摘要：

目的： 探討異甘草酸鎂對大鼠缺血再灌注損傷的保護作用及機制。方法： 建立大鼠缺血再灌注損傷模型，將SD大鼠隨機分為缺血再灌注對照組（IR組，n=36），異甘草酸鎂治療組（T+RI組，n=36只）。T+RI組在門靜脈阻斷5min前應(yīng)用異甘草酸鎂（0. 2 mg /kg）預(yù)處理。2 組分別于術(shù)后第6、12、24 h各處死12只大鼠，經(jīng)下腔靜脈采血5 mL備用。采用酶聯(lián)免疫吸附的方法檢查血清TNF-α、IL-1β、IL-6等指標。結(jié)果： T+RI 組各個時間點血清的TNF- α、IL- 1β、IL- 6 水平均明顯低于IR 組，兩組間差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P <0.001）。結(jié)論：異甘草酸鎂能夠降低肝臟缺血再灌注損傷后血清中細胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6 水平， 減輕肝組織炎癥細胞浸潤，具有保護肝臟缺血再灌注損傷的作用。

關(guān)鍵詞：異甘草酸鎂；缺血再灌注損傷；大鼠

【中圖分類號】

R617 【文獻標識碼】A 【文章編號】1002-3763（2014）08-0022-02

肝臟缺血再灌注損傷（hepatic ischemia reperfusion injury，HIRI）是肝膽外科醫(yī)生在肝臟手術(shù)中最常遇到的問題，HIRI 可通過多細胞因子參與，導(dǎo)致多種炎癥因子釋放，造成組織器官損傷，使肝代謝解毒能力降低、微循環(huán)阻力升高，嚴重者可導(dǎo)致肝功能衰竭，直接影響到疾病的預(yù)后以及患者的存活率[1，2]。本研究通過建立大鼠肝缺血再灌注模型，在門脈阻斷前應(yīng)用異甘草酸鎂進行保護性預(yù)處理，探討其對大鼠缺血再灌注損傷的保護作用及機制，現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法

1.1 實驗動物及動物模型制備： 選用清潔級健康雄性Sprague-Dawley （SD）大鼠72只，重180～200 g，購自廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。大鼠缺血再灌注損傷模型建立：術(shù)前大鼠禁食6h，禁水4h。采用10%水合氯醛（ 3 ml /kg） 腹腔內(nèi)注射麻醉。取腹部正中切口逐層入腹，暴露并游離第一肝門，應(yīng)用無損傷血管夾夾閉第一肝門完全阻斷入肝血流， 30 min后恢復(fù)入肝血流， 檢查肝臟恢復(fù)血流灌注后，關(guān)閉腹腔。

1.2 分組： 72只SD大鼠隨機分為2 組：缺血再灌注對照組（IR組，n=36），異甘草酸鎂治療組（T+RI組，n=36只）。T+RI組于門脈阻斷前5min經(jīng)尾靜脈注入異甘草酸鎂（天晴甘美，正大天晴藥業(yè)股份有限公司）0. 2 mg /kg，IR組于相同時間點經(jīng)尾靜脈予同劑量的生理鹽水。

1.3 檢測指標： 2 組分別于術(shù)后第6、12、24 h各處死12只大鼠，經(jīng)下腔靜脈采血5 mL備用。采用酶聯(lián)免疫吸附的方法檢查血清TNF-α、IL-1β、IL-6等指標。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理： 應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS13.0 進行分析，計量資料以x±s 表示，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗， P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組間大鼠血清炎癥因子水平比較：

T+RI組各時間點血清TNF-α、IL-1β、IL-6 水平均低于同時間點IR 組水平，分別比較各時間點炎癥因子水平值，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P <0.001，詳見表1-3）；

3 討論

肝臟缺血再灌注損傷可分為二個階段：早期階段（再灌注后1～3小時）Kupffer細胞活化，釋放反應(yīng)性活性氧和炎性細胞因子如TNF-α、IL-6等；晚期階段（再灌注后6-24小時）由炎性細胞因子介導(dǎo)的中性粒細胞浸潤肝實質(zhì)引起損傷。在炎癥發(fā)生發(fā)展過程中，TNF-α起著始動作用，可刺激單核-巨噬細胞產(chǎn)生IL-1β、IL-6等細胞因子，使其相互作用形成縱橫交錯的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，釋放大量氧自由基，進一步損傷肝臟[3，4]。

異甘草酸鎂是從天然植物甘草中提取的單一的18-A異構(gòu)體甘草酸，經(jīng)過堿催化異構(gòu)化后成鹽精制而得。異甘草酸鎂是一種肝細胞保護劑，具有抗炎、保護肝細胞膜及改善肝功能的作用。本研究結(jié)果顯示，應(yīng)用異甘草酸鎂預(yù)處理后，在肝臟缺血再灌注后的各個時間點血清中的炎癥因子水平均低于IR組，說明異甘草酸鎂能夠明顯減輕肝缺血再灌注后的炎癥反應(yīng)，保護肝細胞和內(nèi)皮細胞，改善微循環(huán)，提高肝細胞損傷的修復(fù)能力。。異甘草酸鎂可以通過抑制炎癥關(guān)鍵因子磷脂酶A2的活性作用，有效地阻斷肝細胞炎癥病變機制，修復(fù)肝細胞損傷；并且異甘草酸鎂通過Mg2+的作用阻止細胞內(nèi)Ca2+濃度的增高，緩解細胞內(nèi)鈣超載，減少炎癥因子和自由基的產(chǎn)生，從而起到抗炎保肝的作用。

綜上所述，異甘草酸鎂能夠降低HIRI后血清中細胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平，減輕肝組織炎癥細胞浸潤，具有保護肝臟缺血再灌注損傷的作用。

參考文獻

[1]Fahrner R， Trochsler M， Corazza N， et al. Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand on NK cells protects from hepatic ischemia-reperfusion injury. Transplantation. 2014. 97（11）： 1102-9.

[2]Papadopoulos D， Siempis T， Theodorakou E， Tsoulfas G. Hepatic ischemia and reperfusion injury and trauma： current concepts. Arch Trauma Res. 2013. 2（2）： 63-70.

[3]Mendes-Braz M， Elias-Miro M， Jimenez-Castro MB， Casillas-Ramirez A， Ramalho FS， Peralta C. The current state of knowledge of hepatic ischemia-reperfusion injury based on its study in experimental models. J Biomed Biotechnol. 2012. 2012： 298657.

[4]Jaeschke H， Woolbright BL. Current strategies to minimize hepatic ischemia-reperfusion injury by targeting reactive oxygen species. Transplant Rev （Orlando）. 2012. 26（2）： 103-14.