摘要：目的 AVE-763A全自動尿液有形成分分析儀對尿液中的有形成分計數(shù)分析的準確性和精密度進行質(zhì)量控制觀察。方法 選擇在日常工作中容易獲得的且容易量化控制的紅細胞和白細胞制備質(zhì)控物作為日常儀器的室內(nèi)質(zhì)控品。結(jié)果 AVE-763校正后對定值質(zhì)控物分析結(jié)果與定值接近。結(jié)論 建立尿液有形成分的室內(nèi)質(zhì)量控制可以提高檢出的陽性率、減少誤差。

關(guān)鍵詞：AVE-763A；尿液；有形成分；質(zhì)量控制

由于尿液中的管型、脫落細胞、結(jié)晶物等有形成分很難獲得、不易儲存[1]進行有效的質(zhì)量控制，所以我們選擇在日常工作中容易獲得且容易量化控制的紅細胞和白細胞制備質(zhì)控物，經(jīng)過連續(xù)的校正記錄，取得了比較滿意的效果。實踐中只要紅細胞、白細胞在尿沉渣鏡檢影像分析中能夠清楚的辨析，其它的結(jié)晶、管型等病理成分也一樣能夠清楚的得到辨析。因此，我認為選用紅細胞、白細胞制備尿液有性成分的質(zhì)控物是可行的

1資料與方法

1.1儀器 AVE-763A全自動尿液有形成分分析儀由沙愛威科技實業(yè)有限公司生產(chǎn)，是近年來在臨床上廣泛使用的一種尿液有形成分分析儀。由高年資的專業(yè)人員按照標準操作規(guī)程[2]調(diào)整到最佳使用條件。

1.2室內(nèi)質(zhì)控物制備 經(jīng)SysmexKX-21N（儀器已經(jīng)嚴格校正，使用市售maker血液質(zhì)控物）計數(shù)的全血質(zhì)控物按叢玉隆、馬俊龍《當代尿液分析技術(shù)與臨床》的技術(shù)要求進行紅細胞、白細胞計數(shù)的室內(nèi)質(zhì)量控品的制備[3]。

1.3細胞懸液的配制與細胞計數(shù)定值 取上述血液質(zhì)控物2ml加入100ml血細胞計數(shù)稀釋液，以sysmexKX-21N血細胞分析儀準確計數(shù)紅細胞、白細胞10次，取平均值（紅細胞真實值=紅細胞數(shù)-白細胞數(shù)），后再準確稀釋，是細胞數(shù)在1000～1700/ul范圍，分裝密封試管內(nèi)每管5ml，密封存放于4～8℃冰箱中。質(zhì)控品按照1次/2d的頻率在AVE-763A上準確計數(shù)紅細胞、白細胞數(shù)值。

1.4儀器的校正 根據(jù)AVE-763A對定值質(zhì)量控制品的分析結(jié)果調(diào)整儀器的換算系數(shù)，使計數(shù)結(jié)果與定值質(zhì)控品的數(shù)值保持在允許的誤差范圍。

1.5 AVE-763A儀器準確度、精確度的驗證 用定值質(zhì)控品對倍稀釋成高低不同的五種濃度，用AVE-763A測定各濃度質(zhì)控品的紅細胞、白細胞各10次。

1.6質(zhì)量控制方法的建立

1.6.1 AVE-763A儀器的調(diào)試 嚴格儀器操作業(yè)指導書的操作要求每天進行一次系統(tǒng)的顯微鏡高低倍焦距調(diào)節(jié)，要求每個計數(shù)范圍內(nèi)的行、幀的焦距均至最滿意狀態(tài)。計數(shù)范圍高倍16幅低倍8幅，計數(shù)池清潔干凈。每日開機后，用新鮮RBC懸液進行顯微鏡焦距的細調(diào)節(jié)。

1.6.2室內(nèi)品的測試 將質(zhì)控物用生理鹽水準確稀釋10倍，顛倒混勻數(shù)次，重復測試二次（輔助人工鑒別），結(jié)果取均值，連續(xù)測定30d計算均值（X）均值、標準差（SD），繪制L-J質(zhì)控圖。

1.6.3質(zhì)控結(jié)果的判斷 結(jié)果在X±2s內(nèi)在控；超過X±3s為失控；在X±2s與X±3s為警告。不能有連續(xù)二次結(jié)果在X±2s外，不能有連續(xù)4次結(jié)果在均值一則或者結(jié)果漸升或漸降。

2結(jié)果

2.1 AVE-763A校正前分析定值質(zhì)控品（紅細胞=1240個/ul、白細胞=680個/ul）結(jié)果為紅細胞=1040（個/ul）、 白細胞=581（個/ul）、 紅細胞偏差為-15.6%、白細胞偏差為-16.6%。

2.2 AVE-763校正后分析不同濃度定值質(zhì)控物結(jié)果見表1。

2.3 AVE-763校正后對定值質(zhì)控物分析結(jié)果與定值接近，偏差為-2.45%（RBC）和-2.77%（WBC），比較正前明顯減小，質(zhì)控物在連續(xù)稀釋過程中濃度越低時偏差隨之增大。但比今年來的一些文獻[4]報道的精密度明顯小。

2.4質(zhì)控品的穩(wěn)定性評價 新配質(zhì)控品紅細胞=1204±98、白細胞=680±78（個/ul， n=10）；保存1～60d的質(zhì)控品紅細胞=1194±128、白細胞=680±85（個/ul，n=30）。經(jīng)統(tǒng)計學處理，TRBC=0.138 TWBC=0.238，P>0.05， 無顯著性差異，證明質(zhì)控物在60d內(nèi)穩(wěn)定。據(jù)文獻[3]報道未稀釋的質(zhì)控品可保存6個月穩(wěn)定，稀釋后的可用30d。

2.5室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果 n=30，紅細胞=114±19（個/ul），cv=16.6%，白細胞=65±13（個/ul）cv=20%。

3討論

在建立尿有形成份室內(nèi)質(zhì)量控制的過程中總結(jié)出可能影響儀器準確性和精密度的因素有以下幾點：

3.1 AVE-763A是全自動化智能化較高的尿液有形成分分析儀，它運用了\"機器視覺技術(shù)\"的多樣量計方式的原理，通過擴大計數(shù)面積從而提高陽性檢出率、減少系統(tǒng)誤差和偶然誤差，但是計數(shù)面積的增加的同時單位樣本的技術(shù)分析時間也隨之增加。血細胞每次在計數(shù)池中充樣的分布達不到完全一致（固有誤差），所以其計數(shù)結(jié)果精密度比血細胞分析儀要差一些。

3.2白細胞的重復性比紅細胞要差，主要原因為白細胞比紅細胞更難達到均勻分布。但AVE-763尿液有形成分分析儀與離心鏡檢法、定量計數(shù)板法相比較能更加簡便、準確、快速地對尿液有形成分進行定量分析[4]。

3.3目前沒有尿液有形成分校正品，用血細胞分析儀定值的質(zhì)控物來校正尿液有形成分分析儀，目的是使其對細胞的定量分析更精確。

3.4通過室內(nèi)質(zhì)量控制若儀器分析結(jié)果的精密度下降時應該增加計數(shù)的面積。室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果出現(xiàn)異常時應檢查儀器進樣系統(tǒng)是否準確，細胞是否清楚，有否輔以人工的校對，計數(shù)池是否清潔、吸樣后是否有氣泡，質(zhì)控液是否混勻、蒸發(fā)、濃縮等情況。排除這些因素后仍有偏差時可調(diào)節(jié)儀器的換算參數(shù)。

3.4.1標本不適合在進行樣架中放過長時間，否則有形成分的沉淀導致計數(shù)誤差的增加。樣本細胞濃度過高時儀器測試結(jié)果往往偏低或者出現(xiàn)假陰性，是由于細胞重疊不能計數(shù)所致。

3.4.2儀器在進入休眠狀態(tài)前不能將計數(shù)池種的標本沖洗掉，容易導致尿液沉淀結(jié)垢的雜質(zhì)滯留在計數(shù)池中，導致結(jié)果的假陽性，所以在日常使用和保養(yǎng)中增加沖洗次數(shù)減少計數(shù)池中雜質(zhì)滯留的概率.

參考文獻：

[1]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].第四版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：187-190.

[2]長沙愛威科技實業(yè)有限公司.AVE-763尿液有形成分分析儀用戶手冊.

[3]叢玉隆，馬俊龍.當代尿液分析技術(shù)與臨床[M].第一版.北京科技出版社，1998：112-113.

編輯/孫杰