摘要：本文通過改進(jìn)食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的氣相色譜測定方法，用HP-5石英毛細(xì)管柱、氣相色譜進(jìn)行定性和外標(biāo)法定量。

關(guān)鍵詞：食品 環(huán)己基氨基磺酸鈉 氣相色譜

中圖分類號：TS207.3 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）02-0047-02

甜蜜素又名環(huán)己基氨基磺酸鈉，被廣泛添加到食品中，如蜜餞、飲料、糕點(diǎn)、配制酒等。因?yàn)樘鹈鬯貫檎崽堑?0-50倍，價(jià)格僅為蔗糖的3倍；溶性極好，可用冷水或熱水溶解；甜味清爽。這正是很多食品中都添加了甜蜜素的原因。少量食用甜蜜素對身體健康影響不大，但如大量食用甜蜜素則會(huì)損害腎臟功能，過量食用甚至?xí)a(chǎn)生致癌或致畸等副作用。國內(nèi)很多檢驗(yàn)室都是使用食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的氣相色譜測定方法來進(jìn)行分析的，國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.97-2003食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測定氣相色譜方法中衍生的產(chǎn)物有兩個(gè)色譜，兩個(gè)色譜峰的面積會(huì)隨時(shí)間的改變而改變，結(jié)果數(shù)據(jù)處理上較為復(fù)雜，且在大批量處理時(shí)很難保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文通過對檢測甜蜜素的方法進(jìn)行優(yōu)化，使得衍生后的產(chǎn)物只有一個(gè)色譜峰環(huán)己醇亞硝酸酯，使結(jié)果更為準(zhǔn)確，數(shù)據(jù)處理更簡單，回收率高，能滿足檢測食品中甜蜜素的要求。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

氣相色譜GC-7820A：安捷倫氣相色譜配備氫火焰離子化檢測器、離心機(jī)、粉碎機(jī)。

正己烷：色譜純；氯化鈉：分析純；50g/L亞硝酸鈉溶液；100g/L硫酸溶液；甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)品（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心）：稱取0.68700g甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)品，加蒸餾水溶解并定容至100mL，配制成6.8700mg/mL的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)使用溶液。

1.2 色譜條件

色譜柱：HP-5石英毛細(xì)管柱（30m×0.32mm× 0.25μm）；色譜條件：檢測器溫度250℃；進(jìn)樣口溫度 200℃；柱溫使用程序升溫：初始溫度80℃保持2分鐘，再以20℃/min升到200℃；柱流速：1ml/min；分流比10：1；氫氣流量30mL/min；空氣流量：300mL/min。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制

將6.8700mg/mL的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)使用溶液稀釋10倍，配制成濃度為0.68700mg/mL的使用溶液，并準(zhǔn)確從中吸1ml，2ml，3ml，4ml，5ml置于50ml具塞比色管中，再加水至20ml。以下操作步驟同樣品測定1.4.4一致。

1.4 樣品處理

（1）固體樣品：將固體樣品用粉碎機(jī)粉碎，用天平準(zhǔn)確稱取5-10克置于一次性杯中，加水至100克，浸泡1小時(shí)或超聲波提取30min，過濾，準(zhǔn)確吸取濾液20ml樣品置于50ml具塞比色管中。

（2）酒和含二氧化碳飲料：稱取100克左右樣品，置于100℃水浴，揮發(fā)掉樣品中的酒精或二氧化碳，放置室溫后補(bǔ)加蒸餾水至原來質(zhì)量。

（3）液體試樣：直接稱取20克樣品于50ml具塞比色管中。

（4）測定：將稱好的樣品置于冰浴中，放置過程中用溫度計(jì)測量溶液的溫度，一般約5～10分鐘左右溫度可降到<2℃，溶液溫度降到<2℃后加入5ml 50g/L亞硝酸鈉溶液，搖均；加5ml 100g/L硫酸溶液，搖均；放置冰浴中30分鐘，并要經(jīng)常搖動(dòng)，在這過程中放置溫度計(jì)測定液體的溫度，及時(shí)補(bǔ)加冰塊，確保整個(gè)衍生的過程中溶液溫度<2℃。30分鐘后加入10ml正己烷，5克氯化鈉，旋渦振蕩器上混合1分鐘或手動(dòng)上下振搖約80次。待靜止分層后吸取適量正己烷于離心管中3500r/min離心5分鐘，吸取上層清液用氣相色譜檢測。

有些樣品振搖過程中產(chǎn)生大量的泡沫，將比色管置于超聲波中超聲20分鐘，再吸上層正己烷于離心管中3500r/min離心5分鐘，吸取上層清液用氣相色譜檢測。

2 結(jié)果分析與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系與方法準(zhǔn)確度

用甜蜜素含里為0.0687、0.1374、0.2060、0.2748、 0.3435mg5種濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列作曲線，標(biāo)準(zhǔn)的線性關(guān)系0.99996，在0.07～0.34mg/mL的范圍內(nèi)顯示良好的線性關(guān)系。

2.2 加標(biāo)回收率

按照1.4.4方法處理樣品，對市售的3種飲料進(jìn)行測定，添加甜蜜素含量為0.1374mg標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行回收試驗(yàn)，結(jié)果表明，加標(biāo)回收率在99.1%～101.2%。

2.3 溫度對衍生反應(yīng)過程的影響

如果按照GB/T5009.97-2003食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測定氣相色譜方法進(jìn)行前期處理，結(jié)果產(chǎn)生環(huán)己醇亞硝酸酯和環(huán)己醇兩種物質(zhì)。因?yàn)檠苌磻?yīng)過程溫度對其影響很大，在均勻的酸性介質(zhì)條件下，溶液會(huì)在不同的溫度下進(jìn)行反應(yīng)，所衍生的環(huán)己醇亞硝酸酯和環(huán)己醇的含量不一樣，通過實(shí)驗(yàn)的結(jié)果數(shù)據(jù)分析顯示，開始反應(yīng)時(shí)溶液溫度<2℃，而且整個(gè)反應(yīng)過程都保持溶液溫度<2℃時(shí)，衍生產(chǎn)物只有環(huán)己醇亞硝酸酯，所以在測定過程中控制好溫度是保證檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。添加6.8700mg/mL的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)使用溶液1mL于五支空白比色管中試驗(yàn)，不同溫度的溶液開始反應(yīng)與反應(yīng)產(chǎn)物峰面積的變化見下表2。

3 結(jié)語

甜蜜素反應(yīng)過程是生成環(huán)己醇亞硝酸酯還是生成環(huán)己醇，受溫度和介質(zhì)的影響很大，前期樣品處理過程控制好反應(yīng)的溫度和試劑的加入順序，掌握好反應(yīng)的時(shí)間等條件很重要。加入亞硝酸鈉溶液要搖均；加入硫酸溶液要搖均；因?yàn)檠苌磻?yīng)對條件很敏感，溶液和介質(zhì)一定要?jiǎng)蚓?。硫酸和亞硝酸鈉后要經(jīng)常振搖比色管，使其充分反應(yīng)甜蜜素。加入正己烷后振搖過程中要常打開蓋子放氣，以免振搖過程中液體漏出，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。

本方法經(jīng)過對樣品處理和測定條件的改進(jìn)，使檢測的結(jié)果中只有一種產(chǎn)物環(huán)己醇亞硝酸酯，去除了副產(chǎn)物環(huán)己醇的產(chǎn)生，使結(jié)果數(shù)據(jù)處理更加簡單，回收率高，使得結(jié)果更為準(zhǔn)確，可滿足同時(shí)大批量檢測食品中的甜蜜素。在CNAS能力認(rèn)證中使用該方法分析飲料中的環(huán)己基氨基磺酸鈉取得滿意的結(jié)果，證明該方法是可行的。

參考文獻(xiàn)

[1]GB/T 5009.97-2003食品中環(huán)環(huán)己基氨基磺酸鈉的測定.

[2]GB 2760-2011食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn).

[3]周正香.食品中甜蜜素氣相色譜方法測定的研究.食品安全檢測雜志.2012，37（4）.

[4]周慧敏，趙彤.食品中甜蜜素檢測方法的改進(jìn).食品研究開發(fā).2012.11（33）.