【摘要】目的 探究臨床常規(guī)檢驗(yàn)中如何準(zhǔn)確檢測(cè)糞便隱血,為臨床治療提供可靠的診斷依據(jù)。方法:選取消化內(nèi)科收治的100例臨床住院患者,采用化學(xué)法和膠體金免疫法實(shí)施糞便隱血檢測(cè)。結(jié)果:化學(xué)法假陽(yáng)性率為15%,膠體金免疫法假陰性率為 11%。結(jié)論:飲食、藥物等因素會(huì)干擾化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果造成假陽(yáng)性;膠體金免疫法有靈敏度高、抗干擾能力強(qiáng)等特點(diǎn),但易受抗原濃度影響造成假陰性。因此,常規(guī)檢測(cè)中應(yīng)結(jié)合使用兩種方法,可提高臨床檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
【關(guān)鍵詞】隱血;檢測(cè);膠體金免疫法
【中圖分類號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801(2014)02-0116-02
隱血指腸道或消化道有潛在出血且肉眼觀察不到血色;紅細(xì)胞被分解,顯微鏡下也無(wú)法準(zhǔn)確判斷出血情況。糞便隱血檢驗(yàn)是臨床上檢測(cè)腸道潰瘍、消化道出血、惡性腫瘤的常用指標(biāo)之一[1]。過(guò)去臨床上普遍采用化學(xué)法檢測(cè)糞便隱血,但化學(xué)法易受藥物、飲食等因素干擾造成假陽(yáng)性結(jié)果。近年臨床上應(yīng)用膠體金免疫法可排除上述干擾,但實(shí)際發(fā)現(xiàn)膠體金免疫法假陰性結(jié)果易誤導(dǎo)臨床診療。本組研究對(duì)比分析兩種檢測(cè)法,為臨床提供準(zhǔn)確可靠的診斷依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 檢測(cè)試劑 化學(xué)法:3%過(guò)氧化氫溶液與鄰聯(lián)甲苯胺冰醋酸試劑;免疫法:膠體金免疫法糞便隱血檢測(cè)試劑盒,附帶一次性驗(yàn)便杯與取樣棒。以上兩種試劑均符合《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》配制標(biāo)準(zhǔn)[2]。
1.2 檢測(cè)標(biāo)本來(lái)源 選取2012年3月~6月收治的100例臨床住院患者所留新鮮糞便標(biāo)本,其中男性58例,女性52例,年齡40~72歲,平均61.2歲。
1.3 方法及結(jié)果判斷 化學(xué)法:用采樣棒從患者糞便6個(gè)不同部位取樣,涂在白色干凈的濾紙片上,順次滴加3%過(guò)氧化氫溶液與鄰聯(lián)甲苯胺冰醋酸試劑各1~2滴,呈現(xiàn)藍(lán)色則為陽(yáng)性。免疫法:預(yù)先將驗(yàn)便杯中放入0.5毫升蒸餾水,用采樣棒從患者糞便6個(gè)不同部位取樣并放入驗(yàn)便杯中攪拌均勻,取出單條膠體金試紙插入驗(yàn)便杯中,5min后觀察入出現(xiàn)兩條紅線即為陽(yáng)性[3]。
2 結(jié)果
2.1 本組研究中化學(xué)法陽(yáng)性而免疫法陰性的患者為26例,其中11例已確診為腸道或消化道出血,糞便性狀糞便為帶血便或柏油樣便,其他15例無(wú)腸道或消化道出血反應(yīng),考慮為藥物或食物引起的假陽(yáng)性,可見(jiàn)化學(xué)法的假陽(yáng)性率為15%;免疫法的假陰性為11%。
2.2 本組研究中化學(xué)法陰性而免疫法陽(yáng)性的患者為6例, 均已確診為腸道或消化道出血。但免疫法不受外界因素干擾,無(wú)假陽(yáng)性結(jié)果。考慮為患者糞便樣本中血紅蛋白含量低于化學(xué)法檢測(cè)下限所致,可見(jiàn)免疫法的檢測(cè)靈敏度高于化學(xué)法。
3 討論
臨床常規(guī)檢測(cè)一直沿用化學(xué)法,基本原理是血紅蛋白中含有鐵血紅素,能催化試劑中的過(guò)氧化氫釋放新生成的氧素氧化色源物質(zhì)顯色[4]。顯色的時(shí)間與深淺可大致判定血紅蛋白含量,可報(bào)告范圍是(±~++++),臨床上由此大致診斷患者出血量大小。但化學(xué)法檢測(cè)易受到諸多因素干擾,比如臨床檢測(cè)前3h食用肉類、動(dòng)物肝臟、維生素C、鐵劑或富含過(guò)氧化酶的蔬菜,瓜果都可能造成檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性。臨床檢測(cè)對(duì)此類情況無(wú)法控制,容易造成臨床誤診。此外,檢測(cè)中配制的冰醋酸在一定環(huán)境下容易形成冰晶,易對(duì)操作人員構(gòu)成不同程度傷害。
膠體金免疫法近些年憑借高靈敏性、高特異性等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于臨床檢測(cè)。膠體金免疫法不宜受到藥物、飲食等外在因素的感染,易早期檢測(cè)患者糞便樣本中的血紅蛋白,且試劑穩(wěn)定易于保存。此法基本原理是應(yīng)用單克隆或多克隆的雙抗體夾心膠體金顯色技術(shù)。膠體金試紙條纖維素膜上標(biāo)記為抗人血紅蛋白抗體,只能與人血紅蛋白特異性結(jié)合,而不與其他動(dòng)物血紅蛋白結(jié)合。因此,免疫法檢測(cè)糞便隱血時(shí)只與含有人的血紅蛋白結(jié)合反應(yīng)呈陽(yáng)性反應(yīng),特異性很高,不會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。本組研究顯示6例腸道或消化道出血患者免疫法檢測(cè)陽(yáng)性而化學(xué)法為陰性,可見(jiàn)化學(xué)法對(duì)微量濃度血紅蛋白下限無(wú)法檢測(cè)。證明膠體金免疫法相比化學(xué)法檢測(cè)靈敏度高。
膠體金免疫法中的檢測(cè)試紙條所含抗人血紅蛋白抗體含量有限,故此法受檢測(cè)線范圍限制。當(dāng)受檢糞便中的血紅蛋白含量低于試紙條中抗人血紅蛋白抗體濃度時(shí),形成的氧素氧化色源物質(zhì)減少,以致于出現(xiàn)假陰性結(jié)果,即后帶現(xiàn)象[5]。消化道出血患者漏出液所含血紅蛋白在消化道中停滯時(shí)間過(guò)長(zhǎng),受到蛋白質(zhì)和胃酸的共同作用,可能被充分水解或完全消化而失去抗原決定簇;同時(shí)腸道內(nèi)外特異性細(xì)菌的作用也可使血紅蛋白失活,導(dǎo)致假陰性結(jié)果。本組研究中11例確診的消化道出現(xiàn)患者免疫法檢測(cè)為陰性驗(yàn)證了上述兩種現(xiàn)象的可能性。免疫法檢測(cè)只能定性,不能定量檢測(cè);對(duì)檢測(cè)消化道出血患者的臨床療效觀察具有局限性;抗原抗體易受到溫度影響,當(dāng)氣溫偏低時(shí)糞便陰性樣本容易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果延后[6]。
綜上所述,本組研究中化學(xué)檢測(cè)法的陽(yáng)性檢測(cè)率較高,但易受到諸多因素干擾,造成臨床誤診;免疫法具體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn),但假陰性結(jié)果也易造成臨床誤診。因此,臨床檢測(cè)中建議兩種方法結(jié)合使用,對(duì)帶血便或柏油便而膠體檢測(cè)法為陰性的樣本可用化學(xué)法檢測(cè)補(bǔ)充。此外,消化道出血患者病情不斷演變,單次送檢糞便樣本不能全面反映腸道或消化道出血的真實(shí)情況,臨床上對(duì)疑有隱匿且消化道出血、腸道潰瘍的惡性腫瘤患者應(yīng)連續(xù)采集3次樣本做追蹤檢測(cè),以便獲取準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果為臨床診斷提供可靠的參考依據(jù)。
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