摘要：目的 了解我院2013年銅綠假單胞菌的臨床分布狀況及耐藥情況，為臨床合理選擇抗菌藥物提供依據(jù)。方法 采用全自動微生物分析儀DL-96進(jìn)行細(xì)菌鑒定，藥敏試驗(yàn)和結(jié)果評價采用WHO及CLSI推薦的K-B法進(jìn)行，數(shù)據(jù)處理采用WHONET5.5軟件分析。結(jié)果 2013年共分離出129株銅綠假單胞菌，以痰液標(biāo)本分離株最多占64.3%，其次為傷口分泌物占14%。分離菌對抗菌藥物耐藥率最高為頭孢噻肟34.1%，依次為替卡西林/克拉維酸21.7%，頭孢哌酮17.0%，亞胺培南16.3%。敏感率最高的是阿米卡星98.4%，其次為妥布霉素96.9%，哌拉西林/他唑巴坦95.3%。結(jié)論 通過分析，銅綠假單胞菌是我院醫(yī)院感染的主要病原菌，動態(tài)監(jiān)測其耐藥率，嚴(yán)格管理抗菌藥物的應(yīng)用，做到合理使用抗菌藥物。

關(guān)鍵詞：銅綠假單胞菌；耐藥性；抗菌藥物

銅綠假單胞菌屬于非發(fā)酵菌，廣泛存在于醫(yī)院環(huán)境、人的腸道、呼吸道和皮膚，尤其在呼吸機(jī)管道、呼吸機(jī)霧化器、濕化瓶、輸氧管以及醫(yī)務(wù)人員手等部位廣泛存在，為醫(yī)院常見病原菌，主要引起呼吸道、傷口、燒傷創(chuàng)面等感染，與文獻(xiàn)報道一致[1]。為了了解我院銅綠假單胞菌在臨床的分布情況及耐藥率，為此對我院2013年臨床分離的129株銅綠假單胞菌進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。

1資料與方法

1.1菌株來源 129株銅綠假單胞菌均為我院2013年1月～12月臨床分離的菌株，去除相同部位的重復(fù)菌株。

1.2質(zhì)控菌株 銅綠假單胞菌ATCC27853，大腸桿菌ATCC25922，均來源于江蘇省臨床檢驗(yàn)中心。

1.3儀器與培養(yǎng)基 珠海迪爾生物工程有限公司生產(chǎn)的DL-96全自動微生物鑒定儀，藥敏紙片由OXOID公司提供，培養(yǎng)基由廣州市迪景公司提供。

1.4方法 細(xì)菌分離培養(yǎng)按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版操作，采用迪爾微生物鑒定儀鑒定，藥敏試驗(yàn)按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（CLSI）2011年推薦的紙片擴(kuò)散法測試，結(jié)果依據(jù)CLSI2011年標(biāo)準(zhǔn)判定耐藥、中介、敏感。

1.5統(tǒng)計(jì)方法 用WHONET5.5軟件進(jìn)行分析。

2結(jié)果

2.1銅綠假單胞菌的標(biāo)本分布 2013年共分離到非重復(fù)銅綠假單胞菌129株，按標(biāo)本來源來分以痰液最多83株（64.3%），見表1。

2.2銅綠假單胞菌的科室分布 129株銅綠假單胞菌的科室分布以呼吸內(nèi)科最多55株（43%），骨科19株（15%），普外科19株（15%），ICU株（6.2%）等，見表2。

2.3銅綠假單胞菌對常用抗生素的耐藥性分析 銅綠假單胞菌對頭孢噻肟的耐藥率較高34.1%，其次為替卡西林/克拉維酸21.7%，頭孢哌酮17%，亞胺培南16.3%。敏感率最高的為阿米卡星98.4%，其次為妥布霉素96.9%，哌拉西林/他唑巴坦95.3%。129株菌株對抗菌藥物耐藥性見表3。

2.4多重耐藥及泛耐藥銅綠假單胞菌的檢出 129株銅綠假單胞菌檢出3株多重耐藥菌，1株泛耐藥銅綠假單胞菌。

3討論

銅綠假單胞菌為條件致病菌，是醫(yī)院感染的常見致病菌之一。我國銅綠假單胞菌的耐藥性仍然處于較高水平，不同醫(yī)院抗菌藥物的耐藥性相差較大，應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)測，指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物并控制醫(yī)院耐藥菌感染的流行[2] 。

本次統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，銅綠假單胞菌臨床分離菌株標(biāo)本來源主要為痰液83株（64.3%），傷口分泌物18株（14%），這可能與廣譜抗菌藥物，激素及免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用有關(guān)。同時也表明呼吸道手術(shù)切口為醫(yī)院感染高發(fā)部位，應(yīng)注意加強(qiáng)防范。科室分布主要為呼吸內(nèi)科55株（43%），骨科為19株（15%），普外科為19株（15%）。呼吸內(nèi)科患者多存在嚴(yán)重基礎(chǔ)性疾病，病程較長，多有長期應(yīng)用廣譜抗菌藥物和腎上腺皮質(zhì)激素的情況，常有氣管插管、霧化通氣、人工吸痰等醫(yī)療措施，使得感染的機(jī)會大大增加，各種嚴(yán)重外傷、惡性腫瘤、胸腹腔等大手術(shù)后患者，這些患者機(jī)體抵抗力弱，多接受大劑量抗菌藥物、激素、放療、化療，以及氣管切開及各種導(dǎo)管等浸入性治療，這些患者均為醫(yī)院感染的高危人群。

銅綠假單胞菌是引起醫(yī)院感染最常見的病原菌，近年來其耐藥性不斷上升，呈現(xiàn)多重耐藥和泛耐藥菌現(xiàn)象，給臨床診斷帶來許多困難，銅綠假單胞菌對抗菌藥物的耐藥主要是產(chǎn)生多種β-內(nèi)酰胺酶、氨基糖苷類修飾酶、外膜通道蛋白D2（OPrD2）缺少及外排機(jī)制等[3，4]。由表3藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，三代頭孢菌素中頭孢他啶耐藥率為13.2%，頭孢哌酮耐藥率為17.0%，頭孢噻肟耐藥率34.1%，其中頭孢噻肟中介率為48.8%，這可能與該類藥物在我院臨床廣泛應(yīng)用有關(guān)，需加強(qiáng)對銅綠假單胞菌耐藥率有計(jì)劃的連續(xù)監(jiān)測，替卡西林/克拉維酸的耐藥率也占有一定比例為21.7%，應(yīng)引起臨床足夠的重視。我院也已出現(xiàn)一定比例耐亞胺培南的菌株，耐藥率達(dá)到16.3%，其耐藥機(jī)制非常復(fù)雜，主要與以下機(jī)制有關(guān)：①外膜通透性降低，銅綠假單胞菌外膜蛋白（OPrD2）是亞胺培南進(jìn)入菌體的特異性通道，該蛋白的表達(dá)降低或缺失，會使亞胺培南在菌體內(nèi)達(dá)不到有效藥物濃度，使引起銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥主要原因。②β-內(nèi)酰胺酶的水解，尤其是碳青霉烯水解酶，如Ampc酶、金屬β-內(nèi)酰胺酶等能水解亞胺培南化學(xué)結(jié)構(gòu)，使其失去活性。③多重耐藥外排系統(tǒng)高表達(dá)。當(dāng)外膜蛋白的調(diào)控基因發(fā)生變異時，外排泵蛋白表達(dá)增加，排除亞胺培南增多，使其在菌體內(nèi)有效濃度降低，從而產(chǎn)生耐藥。三種機(jī)制或單獨(dú)或協(xié)同在亞胺培南耐藥機(jī)制中發(fā)揮重要作用[5]。

氨基糖苷類藥物的耐藥率較低，如阿米卡星耐藥率1.6%，妥布霉素耐藥率3.1%，是因?yàn)榘被擒疹愃幬镫m然有抗銅綠假單胞菌的活性，但此類藥物對老年人及腎病患者有增加腎毒性的危險，主要用在聯(lián)合治療時使用，臨床較少單獨(dú)使用。氟喹諾酮類藥物環(huán)丙沙星、左氧氟沙星的耐藥率均低于其他三代頭孢菌素，表達(dá)出較好的抗菌活性。β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合藥物可抑制細(xì)菌產(chǎn)生質(zhì)粒介導(dǎo)的廣譜β-內(nèi)酰胺酶，使因產(chǎn)酶而致耐藥的菌株轉(zhuǎn)為敏感，其抗菌作用顯著優(yōu)于單藥成分，如哌拉西林/他唑巴坦對哌拉西林的耐藥率從11.6%降至4.7%，頭孢哌酮/舒巴坦對頭孢哌酮的耐藥率從17.0%降至7.0%。

我們從129株銅綠假單胞菌檢測出3株多重耐藥菌，1株泛耐藥菌。由于銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)理非常復(fù)雜，它幾乎包括于現(xiàn)在已知的所有耐藥機(jī)理[6]。

綜上所述，對存在以上相關(guān)危險因素的患者所處的醫(yī)院環(huán)境應(yīng)加強(qiáng)消毒隔離措施，減少各種浸入性操作，注意醫(yī)療器械的消毒和滅菌，增強(qiáng)患者的免疫功能，嚴(yán)格控制抗菌藥物的使用，加強(qiáng)院內(nèi)感染的管理和監(jiān)測，從而有利于防止銅綠假單胞菌的感染與傳播。

參考文獻(xiàn)：

[1]倪語星.2005年中國CHINAET銅綠假單胞菌耐藥性分析[J].中國感染與化療雜志，2007，7（4）：274-278.

[2]孫景勇，倪語星，汪復(fù)，等.2007年中國CHINAET銅綠假單胞菌耐藥性監(jiān)測[J]中國感染與化療雜志，2009，5（3）：192-195.

[3]植志全，何志恒，江鵬，等.多耐藥銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺酶和氨基糖苷類耐藥基因研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，28（11）：1211-1214.

[4]顧兵，童明慶，趙文君，等.銅綠假單胞菌多重耐藥機(jī)制研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29（12）：1097-1102.

[5]駱俊，朱德妹.銅綠對碳青霉烯類抗生素耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國感染與化療雜志，2008，8（1）：76-79.

[6]褚海青，李惠萍，何國鈞.銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)制[J].中國抗感染化療雜志，2003，3（1）：54-56.

編輯/申磊