摘要： 目的 探討腦出血患者凝血酶、MMP-9在腦出血急性期經(jīng)時動態(tài)變化及二者相關性，為急性期腦出血的治療奠定臨床的理論基礎。方法 分別于發(fā)病后不同時間點抽取45例腦出血患者靜脈血檢測凝血酶及MMP-9水平。同時檢測15例正常受試者的血漿凝血酶及MMP-9的水平，分析二者是否存在相關性。結果 一般正常人體內(nèi)會有少量凝血酶及MMP-9的表達，經(jīng)EL1SA法測定，腦出血患者凝血酶與MMP-9血漿含量動態(tài)變化的相關性檢驗，二者的峰值（第5d）呈正相關（P<0.01），兩者經(jīng)時動態(tài)變化的全過程仍然具有高度相關性（P<0.01）。結論 ①正常人血漿存在凝血酶與MMP-9少量表達。②腦出血患者從發(fā)病24h內(nèi)血漿凝血酶水平即迅速升高，至第5d后達高峰，第15d下降顯著與24h相比變化不大，已下降至發(fā)病早期水平，但仍高于正常。③腦出血患者于發(fā)病24h內(nèi)血漿MMP-9水平增高，至第5d左右達高峰，第10d時MMP-9顯著低于高峰期水平，但仍高于24h水平，第15d下降更加顯著，較24h明顯下降，僅輕度高于正常人血漿MMP-9水平。④在整個變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關性。后期凝血酶下降速度慢于MMP-9的下降速度。

關鍵詞：腦出血；凝血酶；基質金屬蛋白酶-9

目前國內(nèi)外大量動物實驗證實腦出血后凝血酶參與了腦水腫的發(fā)生與發(fā)展過程，同時凝血酶的活化又使水腫期另一關鍵致病因素MMP-9的表達上調(diào)，這兩者相互促進，加重腦出血后腦水腫的發(fā)生、發(fā)展過程。

腦出血占腦血管病的10%～15%，血腫周圍水腫是導致腦出血患者病情加重及致殘的重要原因。腦出血后血漿、顱內(nèi)血腫液凝血酶增高機制為腦出血后激活了外源性凝血途徑，增加血漿凝血酶的含量。凝血酶的激活又啟動了另一種腦水腫致病因子，基質金屬蛋白酶類（MMPs）異常表達與血腦屏障（BBB）被破壞直接相關，是導致血管源性腦水腫和繼發(fā)性腦組織損傷的另一關鍵因素。MMP-9是MMPs中的主要明膠酶，可特異性地降解基底膜的主要成分。研究探明凝血酶，MMP-9在腦出血急性期動態(tài)變化規(guī)律。

研究條件：搜集2008年～2009年初在吉林大學第一醫(yī)院住院的腦出血患者45例，正常對照組15例。

研究方法：45例腦出血患者在24h內(nèi)，第5d，第10d，第15d分別抽取靜脈血，檢測血漿凝血酶及MMP-9的含量，同時正常采集對照組15例健康受試者清晨空腹靜脈血1次。將所有數(shù)據(jù)用統(tǒng)計學方法進行統(tǒng)計分析，討論凝血酶與MMP-9是否具有相關性。

研究結果：在整個變化過程中，凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關性。后期凝血酶下降速度慢于MMP-9的下降速度。

1資料與方法

1.1一般資料 45例腦出血組患者符合1995年全國腦血管病會議制定的腦出血診斷標準。對照組15例為本院健康查體者。兩組男女比例為40：20例，平均年齡（54.3±10.8）歲，與年齡、性別構成比無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

1.2方法

1.2.1觀察時間 血液標本收集與測定分別于發(fā)病24h內(nèi)、第5d、第10d、第15d采取空腹肘靜脈血各取3ml，靜置30min，離心（3000r/min）15min，取血清標本待測。正常對照組采集清晨空腹靜脈血1次。采用ELISA法原理測定凝血酶及MMP-9的靜脈血含量。

1.2.2凝血酶及MMP-9檢測方法 所有患者于發(fā)病后24h內(nèi)、第5d、第10d、第15d抽取空腹靜脈血3ml，枸櫞酸鈉抗凝，1h內(nèi)離心分離血漿至-40℃冰箱保存待測。凝血酶的測定采用ELISA法。

1.2.3統(tǒng)計方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料采用均數(shù)±標準差（x±s）表示，以P<0.01為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1腦出血患者血漿凝血酶的動態(tài)變化 經(jīng)ELISA法檢測顯示，第5d與24h相比凝血酶含量增多，第10d時凝血酶含量較第5d顯著減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01），與24h相比，差異無顯著性（P>0.01），見表1。

2.2腦出血患者血漿MMP-9的動態(tài)變化 經(jīng)ELISA法檢測顯示，第5d與24h相比血漿MMP-9水平增高，第5d與第10d相比，第15d下降顯著，與24h比，與第10d比，差異具有顯著性（P<0.01），見表2。

2.3腦出血患者血漿凝血酶與MMP-9變化的相關性 腦出血患者凝血酶與MMP-9血漿含量動態(tài)變化的相關性檢驗，兩者的峰值呈正相關，兩者隨時間動態(tài)變化的全過程仍然具有高度相關性（P<0.01），見圖1。

3討論

3.1腦出血后凝血酶動態(tài)變化 早期凝血酶升高是由于凝血功能增強，凝血酶參與到凝血機制中，同時活化的凝血酶經(jīng)過腦脊液以及腦靜脈系統(tǒng)吸收入血，造成凝血酶的表達上調(diào)。隨著病情發(fā)展，纖溶功能逐漸增強，纖維蛋白溶解，與纖維蛋白交聯(lián)而失活的凝血酶開始逐漸釋放并激活，釋放的凝血酶開始作用于腦組織細胞，造成腦細胞水腫，壞死。同時由于凝血酶對BBB的破壞，促進血管源性腦水腫的發(fā)生。腦出血急性期凝血酶含量與腦水腫呈正相關性。

3.2腦出血后MMP-9的動態(tài)變化 因血腫直接壓迫周圍腦組織和小血管，引起局部血流量降低，組織細胞缺血缺氧，導致細胞功能發(fā)生改變；缺血-缺氧作為一種信號，刺激炎性細胞、神經(jīng)元、內(nèi)皮細胞和膠質細胞，從而激活了MMPs系統(tǒng)導致MMP-9表達上調(diào)。在腦出血第5d時，血漿MMP-9的水平處于峰值，隨后由于血腫體積縮小，凝血酶的含量下降，MMP-9的水平迅速下降，甚至快于凝血酶。國內(nèi)外的動物試驗發(fā)現(xiàn)腦出血模型組的MMP-9的mRNA與蛋白表達呈正相關性。

3.3腦出血后凝血酶與MMP-9表達相關性 在整個腦出血的動態(tài)變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶下降速度慢于MMP-9下降速度，達峰值后血漿凝血酶在15d水平與其24h內(nèi)含量相比無明顯差異，而MMP-9的水平已較24h內(nèi)含量明顯減少。隨著新生血管對腦供血增強，缺血缺氧等刺激因素減少，腦組織表達MMP-9的水平迅速下降。

4結論

4.1正常人血漿存在凝血酶與MMP-9少量表達。

4.2腦出血患者從發(fā)病24h內(nèi)血漿凝血酶水平迅速升高，至第5d后達高峰，第15d下降與24h相比變化不大，下降至發(fā)病早期水平。

4.3腦出血患者于發(fā)病24h內(nèi)血漿MMP-9水平增高，至第5d左右達高峰，第10d時MMP-9顯著低于高峰期水平，但仍高于24h水平，第15d下降更加顯著，較24h明顯下降，僅輕度高于正常人血漿MMP-9水平。

4.4在整個變化過程中，凝血酶含量越高，MMP-9水平越高。凝血酶水平與MMP-9水平呈正相關性。

參考文獻：

[1]宏偉，胡鳴一， 楊期東，等.實驗性腦出血大鼠腦內(nèi)基質金屬蛋白酶9的表達作用研究[J]. 中華老年心腦血管病雜志，2005，7（1）：53-55.

[2]董為偉.腦出血患者血漿基質金屬蛋白酶-9水平的動態(tài)變化及其臨床意義[J].中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志，2004，4（2）：101-103.

[3]Anderluh M， Dolenc MS.Thrombin receptor antagonists； recent advanced in PAR1 antagonist development [J]. Curt Med Chem， 2002，9：1229-1250.

[4]Kawakita K， Kawai N，Kuroda Y，et al.Expression of matrix metalloproteinse-9 in thrombin-induced brain edema formation in rats[J]. Stroke Cerebrovasc Dis， 2006，15（3）：88-95.

編輯/申磊