摘要：目的 利用噬菌體生物擴(kuò)增法來(lái)檢測(cè)老年結(jié)核性胸膜炎患者胸腔液標(biāo)本，繼而探究此檢測(cè)方法的臨床診斷價(jià)值。方法 選取我院結(jié)核科2012年5月～2014年5月收治的60例老年結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液為研究對(duì)象，按照收治時(shí)間分為對(duì)照組與研究組各30例，對(duì)照組采用常規(guī)檢測(cè)方法；研究組采用噬菌體生物擴(kuò)增法進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比兩組患者胸腔積液標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 研究組患者通過(guò)采用噬菌體生物擴(kuò)增法來(lái)進(jìn)行胸腔積液標(biāo)本的檢測(cè)，陽(yáng)性檢出19例，檢出率63.3%，明顯高于對(duì)照組12例，40%，標(biāo)本檢測(cè)取得了比較理想的檢測(cè)效果，兩組患者檢測(cè)結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 噬菌體生物擴(kuò)增法診斷老年結(jié)核性胸膜炎取得了比較理想的診斷結(jié)果，值得在實(shí)際臨床診斷工作中推廣使用。

關(guān)鍵詞：噬菌體生物擴(kuò)增法；老年結(jié)核性胸膜炎；胸腔積液標(biāo)本；檢出率

老年結(jié)核性胸膜炎在實(shí)際臨床診斷中較為常見(jiàn)，而且隨著我國(guó)老齡化問(wèn)題日益嚴(yán)峻，其發(fā)病率呈現(xiàn)明顯上升趨勢(shì)。老年結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液中結(jié)核菌檢測(cè)結(jié)果對(duì)診斷患者以及后續(xù)治療方案制定具有重要的指導(dǎo)作用。然而常規(guī)檢測(cè)方法在檢測(cè)老年結(jié)核性胸膜炎標(biāo)本時(shí)，由于患者胸腔積液中結(jié)核分枝桿菌陽(yáng)性檢出率較低，嚴(yán)重影響了實(shí)際檢測(cè)結(jié)果，對(duì)患者治療工作以及醫(yī)院造成了較為嚴(yán)重的影響。噬菌體生物擴(kuò)增法（Phage amplified biologically assay，PhaB）是近些年來(lái)興起的一種細(xì)菌學(xué)快速診斷技術(shù)，被廣泛應(yīng)用于結(jié)核性胸膜炎等結(jié)核病早期病原學(xué)診斷并取得了比較矚目的成果，患者陽(yáng)性結(jié)核菌檢出率明顯提高，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值[1]。我院結(jié)核科通過(guò)對(duì)2012年5月～2014年5月收治的老年結(jié)核性胸膜炎患者實(shí)施噬菌體生物擴(kuò)增法檢測(cè)，結(jié)合分枝桿菌陽(yáng)性檢出率高達(dá)63.3%，取得了比較理想的臨床診斷結(jié)果，對(duì)判定患者病癥以及制定后續(xù)治療方案具有重要的指導(dǎo)意義，有效推動(dòng)了結(jié)核科臨床診斷工作進(jìn)一步發(fā)展?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 我院結(jié)核科2012年5月～2014年5月收治了60例老年結(jié)核性胸膜炎患者，其中男性38例，女性22例，年齡42～66歲，平均年齡（54±10）歲。按照我國(guó)頒布的《肺結(jié)核診斷與治療指南》標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，所有患者均符合以下標(biāo)準(zhǔn)：①實(shí)際臨床結(jié)核中毒癥狀較為明顯，胸腔滲出液主要以淋巴細(xì)胞為主；②經(jīng)過(guò)抗結(jié)核治療工作后，胸腔積液吸收速度較快；③經(jīng)過(guò)不間斷追蹤觀察排除了其他疾病[2]。按照收治時(shí)間分為對(duì)照組與研究組各30例，兩組患者一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），具有可比性。

1.2方法 采集所有老年結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液標(biāo)本（均未進(jìn)行抗癆治療），對(duì)照組采用常規(guī)檢測(cè)方法；研究組采用噬菌體生物擴(kuò)增法，取0.1 ml噬菌體與患者胸腔待檢測(cè)菌液作用一段時(shí)間，之后加入0.1 ml殺毒劑混勻，在室溫條件下作用一段時(shí)間，加入5 ml液體培養(yǎng)基與1 ml具有指示性作用的指示細(xì)胞，混勻后和等量溶化了的瓊脂混合，待冷卻成型后置于37℃條件下培養(yǎng)16～24 h，計(jì)算噬菌斑總體數(shù)量。將兩組通過(guò)不同檢測(cè)方法所得出的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，以方便接下來(lái)的診斷工作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次研究當(dāng)中的所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

研究組患者通過(guò)采用噬菌體生物擴(kuò)增法來(lái)進(jìn)行胸腔積液標(biāo)本的檢測(cè)，陽(yáng)性檢出19例，檢出率63.3%，明顯高于對(duì)照組12例，40%，標(biāo)本檢測(cè)取得了比較理想的檢測(cè)效果，兩組患者檢測(cè)結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

3討論

結(jié)核性胸膜炎是臨床比較常見(jiàn)的結(jié)核病，由于其具有廣泛的傳染性，不僅對(duì)患者自身身體健康造成了較為嚴(yán)重的影響，同時(shí)對(duì)社會(huì)危害較大。我國(guó)是一個(gè)人口眾多的國(guó)家，一旦結(jié)核病大面積傳染蔓延開(kāi)來(lái)，將會(huì)對(duì)社會(huì)秩序穩(wěn)定以及國(guó)民經(jīng)濟(jì)建設(shè)造成較為嚴(yán)重的損害，因此結(jié)核病的防治工作顯得尤為重要。而控制該病發(fā)病率以及傳染的關(guān)鍵就在于早發(fā)現(xiàn)、早治療[3]。傳統(tǒng)檢測(cè)方法諸如涂片法、以PCR為代表的生物學(xué)診斷技術(shù)對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷曾經(jīng)起到了重要的診斷作用，然而隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步以及傳統(tǒng)檢測(cè)方法標(biāo)本污染，試劑盒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化等原因造成了大量假陽(yáng)性或假陰性檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)，導(dǎo)致傳統(tǒng)檢測(cè)方法廣受質(zhì)疑，不僅對(duì)患者自身病癥沒(méi)有起到良好的診斷治療作用，也導(dǎo)致醫(yī)患糾紛不斷發(fā)生，嚴(yán)重干擾了醫(yī)院以及結(jié)核科工作正常開(kāi)展，產(chǎn)生的影響較為深遠(yuǎn)[4]。

噬菌體生物擴(kuò)增法（Phage amplified biologically assay，PhaB）是由Welson等于1997年建立的一種快速M(fèi)TB檢測(cè)技術(shù)，其所主要應(yīng)用的分枝桿菌噬菌體為D29，主要是由于D29不僅可以感染緩慢生長(zhǎng)的MTB，還能夠感染恥垢、金色、偶然、胞內(nèi)、草分枝桿菌等少數(shù)幾種快速生長(zhǎng)的NTM[5]。通過(guò)使用噬菌體生物擴(kuò)增法能夠快速檢測(cè)結(jié)核性胸膜炎胸腔積液標(biāo)本，繼而達(dá)到診斷的目的，臨床應(yīng)用價(jià)值較高。

根據(jù)目前已有研究資料表明，應(yīng)用噬菌體生物擴(kuò)增法能夠快速診斷結(jié)核性胸膜炎，可以區(qū)別死菌與活菌，具有明顯的優(yōu)越性，其主要的檢測(cè)原理為：結(jié)合分枝桿菌噬菌體只能感染具有活性特征的分枝桿菌，如患者胸腔積液中含有活性分枝桿菌，則分枝桿菌噬菌體將會(huì)吞噬分枝桿菌，相應(yīng)檢測(cè)結(jié)果能夠清晰可見(jiàn)；如果檢測(cè)樣本中未含有活性分枝桿菌，則分枝桿菌噬菌體將會(huì)被隨后加入的殺菌劑全部殺死，因此后續(xù)加入的提示細(xì)胞由于未受到噬菌體感染，只能在培養(yǎng)皿中進(jìn)行繁殖，不存在噬菌斑[6]。因此運(yùn)用生物擴(kuò)增法能夠快速檢測(cè)標(biāo)本中的結(jié)合分枝桿菌，繼而檢出陽(yáng)性分枝桿菌以為結(jié)核性胸膜炎患者診斷結(jié)果以及后續(xù)治療方案的制定提供數(shù)據(jù)資料參考，很大程度上提高了檢出率，促進(jìn)了臨床診斷工作進(jìn)一步發(fā)展，所起到的促進(jìn)作用較為顯著[7]。通過(guò)本次研究，研究組患者通過(guò)采用噬菌體生物擴(kuò)增法來(lái)進(jìn)行胸腔積液標(biāo)本的檢測(cè)，陽(yáng)性檢出19例，檢出率63.3%，明顯高于對(duì)照組12例，40%，標(biāo)本檢測(cè)取得了比較理想的檢測(cè)效果，證明了使菌體生物擴(kuò)增法的實(shí)際診斷價(jià)值，能夠保障患者切身利益。

隨著我國(guó)老齡化問(wèn)題日益嚴(yán)峻，老年結(jié)核性胸膜炎發(fā)病幾率逐年上升，已經(jīng)成為了目前臨床診斷中較為常見(jiàn)的疾病之一。由于胸膜活檢的病理組織學(xué)以及胸腔鏡診斷陽(yáng)性檢出率較高，但是需要進(jìn)行有創(chuàng)性檢查，老年患者自身身體情況不允許采用對(duì)身體機(jī)能傷害較大的有創(chuàng)性檢測(cè)，導(dǎo)致此種檢測(cè)方法無(wú)法運(yùn)用到常規(guī)檢查之中[8]。因此，隨著噬菌體生物擴(kuò)增法研究與應(yīng)用日臻成熟，其所具有的檢測(cè)結(jié)果比較準(zhǔn)確，陽(yáng)性結(jié)合分枝桿菌檢出率高、檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)成本較低等特點(diǎn)成為了目前結(jié)核性胸膜炎患者尤其是老年患者的首選檢測(cè)方法，在很大程度上保護(hù)了老年結(jié)核性胸膜炎患者身體機(jī)能不受損傷，提高了實(shí)際的檢測(cè)效果。根據(jù)已有的研究資料分析，常規(guī)檢測(cè)方法中，涂片結(jié)合分枝桿菌檢出率目前僅為0～20%，胸腔積液檢測(cè)標(biāo)本陽(yáng)性檢出率也僅為8.5%～40%，對(duì)診斷老年結(jié)核性胸膜炎患者影響較大，無(wú)法滿足實(shí)際臨床診斷需求，已經(jīng)逐漸退出臨床診斷使用[9]。

經(jīng)過(guò)本次研究，進(jìn)一步證實(shí)了噬菌體生物擴(kuò)增法所具有的實(shí)際臨床診斷價(jià)值，老年結(jié)合性胸膜炎診斷結(jié)果準(zhǔn)確、科學(xué)，為患者后續(xù)臨床治療提供了重要的數(shù)據(jù)支持，在實(shí)際臨床應(yīng)用中取得了比較矚目的效果。不僅提高了患者自身陽(yáng)性結(jié)核分枝桿菌檢出率，也為臨床主治醫(yī)生診斷工作提供了很大程度上的便利，值得在臨床診斷中推廣使用[10]。

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編輯/肖慧