摘要:目的 觀察冠心病患者循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)目的變化。方法 選取我院心內(nèi)科34例穩(wěn)定型心絞痛患者及34例急性冠脈綜合癥患者為觀察組,31例健康體檢人群為對照組。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血EPC數(shù)量。結(jié)果 EPC數(shù)目穩(wěn)定心絞痛組較正常組明顯降低(0.082±0.027 VS 0.168±0.065,P<0.001),ACS組較穩(wěn)定心絞痛組明顯升高(0.194±0.060 VS 0.082±0.027,P<0.001),冠心病和EPC數(shù)目成負(fù)相關(guān)(r=-0.215,P<0.05)。結(jié)論 在冠心病不同時期,循環(huán)EPCs數(shù)目也發(fā)生改變,穩(wěn)定型冠心病患者其數(shù)目降低,而ACS患者則增加。明確冠心病類型與EPCs的數(shù)目的關(guān)系,對指導(dǎo)EPCs在冠心病中的運用有重要的意義。
關(guān)鍵詞:冠心病;循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞
1 對象
選取2012年7月~12月我院心內(nèi)科收治的冠心病患者68例,均超過2年的病史,其中穩(wěn)定心絞痛患者34例,急性冠脈綜合征患者34例,所有患者均符合中華醫(yī)學(xué)會心血管疾病學(xué)分會制定的冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)[1],且均行冠狀動脈造影證實。對照組選取31例于我院健康體檢人群,均排除冠心病病史。所有參與者并排除炎癥、腫瘤、自身免疫性疾病、近期各臟器出血或缺血性疾病、慢性腎功能不全及貧血等病史。
2 材料和方法
2.1材料 PE標(biāo)記的人類血管內(nèi)皮生長因子-2(VEGF-2)單克隆抗體購自美國BD公司,F(xiàn)ITC標(biāo)記的人類CD34單克隆抗體購自美國eBioscience公司,人淋巴細(xì)胞分離液和紅細(xì)胞裂解液購自solarbio公司
2.2方法
2.2.1臨床資料 所以受試者入院后采集病例資料,如年齡、性別、測血壓、心率(HR)、詢問現(xiàn)病史及既往病史等。冠心病患者急診采肘靜脈血,健康體檢人群采空腹8h肘靜脈血。用全自動生化儀檢測空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TC)、總膽固醇(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)及肌鈣蛋白I(TnI)等,并行十二導(dǎo)聯(lián)心電圖檢測。
2.2.2檢測EPC數(shù)目 采集冠心病患者胸痛發(fā)作24h內(nèi)及健康對照人群空腹8h肘靜脈血5ml,采用密度梯度離心法獲取單個核細(xì)胞,用移液管吸出目的層細(xì)胞洗滌兩次后,均分到兩個流式管內(nèi),分別標(biāo)記\"+\"(測定管)和\"-\"(對照管)。在標(biāo)記\"+\"管細(xì)胞懸液中加入2種單抗:FITC-CD34(10ul),PE-VEGFR-2(5ul),避光、冰孵30min。洗滌一次后加入紅細(xì)胞裂解液1ml,5min后離心去上清,洗滌重懸后上流式細(xì)胞儀檢測。
2.3統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0軟件,計量資料以x±s表示,多組間比較采用單因素ANOVA比較,計數(shù)資料比較采用χ2檢驗,冠心病與EPC數(shù)目的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1一般資料 選取本院心內(nèi)科冠心病患者68例,健康體檢人群31例,由表1可知,冠心病患者年齡和TnI明顯高于對照組,而TC、LDL和HR明顯低于對照組,該結(jié)果可能與冠心病患者服用降脂藥物和β受體阻滯劑有關(guān)。三組間性別比例、TC、HDL和舒張壓(DBP)無顯著差異。
2.2各組間EPC數(shù)目的比較 EPC數(shù)目用CD34+/VEGFR-2+雙陽性細(xì)胞占單核細(xì)胞百分比來表示。由圖1可知,EPC數(shù)目穩(wěn)定心絞痛組較正常組明顯降低(0.082±0.027 VS 0.168±0.065,P<0.001),ACS組較穩(wěn)定心絞痛組明顯升高(0.194±0.060 VS 0.082±0.027,P<0.001)。
2.3冠心病與EPC的相關(guān)關(guān)系 將冠心病與EPC數(shù)目進(jìn)行Spearman相關(guān)分析,結(jié)果顯示,冠心病類型和EPC數(shù)目成負(fù)相關(guān)(r=-0.215,P<0.05)。
3 討論
EPC參與冠心病冠狀動脈損傷的修復(fù)及血管新生過程[2],循環(huán)EPC數(shù)目在冠心病的不同時期也發(fā)生了不同的變化[3]。本研究結(jié)果顯示,循環(huán)EPC數(shù)目穩(wěn)定型心絞痛患者較正常對照組明顯降低,而ACS患者較穩(wěn)定型心絞痛患者則明顯增高,相關(guān)分析結(jié)果顯示冠心病類型和EPC數(shù)目成負(fù)相關(guān)。
目前已有相關(guān)研究探討冠心病與循環(huán)EPC的相關(guān)性。研究普遍認(rèn)為,循環(huán)EPCs可預(yù)測心血管疾病的臨床轉(zhuǎn)歸和預(yù)后,其數(shù)量的減少是動脈粥樣硬化性疾病進(jìn)展的獨立危險因子[4]。本研究也證實,穩(wěn)定型冠心病患者,循環(huán)EPCs數(shù)目較正常組降低。其機制可能與穩(wěn)定型CAD患者冠脈內(nèi)皮長期持續(xù)的受損,不斷消耗循環(huán)EPCs以修復(fù)受損內(nèi)皮有關(guān)。本研究進(jìn)一步探討了ACS組循環(huán)EPCs與穩(wěn)定型心絞痛組的差異,發(fā)現(xiàn)ACS患者EPCs數(shù)目明顯增加,該結(jié)果與George和shintani等人的研究一致,其機制可能與ACS患者冠脈斑塊破裂,堵塞官腔引起內(nèi)皮損傷,心肌缺血缺氧,刺激骨髓EPCs動員到外周血,參與內(nèi)皮的損傷修復(fù)及血管新生。
綜上所述,在冠心病不同時期,循環(huán)EPCs數(shù)目也發(fā)生改變,穩(wěn)定型冠心病患者其數(shù)目降低,而ACS患者其數(shù)目增加。明確冠心病類型與EPCs的數(shù)目的關(guān)系,對EPCs在冠心病中的運用有重要的指導(dǎo)意義。
參考文獻(xiàn):
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