摘要[目的]探討黃山花楸種子休眠與種子內(nèi)源抑制物質(zhì)的關(guān)系。[方法]研究黃山花楸果皮、果肉和種子的不同濃度水浸提液(0.01、0.03、0.06和0.10 g/ml)對(duì)白菜種子萌發(fā)的抑制作用。[結(jié)果]各浸提液濃度比例相同的情況下,果肉水浸提液對(duì)白菜種子的發(fā)芽率、苗高、根長(zhǎng)和種子活力指數(shù)的抑制活性最強(qiáng),果皮和種子次之。[結(jié)論]黃山花楸果實(shí)中含有抑制種子萌發(fā)的成分,抑制物質(zhì)活性強(qiáng)弱順序依次為果肉、果皮、種子。
關(guān)鍵詞 黃山花楸;抑制物質(zhì);浸提液;生物測(cè)定
中圖分類號(hào)Q945.3;S792.25文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611(2014)29-10183-02
基金項(xiàng)目國(guó)家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201210375037)。
作者簡(jiǎn)介徐向東(1991- ),男,安徽安慶人,本科生,專業(yè):林學(xué)。*通迅作者,副教授,博士,從事種苗學(xué)研究。
黃山花楸(Sorbus amabilis)隸屬薔薇科(Rosaeeae)花楸屬(Sorbus)落葉喬木,為20世紀(jì)60年代發(fā)現(xiàn)的我國(guó)特有種、國(guó)家三級(jí)珍稀瀕危保護(hù)植物[1]。其主要分布于我國(guó)安徽、浙江、湖北、福建等地,黃山、大別山為中心產(chǎn)地[2-3],是著名的觀花觀果的園林珍品。其種子具有休眠現(xiàn)象,嚴(yán)重制約其進(jìn)一步推廣開(kāi)發(fā)。有研究表明黃山花楸種子休眠主要是由種皮機(jī)械障礙引起的物理休眠[4-5]。而國(guó)內(nèi)外有學(xué)者對(duì)花楸屬其他物種研究表明,花楸的果肉和果汁均明顯抑制種子的發(fā)芽[6-7]。黃山花楸果實(shí)是否存在發(fā)芽抑制物質(zhì),目前尚未見(jiàn)報(bào)道。為此,筆者研究了黃山花楸果皮、果肉和種子水浸提液對(duì)白菜種子萌發(fā)的影響,旨在為闡明黃山花楸種子休眠機(jī)制提供理論依據(jù)。
1材料與方法
1.1材料黃山花楸果實(shí)于10月下旬采自安徽省黃山風(fēng)景區(qū)天海景區(qū)(海拔1 700~1 800 m),選擇生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲害的母株進(jìn)行采種,分離出果皮和果肉,除雜后將果皮、果肉和種子自然陰干備用。白菜種子為市售,發(fā)芽率≥85%,含水量≤7%,凈度≥98%。
1.2方法
1.2.1果實(shí)浸提液的制備。將黃山花楸種子、果肉和果皮材料分別置于60 ℃烘箱中烘干至恒重后放入研缽中研磨至粉末,按樣品∶蒸餾水=1∶10的比例加入蒸餾水,置于4 ℃冰箱中浸提24 h,定性濾紙過(guò)濾,濾液即為水浸提液母液(0.10 g/ml),然后將各浸提液分別配制成0.01、0.03、0.06和0.10 g/ml質(zhì)量濃度溶液,以蒸餾水作對(duì)照組。
1.2.2果實(shí)浸提液的生物測(cè)定。用黃山花楸種子、果肉和果皮水浸提液各濃度處理及對(duì)照溶液分別浸泡白菜種子,每處理設(shè)4次重復(fù),每重復(fù)50粒種子。浸種24 h后,將白菜種子置床,放入30 ℃黑暗條件下進(jìn)行白菜種子發(fā)芽試驗(yàn)。每天記錄發(fā)芽數(shù),48 h后統(tǒng)計(jì)白菜種子的發(fā)芽率(以露出子葉為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)),第5天測(cè)定幼苗的苗高和根長(zhǎng)。
1.2.3數(shù)據(jù)處理。試驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用Excel軟件和SPSS17.0軟件進(jìn)行方差分析。
發(fā)芽率:在一定時(shí)間內(nèi),正常發(fā)芽種子數(shù)占供試種子總數(shù)的百分比。
簡(jiǎn)化活力指數(shù)(SVI):SVI=S×G[8]
式中,S為幼苗高度;G為發(fā)芽率。
2結(jié)果與分析
2.1黃山花楸果實(shí)浸提液對(duì)白菜種子發(fā)芽率的影響方差分析表明,用0.01~0.06 g/ml種子浸提液處理的白菜種子發(fā)芽率與對(duì)照(蒸餾水浸種)相比,差異均不顯著,當(dāng)濃度達(dá)到0.10 g/ml時(shí),其種子浸提液處理的白菜種子發(fā)芽率比對(duì)照顯著下降10.9%。
由圖1可知,隨著黃山花楸果皮、果肉浸提液濃度的增加,白菜種子的發(fā)芽率均呈逐漸降低的趨勢(shì)。果皮浸提液0.01、0.03、0.06、0.10 g/ml濃度處理的白菜種子發(fā)芽率分別比對(duì)照降低6.5%、41.8%、63.0%、81.0%,對(duì)照組的種子發(fā)芽率與0.01 g/ml果皮水浸提液處理組間差異不顯著,與其他處理組差異均達(dá)到顯著水平;果肉浸提液0.01、0.03、0.06 g/ml濃度處理的白菜種子發(fā)芽率分別比對(duì)照降低34.2%、94.0%和98.9%,當(dāng)濃度達(dá)到0.10 g/ml時(shí)其浸提液處理的白菜種子不能發(fā)芽,各處理組種子發(fā)芽率與對(duì)照相比差異均達(dá)到顯著水平。
注:柱上不同小寫字母表示處理間在0.05水平差異顯著。
2.2黃山花楸果實(shí)水浸提液對(duì)白菜幼苗生長(zhǎng)的影響(表1)
2.2.1對(duì)白菜幼苗苗高的影響。不同濃度的黃山花楸果實(shí)水浸提液對(duì)白菜幼苗高度的影響不同。種子浸提液各濃度處理均促進(jìn)白菜幼苗苗高增加,且差異達(dá)到顯著水平,當(dāng)濃度為0.06 g/ml時(shí),苗高達(dá)到最大值,之后逐漸下降,表明黃山花楸種子水浸提液可能含有某些促進(jìn)幼苗高生長(zhǎng)的水溶性化學(xué)物質(zhì)。黃山花楸果皮水浸提液對(duì)苗高影響隨浸提液濃度增加而呈下降趨勢(shì),當(dāng)浸提液濃度達(dá)到0.06、0.10 g/ml時(shí)白菜幼苗苗高分別比對(duì)照下降15.3%和33.0%。黃山花楸果肉水浸提液顯著抑制白菜幼苗苗高的生長(zhǎng),浸提液濃度超過(guò)0.01 g/ml時(shí)幾乎不見(jiàn)正常白菜幼苗。方差分析表明,各處理組間苗高差異均達(dá)到極顯著水平。
2.2.2對(duì)白菜幼苗根長(zhǎng)的影響。黃山花楸種子水浸提液在濃度≤0.03 g/ml時(shí)能促進(jìn)白菜幼苗根的生長(zhǎng),當(dāng)濃度≥0.06 g/ml時(shí)則顯著抑制根的生長(zhǎng),根長(zhǎng)分別比對(duì)照減少38.3%、84.6%;果皮浸提液對(duì)根長(zhǎng)影響呈現(xiàn)相同趨勢(shì),分別比對(duì)照減少37.4%、78.9%。黃山花楸果肉水浸提液濃度超過(guò)0.01 g/ml時(shí)嚴(yán)重抑制白菜胚根的生長(zhǎng)。方差分析表明,各處理組間根長(zhǎng)差異均達(dá)到極顯著水平。
2.2.3對(duì)白菜種子活力的影響。黃山花楸種子水浸提液濃度≤0.06 g/ml時(shí)白菜種子活力指數(shù)呈現(xiàn)上升趨勢(shì),種子浸提液濃度達(dá)到0.10 g/ml時(shí)白菜種子活力指數(shù)下降為1.91,但與對(duì)照差異不顯著。果皮水浸提液濃度≥0.03 g/ml時(shí)白菜種子活力指數(shù)顯著下降,分別比對(duì)照下降42.2%、68.8%、87.0%。果肉水浸提液濃度為0.01 g/ml時(shí)白菜種子活力比對(duì)照下降29.2%。方差分析表明,不同濃度水浸提液處理的白菜種子活力指數(shù)差異均達(dá)到極顯著水平。
3討論
植物種子中存在萌發(fā)抑制物質(zhì)是導(dǎo)致種子休眠的一個(gè)主要因素,種子中的很大一部分發(fā)芽抑制物質(zhì)是一些簡(jiǎn)單的小分子有機(jī)物質(zhì),通常這些物質(zhì)主要存在于果肉、種皮、果皮、胚乳、子葉等處[9-11]。有學(xué)者通過(guò)去胚根和子葉端種皮及種胚、種胚去子葉,種子均能有效萌發(fā)并長(zhǎng)出形態(tài)正常的真葉,推斷黃山花楸種皮及子葉中不存在明顯的抑制物質(zhì)[4],該試驗(yàn)結(jié)果也間接證實(shí)這一推斷。種子浸提液濃度在0.01~0.06 g/ml對(duì)白菜種子發(fā)芽率無(wú)明顯影響。而果皮和果肉浸提液對(duì)白菜種子發(fā)芽率的抑制作用則隨浸提液濃度的升高而逐漸加強(qiáng),尤其是果肉的抑制作用最強(qiáng),當(dāng)浸提液濃度達(dá)到0.10 g/ml時(shí)白菜種子發(fā)芽率為0。黃山花楸種子、果皮和果肉水浸提液對(duì)白菜幼苗生長(zhǎng)和種子活力影響程度表現(xiàn)出一定差異,總體趨勢(shì)是低濃度表現(xiàn)促進(jìn)作用,高濃度表現(xiàn)出明顯抑制作用,究其原因可能是水溶性抑制性物質(zhì)含量少,當(dāng)稀釋到一定濃度時(shí),這種抑制作用被其他水溶性物質(zhì)的促進(jìn)作用所掩蓋[12]。
綜上所述,黃山花楸果實(shí)水浸提液含有某些化學(xué)物質(zhì),這些物質(zhì)能抑制白菜種子萌發(fā),萌發(fā)抑制作用大小依次為果肉浸提液、果皮浸提液、種子浸提液,提示黃山花楸果實(shí)采集后要立即調(diào)制,及時(shí)去除果肉和果皮中水溶性抑制物質(zhì)。
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