夫定可導(dǎo)致HBVR DNAR P區(qū)發(fā)生YMDD變異[2]。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)拉米夫定藥物治療時(shí)間不同的患者進(jìn)行病毒含量檢測(cè)，探討患者抗病毒治療期間乙肝病毒含量變化，為臨床醫(yī)生合理選擇用藥提供有效依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2011年～2014年大連市第六人民醫(yī)院慢性乙型肝炎254例（均為住院患者）；其中男性病例192例，女性病例62例，年齡20～75歲，所有患者均已接受拉米夫定治療不等時(shí)間（1～96w）。入選標(biāo)準(zhǔn)：所有患者進(jìn)行治療前表面抗原陽(yáng)性6個(gè)月（36w）以上，體內(nèi)乙型肝炎病毒含量要大于105拷貝/mL，生化指標(biāo)中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的含量要大于2倍的正常值上限。慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)均參照《慢性乙型肝炎防治指南》（2012版）[3]；排除標(biāo)準(zhǔn)：其中有酒精性肝炎、自身免疫性肝炎、藥物性肝炎、相關(guān)酶類缺乏性肝炎以及其它臟器的炎癥發(fā)作等；以及有妊娠情況、腎臟系統(tǒng)疾病、血液相關(guān)性疾病以及艾滋病等。

1.2實(shí)驗(yàn)室檢查

1.2.1標(biāo)本采集 空腹抽取靜脈血3ml，置于一次性真空采血管后自然凝固待檢。血清標(biāo)本的存放條件為2℃～8℃（72h內(nèi)）。

1.2.2乙型肝炎病毒核酸定量檢測(cè)：由實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀Mx3000P（美國(guó)-ROCHE）測(cè)定。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS19.0對(duì)使用拉米夫定治療不同時(shí)間患者血清的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采取t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采取χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1血清中乙型肝炎病毒定量測(cè)定結(jié)果分析 254例患者在進(jìn)行拉米夫定藥物治療前血清中乙型肝炎病毒含量水平（1.04±0.16）×107，在接受拉米夫定藥物治療96w后，其中有94例患者的乙肝病毒基因轉(zhuǎn)為陰性，其余160例患者乙肝病毒基因仍為陽(yáng)性。將本次選取拉米夫定藥物治療后的患者根據(jù)其治療時(shí)間的長(zhǎng)短進(jìn)行分組后討論，見表1。

2.2對(duì)患者進(jìn)行時(shí)間段分組后，從測(cè)定的結(jié)果可以看出藥物療效的時(shí)間長(zhǎng)短與乙肝病毒基因陽(yáng)性率之間具有相關(guān)性，整體的變化趨勢(shì)為：隨著拉米夫定藥物治療時(shí)間的延長(zhǎng)，乙肝病毒基因的陽(yáng)性率逐漸上升，說明隨著患者治療時(shí)間的不斷增加，發(fā)生耐藥突變的幾率變大，導(dǎo)致患者體內(nèi)病毒含量再次上升，出現(xiàn)反彈，致使陽(yáng)性患者數(shù)增加。

3 討論

本文通過對(duì)拉米夫定治療時(shí)間長(zhǎng)短不同對(duì)乙型肝炎病毒耐藥變化情況進(jìn)行研究分析，對(duì)此次數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)后得出：藥物療效的時(shí)間長(zhǎng)短與乙肝病毒基因陽(yáng)性率之間具有相關(guān)性，整體的變化趨勢(shì)為：不同時(shí)間分段HBV DNA患者陽(yáng)性率分別為38.89%、52.31%、66.67%、80.00%。結(jié)果表明隨著拉米夫定藥物治療時(shí)間的不斷延長(zhǎng)，乙肝病毒基因的陽(yáng)性率逐漸上升，說明隨著患者治療時(shí)間的不斷增加，發(fā)生耐藥突變的幾率變大，導(dǎo)致患者體內(nèi)病毒含量再次上升，出現(xiàn)反彈，致使陽(yáng)性患者數(shù)增加，此實(shí)驗(yàn)結(jié)果與李佳[4]等人研究結(jié)果一致。

傳統(tǒng)治療過程中所應(yīng)用的抗核苷酸類藥物[5]如拉米夫定、恩替卡韋以及類核苷酸類藥物例如阿德福韋酯等，其中以拉米夫定的應(yīng)用最為廣泛。因其長(zhǎng)期治療可以幫助減輕炎癥的發(fā)生進(jìn)展，同時(shí)會(huì)降低肝臟纖維化以及肝硬化發(fā)生率，其對(duì)血清中ALT水平的復(fù)常以及血清中乙肝病毒基因的下降都有顯著效果[6]；然而長(zhǎng)期使用拉米夫定進(jìn)行治療會(huì)導(dǎo)致HBV聚合酶基因YMDD基序突變的產(chǎn)生，變異類型主要為YIDD、YVDD，其變異產(chǎn)生原因有：藥物本身情況，多重耐藥菌株的產(chǎn)生，病毒復(fù)制發(fā)生反彈現(xiàn)象。關(guān)于YMDD基序突變的基因型分析會(huì)在后續(xù)的研究中進(jìn)行討論分析。

參考文獻(xiàn)：

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[2]信芝，宋家武. 乙肝病毒P基因區(qū)YMDD變異的臨床檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展[J].世界感染雜志，2007，7（6）：456-459.

[3]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)、感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南[J]. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志（電子版），2012，40（4）：66-78.

[4]李佳，曹新鮮.拉米夫定治療前后乙型肝炎病毒YMDD變異的相關(guān)因素分析[J].中國(guó)肝臟病雜志，2009，17（9）：641-644.

[5]Chinese Society of Hepatology and Chinese Society of infectious Disease.Chinese Medical Association[J].Chin J Hepatol，2011， 19：13-24.

[6]盛秀勝，徐玲娟.拉米夫定抗乙型肝炎治療中發(fā)生YMDD變異的因素研究[J].國(guó)際流行病傳染病學(xué)雜志，2009，36（5）：305-307.

編輯/哈濤