摘要：目的 觀察花椒提取物對(duì)蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位閾刺激、不應(yīng)期及傳導(dǎo)速度的影響，研究其對(duì)坐骨神經(jīng)電生理特性的作用。方法 將制備的蟾蜍坐骨神經(jīng)干分為閾刺激、不應(yīng)期、傳導(dǎo)速度3 組，引導(dǎo)神經(jīng)干動(dòng)作電位，分別測(cè)其正常時(shí)與加藥后的閾刺激、不應(yīng)期、傳導(dǎo)速度的變化。結(jié)果 花椒提取物能夠提高蟾蜍離體坐骨神經(jīng)閾刺激，延長(zhǎng)不應(yīng)期，與對(duì)照組比有顯著性差異（P<0.05，P<0.01）；可減慢傳導(dǎo)速度，但無(wú)顯著性差異。結(jié)論 花椒提取物對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位的抑制作用與提高閾刺激、延長(zhǎng)不應(yīng)期相關(guān)。

關(guān)鍵詞：花椒提取物；蟾蜍；動(dòng)作電位；坐骨神經(jīng)干

花椒提取物有鎮(zhèn)痛作用[1]，是溫陽(yáng)散寒除濕止痛之劑，和其他藥物配伍應(yīng)用，振奮陽(yáng)氣、驅(qū)散風(fēng)寒濕邪之功效更著。文獻(xiàn)報(bào)道花椒或花椒提取物為主方治療牙痛等疼痛性疾病有較好的療效[2]，有關(guān)報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)離體實(shí)驗(yàn)方法，觀察花椒提取物對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)復(fù)合動(dòng)作電位閾刺激、傳導(dǎo)速度、不應(yīng)期等的影響。驗(yàn)證關(guān)初步的探討花椒提取物的鎮(zhèn)痛作用及可能機(jī)制。

1 材料與制備

1.1材料 健康蟾蜍30只，雌雄不拘，由湖州師范學(xué)院醫(yī)學(xué)院提供。花椒（川椒）購(gòu)于藥材公司。電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）； 神經(jīng)屏蔽盒（四川成都泰盟科技有限公司）； BL- 420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（成都泰盟）；任氏液，乙醇所用均為化學(xué)純?cè)噭?/p>

1.2 花椒提取物的制備 將花椒果皮粉碎后稱取1000g加入pH 3的70%乙醇，料液比1：10，在60℃提取4h，減壓回收乙醇，水提液用氨水調(diào)pH至9～10，置于4℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用NKA-9大孔樹脂先分別以水和50%乙醇洗脫除去水溶性雜質(zhì)，再用70%乙醇反復(fù)洗脫至無(wú)生物堿特征反應(yīng)，洗脫液減壓濃縮得大孔樹脂洗脫物23.6 g。

用分析天平準(zhǔn)確稱取純化后的花椒生物堿，無(wú)菌生理鹽水配制成高、中、低3種濃度梯度供試液，每毫升分別相當(dāng)于生藥472、236、118 mg。

2 方法

2.1動(dòng)物分組與坐骨神經(jīng)干標(biāo)本制備 取蟾蜍30只，制備蟾蜍的坐骨神經(jīng)干標(biāo)本，游離后均置于任氏液中穩(wěn)定30min，待其生理指標(biāo)穩(wěn)定后隨機(jī)分成不應(yīng)期、閾刺激、傳導(dǎo)速度3 組，每組20條，測(cè)閾刺激，含花椒提取物置神經(jīng)干電極刺激端；測(cè)不應(yīng)期與速度，含花椒提取物置神經(jīng)干兩對(duì)引導(dǎo)電極之間，加藥前后對(duì)比。

2.2 神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo) 在室溫20℃～22℃條件下，分別將制備好的坐骨神經(jīng)干標(biāo)本置于神經(jīng)屏蔽盒的電極上，外周端接刺激電極，中樞端接引導(dǎo)電極，測(cè)量每一復(fù)合動(dòng)作電位的閾刺激、不應(yīng)期及傳導(dǎo)速度。

2.3觀察指標(biāo) 動(dòng)作電位引導(dǎo)，以最小正電壓至刺激前基線為準(zhǔn)，引導(dǎo)出動(dòng)作電位的刺激強(qiáng)度。動(dòng)作電位不應(yīng)期的測(cè)定，按動(dòng)作電位記錄方法引導(dǎo)動(dòng)作電位，記錄不應(yīng)期。傳導(dǎo)速度的測(cè)定，按動(dòng)作電位記錄方法引導(dǎo)動(dòng)作電位，記錄兩對(duì)引導(dǎo)電極動(dòng)作電位起始部時(shí)間差（t，s）和兩對(duì)引導(dǎo)電極之間的距離（d，m），計(jì)算動(dòng)作電位。

2.4數(shù)據(jù)處理 記錄給藥前（對(duì)照組）與給藥后坐骨神經(jīng)復(fù)合動(dòng)作電位的閾刺激、不應(yīng)期與傳導(dǎo)速度，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±s 描述，采用配對(duì)t 檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1花椒提取物對(duì)坐骨神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位不應(yīng)期的影響 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，藥物作用坐骨神經(jīng)干，不應(yīng)期延長(zhǎng)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

3.2 花椒提取物對(duì)坐骨神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位閾刺激的影響 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，藥物作用坐骨神經(jīng)干，閾刺激增大，興奮性降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3.3花椒提取物對(duì)坐骨神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的影響 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，藥物作用坐骨神經(jīng)干，傳導(dǎo)速度變慢，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見表3）。

4 討論

由文獻(xiàn)可得花椒對(duì)于疼痛有局麻作用而且有止痛的效果?；ń肥菧刂猩⒑凉裰雇粗畡?，通過(guò)多種機(jī)制達(dá)到鎮(zhèn)痛效果。花椒能明顯緩解牙痛產(chǎn)生局麻現(xiàn)象[3]。花椒浸液在一定濃度下確實(shí)能降低神經(jīng)的興奮性和可逆性地阻斷神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)，這是產(chǎn)生局麻作用的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)還表明其發(fā)生作用的速度和持續(xù)時(shí)間隨著藥物濃度的增高而相應(yīng)快和延長(zhǎng)[4]?；ń坊ń分兴?，8-桉葉素可能是醚提物鎮(zhèn)痛抗炎的活性成分之一[1]。中醫(yī)療法以散寒祛風(fēng)除濕，活血通經(jīng)，解痙止痛[3]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明花椒提取物能提高蟾蜍離體坐骨神經(jīng)閾刺激，降低興奮性，延長(zhǎng)不應(yīng)期，對(duì)牙痛傳導(dǎo)具有明顯阻滯作用。

花椒提取物和酚妥拉明合用只能減弱其鎮(zhèn)痛作用，普奈洛爾對(duì)花椒的這種作用根本就無(wú)影響[5]。

近年來(lái)，中藥受到廣泛重視，但中藥在鎮(zhèn)痛作用上還存在不足且中藥療效時(shí)間長(zhǎng)，有待改進(jìn)。需利用現(xiàn)代藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，不斷提高中醫(yī)治療疼痛的療效，對(duì)傳統(tǒng)鎮(zhèn)痛中藥藥效及其機(jī)制進(jìn)行研究，是推動(dòng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化的有效手段。

參考文獻(xiàn)：

[1]張明發(fā).花椒的溫理作用[J].西北藥理雜志，1995，10（2）：89.

[2]黃志華.石椒辛荷漱劑治牙痛[J].四川中醫(yī)雜志，1986，（4）：57.

[3]孫洪范，吳明燊，王代容，等.花椒阻滯經(jīng)神沖動(dòng)作用的研究[J].貴州醫(yī)藥雜志，1990；14（5）：272.

[4]孫洪范，吳明燊，王代容，劉果.花椒對(duì)蟾蜍離體神經(jīng)的作用[J].貴州醫(yī)藥雜志，1984；8（4）：14.

[5]袁娟麗，王四旺.花椒的化學(xué)成分及其藥效學(xué)研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2010，10（3）：553.

編輯/蘇小梅