摘要：目前，醫(yī)學上對藥物進行鑒別、分析、檢查和測定時最常使用的一種基礎(chǔ)方法就是高效液相色譜法（英文縮寫HPLC）。最近幾年，科學技術(shù)不斷發(fā)展，為了與其相適應，人們逐漸將各種儀器、計算機軟件與之相結(jié)合，能夠?qū)肏PLC的范圍拓寬，使其對藥物分析的準確性增強，所以在檢測生物藥品、化學藥品和中藥等時應用的十分廣泛。文章對該方法與其聯(lián)合方法的應用進行了分析和探討。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；藥物檢測；聯(lián)用 作為眾多色譜中的一種，高效液相色譜法（英文縮寫HPLC）在測定藥物組分含量、鑒別藥物組分、分析藥物組分以及測定有關(guān)物質(zhì)等工作中被人們應用的十分廣泛[1]。高效液相色譜法和其他色譜法相比，廣泛的應用、強分離性能、高速等是其獨有的特點。

1 HPLC的優(yōu)點與局限性

優(yōu)點：HPLC具有較高的進樣壓力與供液壓力，而且在使用時耗時少，具有很高的速度，以及很高的分離效能，遠高于氣相色譜法，其靈敏度也很高，并且有廣泛的應用范圍。

局限性：容易造成環(huán)境污染以及較高的分析成本，而且在洗脫梯度時，有較為復雜的程序升溫操作，并且在其發(fā)展過程中，檢測器較為薄弱。

2在檢測藥物時HPLC的應用情況

2.1在檢測中藥方面HPLC的應用情況 在有效分析中藥組分時，HPLC能起到十分重要的作用，能夠使中藥制劑與飲品的療效和質(zhì)量得到保證。例如，相關(guān)人員層分析并測定干姜中有效組分的含量，而且針對各種有效組分對干姜進行了超臨界CO2萃取，而干姜油就是最后得到的產(chǎn)物，較好的重現(xiàn)性、簡便和靈敏等是這種測定含量方式的優(yōu)點，所得出的實驗結(jié)果能夠有效控制干姜和相關(guān)制劑的質(zhì)量，其意義十分重要。與此同時，在分析和測定中藥的有效成分及其含量時，HPLC的作用也是十分顯著的。例如，相關(guān)人員在對比和檢測石斛質(zhì)量的過程中，同時對石斛酚與石斛素在石斛中的含量進行了檢測，通過檢測發(fā)現(xiàn)，對中藥有效組分進行分析和檢測時，HPLC的反應十分靈敏，能夠作為一個檢測、控制石斛質(zhì)量的主要方法。

2.2在檢測化學藥物方面的應用情況 檢測雜質(zhì)是HPLC在檢測化學藥物過程中的主要用途。副產(chǎn)物經(jīng)常會產(chǎn)生于合成制作化學藥物的過程中，嚴重時可能產(chǎn)生的產(chǎn)物中某一種或幾種是有毒有害的，所以需要嚴格控制該過程中產(chǎn)生雜質(zhì)的含量。據(jù)相關(guān)的資料顯示，在測定主要化學藥物成分的含量也能由HPLC來實現(xiàn)，例如將燒燙靈軟膏中的主要成分（磺胺醋酰鈉和磺胺）采用HPLC進行測定時，檢測過程能夠在3 min內(nèi)完成。

3檢測藥物的過程中HPLC 聯(lián)用技術(shù)的應用

3.1檢測中藥的過程中HPLC 聯(lián)用技術(shù)的應用 有很多種HPLC 聯(lián)用方式包含在HPLC 聯(lián)用技術(shù)中，而四大譜（核磁共振NMR、質(zhì)譜MS、紅外光譜IR和紫外光譜UV）和HPLC技術(shù)的聯(lián)用是其中最為主要的一種。在分析定性組分與未知欲定性組分時該技術(shù)提供了很大的幫助。對重要代謝產(chǎn)物進行分析的方法中較為常用的就是HPLC-MS，其特點是不僅有較強的選擇性，還有很高的靈敏度，能夠?qū)我坏馁|(zhì)譜圖從復雜的混合物中獲取出來，使內(nèi)源性化合物與代謝產(chǎn)物被鑒定、分離的幾率得到提高[2]。比如，將馬錢子堿、士的寧和這些物質(zhì)的主要代謝產(chǎn)物采用HPLC-MS進行鑒定與比較時，發(fā)現(xiàn)去甲基化是主要的馬錢子堿代謝途徑，而葡糖苷酸結(jié)合物是主要的士的寧代謝產(chǎn)物。

一般在檢測化合物內(nèi)部結(jié)構(gòu)過程中，由于HPLC-NMR方式存在的缺陷，化合物組分濃度會在一定程度上影響其靈敏度，所以該方式在藥物中檢測的主要化合物對象需要有較小的相對分子質(zhì)量。中藥粗體物中經(jīng)常存在一些微量組分較難被分離和鑒定，但是對這一類微量組分進行檢測時HPLC-NMR卻具備高效而快速的特點。比如，相關(guān)人員在鉤枝藤科鉤枝樹蠟中鑒定3種新發(fā)現(xiàn)的化合物時，一種二聚體是首先被發(fā)現(xiàn)的，它屬于萘基異喹啉生物堿，接著對這種化合物的構(gòu)型進行了確定。但其中還存在著較難分離的兩種成分，檢測過后發(fā)現(xiàn)是甲基醌類二萜，而且將其發(fā)生互變異構(gòu)的機制在溶液中進行了研究。

3.2生化藥物的檢測過程中HPLC 聯(lián)用技術(shù)的應用 在眾多的分離提純方法中，HPLC是較為主要的一種，該技術(shù)尤其被廣泛應用于蛋白質(zhì)與多肽的純化分離方面[3]。最近幾年，醫(yī)藥界逐漸發(fā)展了HPLC 聯(lián)用技術(shù)。比如，在分析多肽與氨基酸的一次研究中，以HPLC-NMR 技術(shù)與毛細管為主要手段，研究了一些生物樣品，其中都含有黃質(zhì)素、黃體素等成分，并進行了一些敏感度異變測試，包括氧或光等方面，鑒定了包含在這些物質(zhì)中的異構(gòu)體，進而得出了一些資料，可以在預防和治療相關(guān)疾病時作為參考。

4結(jié)論

如今，在各類藥物的檢測中，HPLC被十分廣泛的應用，該方法無論是研發(fā)藥物還是控制其質(zhì)量都能發(fā)揮很大的作用。但是隨著日益發(fā)展的現(xiàn)代醫(yī)藥科技水平，一些技術(shù)需求也越來越高，單一色譜技術(shù)并不能適應這些變化，也不能滿足新的需求，對技術(shù)發(fā)展的方向進行分析時也可以發(fā)現(xiàn)聯(lián)合使用多種技術(shù)是今后的必然趨勢。它不僅能夠使藥物檢測法的試驗結(jié)果更加準確，而且能夠增強其選擇性、提高其靈敏性，對藥物有效組分進行分析時也能更加高效。

參考文獻：

[1]董煜，趙遠征，張怡那.高效液相色譜法測定注射用賴氨匹林中的阿斯匹林及游離水楊酸[J].色譜，2012，20（3）：277-278.

[2]張培敏，張嘉捷，王斌，等.離子色譜分離檢測撲熱息痛及其水解產(chǎn)物對氨基酚[J].第十一屆全國離子色譜學術(shù)報告會論文集.2012，11（28）：273-276.

[3]郭繼芬，陳笑艷，鐘大放.液相色譜一電噴霧離子阱質(zhì)譜法檢測體液中士的寧、馬錢子堿及其主要代謝物[J].藥物分析雜志，2013，21（3）：167-170.編輯/肖慧