乙型肝炎病毒（HBV）是一種非細胞毒性病毒，當其進入機體后常可引起一系列復雜的免疫反應。而機體產生的免疫應答的強弱又與HBV感染所致的不同臨床結果密切相關。而在這一系列免疫應答中，細胞免疫應答又是決定HBV感染機體后轉歸的最重要因素。而不同的T細胞亞群對病毒抗原的反應狀態(tài)也不同，即對臨床過程的輕重及轉歸的影響不同。本實驗應用流式細胞儀對健康人、慢性乙型肝炎患者和乙肝肝硬化患者外周血中的測定CD4+、CD4+/CD8+、CD4+/CD8細胞的含量進行了檢測計算，來探討慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+、CD4+/CD8+、CD4+/CD8細胞特點及其與肝病病情的關系。

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1研究病例 2013年7月～12月在我院門診和住院的慢性乙型肝炎患者（經肝功檢測、肝炎病毒血清標記物ELISA檢測、HBV-DNA定量檢測確診為乙型肝炎并排除其它類型肝炎的患者）101例作為研究病例，其中慢性乙型肝炎患者60例，乙型肝炎肝硬化患者41例，年齡為30～72歲，平均年齡（50.3±5）歲，男性：56例，女性：45例。診斷標準均符合全國病毒性肝炎會議修訂的診斷標準。同時選取40例年齡相匹配的健康體檢者（無肝炎病史癥狀及體征、肝功能正常、肝炎病毒血清標志物陰性），男性：22例，女性：18例，作為對照組。

1.1.2儀器 流式細胞儀：美國BD公司FACSCanto2型；

1.1.3試劑 進口的配套試劑

1.2方法 標本采集，以無菌方式采集各實驗對象晨起空腹用EDTAK2抗凝，用于當天流式細胞儀檢測。

1.3統(tǒng)計學處理 資料采用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析和t檢驗，數(shù)據用均數(shù)±標準差（x±s）表示。

2結果

與正常對照組比較，肝硬化組外周血CD4+、CD4+/CD8+、細胞均少于對照組（P均<0.05）；慢性乙肝組CD4+、CD4+/CD8+、細胞明顯高于乙肝肝硬化組（P<0.05）；慢性乙肝組CD4+、CD4+/CD8+、細胞明顯低于對照組（P<0.05）。各組間CD3+、CD8+變化無顯著差異（P>0.05），見表1。

3討論

病毒性肝炎（Viral hepatitis）為一種全球性傳染病，特別是在非洲及發(fā)展中國家廣為流傳[1]。其中，乙型病毒性肝炎的流行嚴重地影響著我國國民的健康水平，并制約著社會和經濟的發(fā)展。

乙肝病毒（HBV）是一種非細胞毒性病毒，當其進入機體后?？梢鹨幌盗袕碗s的免疫反應[2]。而機體針對HBV編碼的各種抗原成分產生的免疫應答的強弱又與HBV感染所致的不同臨床結果密切相關[3]。在這一系列免疫應答中，細胞免疫應答又是決定HBV感染機體后轉歸的最重要因素。而不同的T細胞亞群對病毒抗原的反應狀態(tài)也不同，即對臨床過程的輕重及轉歸的影響不同。

總之，CD4+細胞表型、功能等各個方面的變化可能在很多疾病中均可作為疾病活動、復發(fā)和療效的判定指標之一，具有很重要的臨床意義。

目前國內外對慢性乙型肝炎細胞免疫研究較多的是患者外周血CD4+和CD8+T細胞，本實驗在檢測CD3+、CD4+、CD8+T細胞的基礎上，應用流式細胞儀對健康人、不同程度（慢性乙肝、乙肝肝硬化）的慢性乙型肝炎患者外周血中的細胞的含量進行了直接檢測。

結果發(fā)現(xiàn)，慢性肝炎患者、 乙肝肝硬化患者與正常人相比，其外周血中CD3+、CD8+T細胞均無明顯改變；CD4+、CD4+/CD8+、T細胞均明顯降低（P<0.05），而且，乙肝肝硬化患者與慢性乙型肝炎患者相比，CD4+、CD4/CD8+、T細胞明顯降低（P<0.05），這一結果提示了CD4+ 、CD4+/CD8+、T細胞在乙型肝炎慢性化過程中起重要作用，且與慢性乙型肝炎患者病情的進展呈負相關[4]。這可能是因為在慢性乙型肝炎患者體內，HBV感染波及的肝細胞數(shù)量很多，又由于大量HBV的長期存在，致使CD4+、CD4+ /CD8+T細胞明顯減少。細胞免疫殺傷了HBV的大量肝細胞的同時，造成了肝細胞的嚴重損傷，又由于缺乏CD4+CD45RO+T細胞的輔助，B細胞產生的抗體不足以中和釋放到細胞外的大量HBV，造成了不同程度的慢性乙型肝炎，形成了一種惡性循環(huán)。由此可認為，測定CD4+、CD4+/CD8+T細胞的含量在某種程度上可為判定慢性乙型肝炎患者的病情進展情況提供一種有效手段。

即測定CD4+、CD4+/CD8+、T細胞的含量更能反映出慢性乙型肝炎患者的病情進展情況。這也使我們認識到檢測CD4+、CD4+/CD8+、T細胞亞群更能使我們正確、充分、全面地了解慢性乙型肝炎的發(fā)病機制和預后，從而有效地指導臨床治療。

參考文獻：

[1]余傳霖，葉天星，陸德源，等.現(xiàn)代醫(yī)學免疫[M].上海：上海醫(yī)科大學出版社，1998：1152-1159.

[2]Guidotti L G，Ishikawa T，Hobbs M V，et al.Intracellular inactivation of the hepatitis B virus by cytotoxic T lymphocytes [J].Immunity，1996，4（1）：25-36.

[3]Guidotti L G，Rochfood R，Chung J，et al.Viral clearance without destruction of infected cells during acute HBV infection [J].Science，1999，284（2）：825-829.

[4]武建國，李曉軍.免疫學詞典 [M].南京：南京師范大學出版社，2001：20.

編輯/肖慧