摘要:聚合酶鏈反應(yīng)又叫DNA擴(kuò)增技術(shù)。進(jìn)入到21世紀(jì)以來,在標(biāo)本中,分析研究與鑒定檢測特定的體外基因擴(kuò)增技術(shù)重要方法就是PCR技術(shù)。近些年以來,這項技術(shù)在許多研究領(lǐng)域以及臨床的應(yīng)用中都發(fā)揮著重要作用;同時PCR技術(shù)在遺傳病診斷與傳染病病原體鑒定以及癌基因治療等眾多方面均有十分重大的貢獻(xiàn)。本文主要是對PCR技術(shù)在臨床檢驗中的應(yīng)用進(jìn)行分析和探討。
關(guān)鍵詞:PCR技術(shù);臨床檢驗;應(yīng)用
1 PCR技術(shù)的概述
PCR技術(shù)的基本原理是在擴(kuò)增區(qū)域的兩端,用兩條互補(bǔ)的雙鏈DNA模板引物,利用DNA聚合酶,引物會引發(fā)互補(bǔ)的DNA鏈。在這個過程中,一條引物所引發(fā)的DNA鏈可以合成另外一條新的DNA鏈, 循環(huán)反復(fù)多次以后,導(dǎo)致這兩條引物之間的DNA大量復(fù)制[1]。PCR技術(shù)的循環(huán)反應(yīng)主要是由變性和退火以及延伸這三個基本步驟組成的循環(huán)。
PCR技術(shù)在基層疾病檢測中的應(yīng)用,是當(dāng)今社會較為常見的。對于肝炎病毒、腸道病毒、呼吸道系統(tǒng)感染、性病病原體等檢測,PCR技術(shù)的敏感度精確度要比傳統(tǒng)方法高。
2 PCR 技術(shù)在臨床檢驗中的應(yīng)用
2.1PCR技術(shù)在傳染性疾病檢測中的應(yīng)用 目前我國典型的消化系統(tǒng)感染性疾病包括肝炎、胃炎等。引發(fā)肝炎的病原體主要為乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等。使用PCR法對血清中的乙肝病毒進(jìn)行檢測的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在早期診斷,并且在酶標(biāo)試劑無法檢測的情況下,PCR可以檢出,大大縮短窗口前,使得患者能夠得到早期診斷和治療[2]。
2.2 PCR技術(shù)在腫瘤方面的應(yīng)用 現(xiàn)階段,腫瘤的發(fā)病分子機(jī)制還不是完全的清楚。PCR技術(shù)在腫瘤相關(guān)基因和腫瘤病毒病因以及腫瘤相關(guān)抑癌基因的研究方面,都已經(jīng)得到了非常好的成果。根據(jù)相關(guān)的資料表明,鼻咽癌與Burkitt淋巴瘤以及EB病毒是有關(guān)系的;泌尿道腫瘤與食管腫瘤等以及人乳頭瘤病毒是有關(guān)系的[3];原發(fā)性肝癌和乙型肝炎病毒是有關(guān)聯(lián)的。通過癌基因或者基因變化的檢測,人體癌的演變時,可以以腫瘤作為標(biāo)志物直接應(yīng)用在臨床檢測?,F(xiàn)階段,已經(jīng)建立起以PCR技術(shù)為基礎(chǔ),新的分子生物學(xué)技術(shù),用來鑒定人體基因突變,也可以用來檢測比如糞、痰等各種體液中的突變基因。
2.3 PCR技術(shù)在呼吸系統(tǒng)感染性疾病上的應(yīng)用 呼吸道系統(tǒng)疾病為比較常見的一種疾病,隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的不斷進(jìn)步與發(fā)展,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了呼吸道系統(tǒng)疾病是誘發(fā)腸病毒的重要因素之一。PCR能夠?qū)粑啦≡w進(jìn)行系統(tǒng)、快速的檢測,并予以鑒定,具有較高的特異性以及敏感性。運用PCR反應(yīng),能夠同時檢測出很多種病原體,在臨床呼吸道疾病中可以達(dá)到快速進(jìn)行檢測的要求。對呼吸道疾病診斷與治療起到非常重要的作用。目前檢測的金標(biāo)準(zhǔn)仍然是結(jié)核菌培養(yǎng)法。但是培養(yǎng)法消耗的時間較長,并且會受到藥物影響,所以在實際的使用當(dāng)中有一定的限制,而PCR技術(shù)在檢測結(jié)核菌方面具有簡便、敏感、特異等優(yōu)勢。
2.4PCR技術(shù)在遺傳病檢測中的應(yīng)用 所謂遺傳病就是因為在父母的生殖細(xì)胞中,遺傳的物質(zhì)發(fā)生了改變而引起的,基本上是因遺傳的因素所決定。通常表現(xiàn)先天性或者是后天的發(fā)病,比如:多趾、先天聾啞、先天愚型血友病等等。遺傳病完全因為遺傳的因素決定了它的發(fā)病情況,并在新嬰兒出生后一定的時間內(nèi)發(fā)病,但是有些情況會是在孩子幾年甚至幾十年以后,才會發(fā)生明顯的癥狀。因為遺傳病的發(fā)病具有隱藏性,其可預(yù)見性比較差[4],所以想要尋找出一種能夠最早檢測手段是非常重要的。在早產(chǎn)這個情況的診斷前能夠最大限度的減少遺傳病胎兒的發(fā)生率。而PCR技術(shù)具有特異性強(qiáng)、敏感性高、操作簡便等優(yōu)點,再加上可以和生物學(xué)上多種分子技術(shù)加以配合來使用,已經(jīng)是遺傳病基因的診斷中非常常用并且最有效的方法了。
2.5PCR技術(shù)在性病檢測中的應(yīng)用 經(jīng)典的性傳播疾病包括梅毒、淋病等。傳統(tǒng)的檢測方法存在費用高、費時長、準(zhǔn)確性不高等問題,使用PCR法能夠快速、簡便、準(zhǔn)確的檢測。
3結(jié)論
綜上所述,PCR技術(shù)在臨床檢驗中取得了突破性的進(jìn)展,其在各個領(lǐng)域的應(yīng)用價值會隨著其技術(shù)的更新而不斷提高。這不僅標(biāo)志著醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)設(shè)備進(jìn)入一個嶄新的高度,也是人類對疾病預(yù)防與控制上的能力提高具有著重大意義。雖然PCR技術(shù)已經(jīng)在臨床檢驗中運用了很長時間,但是目前還是被看作輔助臨床的診斷方法。而伴隨生物學(xué)中分子理論的飛速發(fā)展, PCR技術(shù)和新的材料以及自動化的科學(xué)越來越緊密[5],并且融合在新工藝的設(shè)計中,漸漸凸顯了以精細(xì)化和自動化為代表的發(fā)展趨勢。PCR技術(shù)及其相關(guān)的產(chǎn)業(yè)將會在臨床的檢驗中迎來嶄新的、更好的發(fā)展契機(jī)。
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