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        肉眼血尿中紅細(xì)胞對白細(xì)胞酯酶檢測結(jié)果的影響

        2014-04-29 00:00:00劉婷等
        醫(yī)學(xué)信息 2014年38期

        摘要:目的 探討肉眼血尿標(biāo)本中紅細(xì)胞對白細(xì)胞酯酶檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的影響及消除方法。方法 收集肉眼血尿標(biāo)本,用尿干化學(xué)儀分別對離心前的尿標(biāo)本和離心后的上清液進(jìn)行尿白細(xì)胞酯酶檢測,并進(jìn)行傳統(tǒng)的手工沉渣鏡檢。結(jié)果 肉眼血尿標(biāo)本中白細(xì)胞酯酶假陽性率為93.75%,離心后取上清液做白細(xì)胞酯酶結(jié)果與顯微鏡沉渣鏡檢結(jié)果符合率為86.1%。結(jié)論 肉眼血尿中紅細(xì)胞能造成起白細(xì)胞酯酶假陽性,離心取上清液后再做干化學(xué)能消除這種干擾作用。臨床工作中白細(xì)胞酯酶陽性的肉眼血尿標(biāo)本,必須結(jié)合顯微鏡檢查尿液白細(xì)胞,才能為臨床提供可靠的分析結(jié)果。

        關(guān)鍵詞:肉眼血尿;白細(xì)胞酯酶;紅細(xì)胞;假陽性 尿常規(guī)是臨床檢驗(yàn)三大常規(guī)檢查之一,為臨床疾病的診斷及治療提供了準(zhǔn)確的依據(jù)。其中,尿紅細(xì)胞和白細(xì)胞的檢測,更是反映泌尿系統(tǒng)疾病的良好指標(biāo)。然而,有大量文獻(xiàn)報(bào)道,尿白細(xì)胞酯酶檢測受多種因素的影響,如,維生素C或含大劑量先鋒霉素Ⅳ、慶大霉素、尿蛋白大于5g/L,均可致其結(jié)果呈假陰性[1-2]。目前筆者在臨床檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)在肉眼血尿標(biāo)本中,白細(xì)胞酯酶檢測的假陽性率極高,因此,探討紅細(xì)胞對白細(xì)胞酯酶檢測結(jié)果準(zhǔn)確性的影響及消除方法。

        1 資料與方法

        1.1一般資料 尿干化學(xué)分析儀DIUH-500,日本Olympus光學(xué)顯微鏡,萬佳低速離心機(jī),玻片,DIUH原裝試紙條。

        1.2試劑及配制 D-Hank,s液:用電子天平稱取Nacl 8g,Kcl0.4g,Na2HPO4.12H2O 0.152g,KH2PO4 0.06g,NaHCO3 0.35g,依次加入至800mldH2O中,溶解后調(diào)PH至7.2,定容至1000ml,高壓滅菌。

        1.3方法

        1.3.1標(biāo)本的收集 收集本院2013年4月~12月臨床申請做尿液分析的門診及住院患者中新鮮的肉眼血尿標(biāo)本100份,以及各項(xiàng)檢測結(jié)果均正常的尿液標(biāo)本(其中上皮細(xì)胞在0~1/FP范圍內(nèi),且近期沒有服用任何藥物)100份(所有標(biāo)本均在2h內(nèi)檢測完畢),其中女性標(biāo)本為非月經(jīng)期標(biāo)本。

        1.3.2外周血血紅細(xì)胞懸液的制備 取ED-TA抗凝血,加等量生理鹽水,混勻,2000r/min離心5min,去上清;用D-Hank,s液將紅細(xì)胞洗滌3次,前2次2000r/min,5min,末次2000r/min,10min,去上清;加適量生理鹽水,將分離出的紅細(xì)胞配成20%的紅細(xì)胞懸液。

        1.3.3用一次性塑料管收集上述人員新鮮肉眼血尿10ml,混勻,將試紙條浸入尿液2s后取出,用吸水紙取出試紙條邊上多余的尿液,置于尿干化學(xué)儀上檢測,然后將尿液置于離心機(jī),1500rpm/min,離心5min,將上清液轉(zhuǎn)移至另一干凈的塑料管,做干化學(xué)檢測,留0.2ml沉渣,用微量吸管吸取混勻沉渣0.02ml,滴在載玻片上,蓋玻片覆蓋,觀察10個(gè)高倍鏡視野(HP),然后計(jì)算平均每個(gè)高倍視野里白細(xì)胞的數(shù)量。

        1.3.4收集檢測結(jié)果正常的尿標(biāo)本,每份標(biāo)本中(10ml)加入0.2ml20%紅細(xì)胞懸液,混勻,然后進(jìn)行尿干化學(xué)檢測。所有的檢測均在2h內(nèi)完成。

        1.3.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 結(jié)果采用spss13.0軟件,結(jié)果用配對t檢驗(yàn)分析,P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

        2 結(jié)果

        2.1肉眼血尿標(biāo)本中白細(xì)胞酯酶假陽性率為93.75%(如表1),離心后取上清液做白細(xì)胞酯酶結(jié)果與顯微鏡沉渣鏡檢結(jié)果符合率為86.1%,離心前后白細(xì)胞酯酶結(jié)果做配對t檢驗(yàn),得出P<0.05,說明結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

        2.2為了驗(yàn)證上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,我們收集了100份正常尿標(biāo)本,并往每份標(biāo)本中(10ml)加入0.2ml紅細(xì)胞懸液,其中尿白細(xì)胞酯酶檢測結(jié)果為陽性的共有94例,沉渣鏡檢白細(xì)胞在正常范圍內(nèi),即白細(xì)胞酯酶假陽性率為94%,采用配對t檢驗(yàn)分析,加入紅細(xì)胞懸液前后尿液白細(xì)胞酯酶結(jié)果有顯著差異(P<0.05)。

        3 討論

        尿白細(xì)胞檢測是臨床尿液常規(guī)中重要的檢驗(yàn)項(xiàng)目,為泌尿系統(tǒng)疾病尤其是尿路感染的診斷和治療提供了重要的依據(jù)[3]。

        本論文我們選取新鮮尿液標(biāo)本就是為了排除因存放時(shí)間過久所造成的假陽性結(jié)果。我們首次提出肉眼血尿標(biāo)本中紅細(xì)胞對白細(xì)胞酯酶的檢測具有重大影響,尿標(biāo)本離心后取上清液能降低其假陽性率。為了驗(yàn)證這一結(jié)果,我們收集了上皮細(xì)胞等有形成份都是陰性的尿標(biāo)本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。然而至于紅細(xì)胞是如何導(dǎo)致尿白細(xì)胞酯酶假陽性這一問題,可能是因?yàn)榧t細(xì)胞表面含有微量的和粒細(xì)胞酯酶。

        綜上所述,臨床檢驗(yàn)工作中對于肉眼血尿白細(xì)胞酯酶陽性的標(biāo)本必須通過顯微鏡鏡檢加以確認(rèn),才能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,將標(biāo)本離心后取上清做干化學(xué)測定能減少這類標(biāo)本白細(xì)胞的假陽性率。

        參考文獻(xiàn):

        [1]Pate HP.The abnormal urinalysis Pediatr[J].Clin North Am,2006,53(3):325-337.

        [2]Cochat P,Dubourg L,Nogueira PK,et al.Urinalysis using dipsticks[J].Arch Pediatr,2002,9:876-877.

        [3]王春燕,張淼發(fā).sysmexVF100尿沉渣分析儀對尿路感染療效的監(jiān)測[J].上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2000,15(2):80.

        編輯/蘇小梅

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