摘要：本文通過對桑葉多糖的提取方法對比，得出超聲波輔助浸提法收率最高，多糖含量可以達(dá)到5.32%。同時(shí)對超聲波法輔助浸提工藝的3個(gè)因素3個(gè)水平的正交實(shí)驗(yàn)考察得知超聲波輔助浸提法法對桑葉多糖含量影響最大的因素為提取次數(shù)。在這3個(gè)因素中其影響程度的排序是提取次數(shù)>提取時(shí)間>固液比。而最佳提取條件的組合是固液比1：15，提取次數(shù)2次，提取時(shí)間為1.5-2.0h。在最佳條件下，桑葉多糖提取收率可以達(dá)到21.56%。

關(guān)鍵詞：桑葉多糖 提取 超聲波 工藝

中圖分類號：TQ28 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）02-0022-03

桑葉椒?？浦参锷Ｔ谌~子，有名家桑、荊桑、黃桑葉等，全國各地基本都有生產(chǎn)。藥用一般認(rèn)為桑葉性味苦、甘、寒、有散風(fēng)祛熱功效，我國桑葉資源豐富，若能加以有效利用從桑葉中提取天然藥用有效成分如桑葉多糖等制備藥品或保健品，有著很重大的意義。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

干桑葉：無極限（中國）有限公司提供。FA2004N 型分析天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；超聲波清洗器（K1-250DE（功率250W），昆山市超聲儀器有限公司；DZKW-D-2電熱恒溫水浴鍋，北京市永光明醫(yī)療儀器廠；XW-80A微型旋渦混合儀，上海瀘西分析儀器廠；XFB-200/400小型粉碎機(jī)，湖南中誠制藥機(jī)械廠

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

（1）本文設(shè)計(jì)桑葉多糖的制備工藝流程見圖1：

（2）桑葉多糖測定。

精密量取1mL提取液，加入乙醇12mL，搖勻，室溫放置12h，取出，離心，傾去上清液，沉淀用2mL95%乙醇溶液洗滌1次，離心。用水將上述不溶物轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，水浴溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，稀釋十倍，此溶液為樣品測定液。

分別吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液（50mg/mL）置玻璃試管中，用蒸餾水補(bǔ)至1mL，再加入5%苯酚溶液0.5mL，混勻后迅速加入2.5mL濃硫酸，使用漩渦振蕩器使反應(yīng)液充分混合，然后將試管置于沸水浴中反應(yīng)15min，490nm測吸光度，以葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣品測定的吸光度值查找標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算多糖的量。

標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖2：

（3）桑葉多糖得率。

多糖提取液用濾布過濾，濾液濃縮到50mL后，經(jīng)14000r/min，離心10min，將上清定容到50mL，取5mL上清液凍干，計(jì)算得率，另取1mL上清液用苯酚硫酸法測提取液中的多糖含量。

得率公式：Y=/×100%

式中：為提出多糖沉淀總量（g）

為原料決明子樣品質(zhì)量（g）

2 結(jié)果與討論

2.1 不同方法對桑葉多糖收率的影響

稱量5.0000g40目的干桑葉顆粒，在溫度為85℃，提取時(shí)間為1h，固液比為1：40，提取次數(shù)為3次的條件下，分別在有超聲波和無超聲波實(shí)驗(yàn)得到桑葉多糖提取情況如下表1所示：

（1）超聲波輔助法與超聲波條件的選擇。稱量5.0000g40目的桑葉顆粒，固液比為1：40。作用時(shí)間為25min。在超聲波細(xì)胞破碎機(jī)的輔助下，本文實(shí)驗(yàn)桑葉多糖提取情況如下圖3所示：

超聲波功率的選擇實(shí)驗(yàn)：分別稱取4份約5.0000g40目的桑葉材料，1：40的比例加水，分別置于50W，100W，150W，200W的功率下超聲20min，然后按照上述的多糖檢測的方法進(jìn)行檢測，選擇總糖含量最高的功率。

由上圖可以看出，超聲波功率為50W的多糖含量是最大的。

（2）超聲時(shí)間的選擇實(shí)驗(yàn)。

在上述實(shí)驗(yàn)中選出最好的超聲功率，其他的條件不變，置于不同的超聲時(shí)間10min，15min，20min，25min，30min，40min，50min下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。得出如圖4所示：

從圖4可以看出，超聲波輔助時(shí)間在20-25min之間浸提效果最好。

2.2 超聲波法輔助提取桑葉多糖正交實(shí)驗(yàn)

在功率50w下，進(jìn)行水浸提。選用3個(gè)比較合理因素進(jìn)行正交試驗(yàn)的探究，分別是固液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)，對此進(jìn)行三個(gè)水平的探究，分別得到如表4、5所示：

從上表可以看出，工藝影響因素順序?yàn)椋篟A>RC>RB對桑葉多糖含量影響的排序是提取次數(shù)>提取時(shí)間>固液比。由上表可以看出最佳提取條件的組合是：因子A（提取次數(shù)），提取一次的提取率較提取二次的提取率低很多，而提取二次和提取三次的差別不大，結(jié)合因子的顯著差異性及生產(chǎn)成本的控制，選擇提取二次較為合理；對因子B（料水比），由于其不顯著，結(jié)合目前的工藝，不改變原配方的料水比，仍選取料水比為1：15；對因子C（提取時(shí)間），根據(jù)顯著差異最優(yōu)條件選擇，選取提取時(shí)間分為： 1.5-2h。

3 結(jié)論與展望

本文通過對桑葉多糖的提取方法對比，得出超聲波輔助浸提法收率最高，可以達(dá)到5.32%。同時(shí)對超聲波法輔助浸提工藝的3個(gè)因素3個(gè)水平的正交實(shí)驗(yàn)考察得知超聲波輔助浸提法法對桑葉多糖含量影響最大的因素為提取次數(shù)。在這3個(gè)因素中其影響程度的排序是提取次數(shù)>提取時(shí)間>固液比。而最佳提取條件的組合是固液比1：15，提取次數(shù)兩次，提取時(shí)間為 1.5-2.0h。在最佳條件下，桑葉多糖提取收率可以達(dá)到21.56%。

本文的研究成果對桑葉多糖提取研究和生產(chǎn)有一定的理論依據(jù)。與此同時(shí)，也希望在此基礎(chǔ)上可以進(jìn)一步研究桑葉多糖的結(jié)構(gòu)及其生物活性和多糖檢測方法的重現(xiàn)性。

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