摘要：目的 研究松果菊提取物對膠原性關節(jié)炎（CIA）大鼠的作用及其可能機制。方法 用雞膠原Ⅱ型和弗氏完全佐劑建立CIA大鼠模型。觀察CIA大鼠足腫脹度的變化并檢測大鼠血清白細胞介素-1β（IL-1β）和前列腺素E-2（PGE-2）的水平。結果 松果菊提取物可以顯著抑制CIA大鼠的足腫脹度，并且能顯著抑制CIA大鼠血清IL-1β和PGE-2水平。結論 松果菊提取物對CIA大鼠有明顯的治療作用，其機制可能是與降低血清IL-1β和PGE-2的表達以及促使炎性細胞因子網絡趨向平衡有關。

關鍵詞：膠原誘導性關節(jié)炎；松果菊提取物；炎癥因子

松果菊（Echinacea purpurea L.），為菊科松果菊屬多年生草本植物。在臨床上主要用作免疫促進劑和調節(jié)劑[1-2]。松果菊的主要活性成分是多酚、咖啡酸衍生物和多糖[3]。目前關于松果菊提取物對大鼠類風濕性關節(jié)炎的作用研究仍未見報道。為此，本實驗建立膠原性關節(jié)炎大鼠模型，觀察松果菊提取物對膠原性關節(jié)炎大鼠的作用并探索其可能機制，為臨床應用提供理論基礎。

1資料與方法

1.1一般資料 原料松果菊花，自然干燥，粉碎。藥品與試劑地塞米松磷酸鈉注射液；雞膠原II型、弗氏完全佐劑；IL-1β、PGE-2酶聯(lián)免疫試劑盒。實驗動物Sprague-Dawley（SD）大鼠，雌雄各半，體重（180±20） g，本單位實驗動物中心提供。樣品制備稱取松果菊原料，用質量15倍的70%乙醇水溶液在90℃下回流提取3次，1 h/次，減壓蒸餾，真空干燥得淡黃色粉末。

1.2方法

1.2.1 CIA大鼠模型的制備[4] 將20 mg雞膠原Ⅱ型溶于10 mL預先配制好的0.1 mol/L醋酸溶液中，濃度為2 mg/Kg，4℃過夜使之充分溶解。次日，將之與10 mL弗氏完全佐劑在冰浴下混合，充分乳化，制成穩(wěn)定的乳化劑20 mL，置4℃冰箱保存?zhèn)溆?。除正常組外，在其他組大鼠的左后肢足跖皮內注射0.1 mL膠原乳劑致炎，第7 d在大鼠尾、背多點皮內注射0.1 mL膠原乳劑，作為激發(fā)注射。正常組大鼠注射等量生理鹽水作為致炎物質。

1.2.2動物分組與給藥方案 SD大鼠60只，雌雄各50%，每組10只，隨機分為6組：正常組、模型組、地塞米松（DXM，2 mg/Kg）組和松果菊提取物（EE，20、40、80 mg/Kg）組。于造模后第7～30 d，各用藥組灌胃給藥，1次/d。正常組及模型組，用等容積生理鹽水灌胃。

1.2.3體質量及足腫脹度的測定 于致炎前（d0）和致炎后第7、12、18、24、30 d（d7、d12、d18、d24、d30），用足趾容積測量儀測量各鼠左足腫脹度，腫脹度（mL）=致炎后左足容積（d7、d12、d18、d24、d30）-致炎前左足容積（d0）。

1.2.4血清IL-1β和PGE-2的檢測 于末次給藥后24 h股動脈放血處死大鼠，用10 mL注射器心臟取血，取血后4℃靜置1 h，4000 r/min離心10 min，取上清液置-80℃冰箱保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA，按試劑盒說明書進行操作）檢測血清中IL-1β和PGE-2的含量。

2結果

2.1松果菊提取物對CIA大鼠足腫脹的影響 模型組大鼠足腫脹度較正常組明顯增加（P<0.01）；與模型組比較，DXM組和EE組均能顯著抑制CIA大鼠的足腫脹（P<0.01或P<0.05），且后者具有明顯的量效關系，見表1。

2.2松果菊提取物對CIA大鼠血清IL-1β和PGE-2的影響 模型組血清中IL-1β和PGE-2的表達量均明顯高于正常組（P<0.01）；DXM組和EE組均能顯著抑制CIA大鼠血清中的IL-1β和PGE-2水平（P<0.01或P<0.05），且后者具有明顯的量效關系，見表2。

3討論

類風濕性關節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種炎癥性自身免疫疾病，膠原蛋白和弗氏完全佐劑誘導的CIA大鼠的病理過程和實驗室指標與RA相似，是篩選和研究RA治療藥物的理想動物模型之一[4]。

實驗結果表明，松果菊提取物對CIA大鼠的足腫脹有較好的抑制作用，表明它對CIA大鼠有較好的治療作用。

RA的主要病理學變化與炎癥性細胞因子的表達異常有關。IL-1和PGE-2能促進膠原酶和其他中性蛋白酶的產生，導致軟骨基質崩解、軟骨吸收和軟骨破壞。

本研究結果表明松果菊提取物能顯著下調CIA大鼠血清IL-1β和PGE-2水平，揭示它對CIA的治療作用可能與其降低IL-1β和PGE-2的表達以及恢復細胞因子的網絡平衡有關。

參考文獻：

[]劉一兵.紫花松果菊屬植物制劑的化學、免疫作用與臨床[M].國外醫(yī)藥，植物藥分冊，2001，16（2）.

[2]肖培根.國際流行的免疫調節(jié)劑-紫花松果菊及其制劑[J].中草藥，1996，27（1）：46.

[3]王康才，唐曉清，朱光明，等.紫花松果菊屬植物的化學成分、藥理及開發(fā)利用研究進展[J].中藥材，2000，23（12）：780-782.

[4]李宜川，葉文中，劉國玲，等.白芍總苷對大鼠膠原性關節(jié)炎體質量及足腫脹度和足爪組織基質金屬蛋白酶表達的影響[J].中國臨床藥理學雜志，2010，9：680-683.

編輯/肖慧