摘要:目的:探討胰腺炎患者中測(cè)定血清淀粉酶的活性及臨床意義。方法:對(duì)選取臨床上胰腺炎患者80例進(jìn)行血清淀粉酶活性的測(cè)定及分析其臨床意義的分析。結(jié)果:急性胰腺炎患者54例、慢性胰腺炎患者18例、胰腺癌患者8例。結(jié)論:胰腺癌早期、急性胰腺炎、慢性胰腺炎急性發(fā)作時(shí),血清淀粉酶會(huì)明顯升高。檢測(cè)血清淀粉酶的活性是診斷胰腺炎的重要指標(biāo)。
關(guān)鍵詞:測(cè)定血清淀粉酶的活性;磺-淀粉比色法;臨床意義【中圖分類號(hào)】R446.11【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-8602(2014)02-0192-01
淀粉酶(AMY或AMS)是能將多種糖化合物,其全稱是1,4-α-D-葡聚糖水解酶,一般作用于可溶性淀粉、直鏈淀粉、糖元等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷鍵的酶,在催化淀粉及糖原水解下,可生成葡萄糖、麥芽糖及含有α1,6-糖苷鍵支鏈的糊精。人體內(nèi)只含有的淀粉酶屬α-淀粉酶,又稱淀粉內(nèi)切酶。α-淀粉酶不僅作用于淀粉末端,還可作用于其內(nèi)部的1,4-糖苷鍵,對(duì)1,4-糖苷鍵連接的葡聚糖具有特異性。但是不能水解1,6-糖苷鍵連接的葡聚糖。淀粉酶主要來(lái)源于胰腺和唾液腺,分別稱為:p-AMY和s-AMY。此外肺、肝、甲狀腺、脂肪等組織也含有α-淀粉酶。其測(cè)定主要為碘-淀粉比色法。
1臨床資料
1.1一般資料: 本組收治臨床上患有胰腺炎病人80例,其中男性48例,女性32例,年齡24~72歲。
1.2方法:采用碘-淀粉比色法檢測(cè)。
1.2.1檢驗(yàn)原理: 血清中α-淀粉酶催化水解,生成葡萄糖、麥芽糖和糊精。在底物充分(已知濃度)的條件下,未被水解的淀粉與碘液結(jié)合成藍(lán)色化合物,其顏色的深淺與淀粉酶活性成反比。
1.2.2檢驗(yàn)試劑:①緩沖淀粉液(0.4g/L) R1:稱取9g氯化鈉, 22.6g無(wú)水磷酸氫二鈉和12.5g無(wú)水磷酸二氫鉀,溶于約500ml蒸餾水中,加熱至沸。R2:另:取一個(gè)小燒杯,精準(zhǔn)稱取0.4g可溶性淀粉,加入約10ml蒸餾水,混勻后,至溶液成糊狀。將R:2加入之前沸騰的溶液R1中,水洗燒杯一并倒入。冷至室溫后加入5ml 37%甲醛溶液,用蒸餾水稀釋至1000ml。該緩沖液pH為7.0±0.1,放置冰箱保存。②碘貯存液(0.1mol/L) 稱取1.7835g 碘酸鉀和22.5g碘化鉀溶于400ml蒸餾水中。緩慢加入4.5ml濃鹽酸,邊加邊攪拌,用蒸餾水稀釋至500ml,充分混勻后,貯存于棕色瓶?jī)?nèi)并塞緊,放置于冰箱保存。③碘應(yīng)用液(0.01mol/L) 取碘貯存液,用蒸餾水稀釋10倍,貯存于棕色瓶?jī)?nèi),冰箱保存可用1個(gè)月。
1.2.3檢驗(yàn)方法:①血清用生理鹽水做10倍稀釋;②取數(shù)支試管,標(biāo)記測(cè)定管和空白管分別加入緩沖淀粉液1ml, 37℃預(yù)溫5分鐘;③測(cè)定管加入稀釋血清0.2ml,混勻,將測(cè)定管和空白管置37℃水浴中7.5分鐘;④測(cè)定管和空白管分別加入碘應(yīng)用液1ml;⑤用蒸餾水調(diào)平,分別測(cè)定管加入6ml,空白管加入6.2ml,混勻;⑥用660nm波長(zhǎng),1cm光徑,用蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度。
2結(jié)果
參考值:血清正常值800~1800U/L。
3討論
α-淀粉酶廣泛分布于動(dòng)物(唾液、胰臟等)、植物(麥芽、山萮菜)及微生物。微生物的酶幾乎都是分泌性的。α-淀粉酶以Ca2 為必需因子并作為穩(wěn)定因子,既作用于直鏈淀粉,也作用于支鏈淀粉,無(wú)差別地切斷α-1,4-鏈。因此,其特征是引起底物溶液粘度的急劇下降和碘反應(yīng)的消失,最終產(chǎn)物在分解直鏈淀粉時(shí)以麥芽糖為主,此外,還有麥芽三糖及少量葡萄糖。另一方面在分解支鏈淀粉時(shí),除麥芽糖、葡萄糖外,還生成分支部分具有α-1,6-鍵的α-極限糊精。一般分解限度以葡萄糖為準(zhǔn)是35~50%,但是在細(xì)菌的淀粉酶中,也有呈現(xiàn)出高達(dá)70%分解限度的(最終游離出葡萄糖)。臨床意義:急性胰腺炎、胰腺外傷、胰腺管組塞等疾患時(shí),血清淀粉酶增加。特別常見于急性胰腺炎,從發(fā)病2小時(shí)開始血清淀粉酶活性迅速上升,12~24小時(shí)達(dá)最高峰,大多在參考范圍上線四倍以上,3~4天恢復(fù)正常。發(fā)病后多在上高的窗口期進(jìn)行檢查時(shí),90%以上急性胰腺炎患者可測(cè)出血清淀粉酶活性升高。若癥狀減輕可使酶釋放量減少,或因病情惡化胰腺受到實(shí)質(zhì)性破壞,淀粉酶含量可能正?;蚩赡芟陆抵琳V狄韵?。血清淀粉酶持續(xù)性輕度增加時(shí),必須考慮胰腺囊腫繼發(fā)感染向慢性胰腺炎過(guò)渡,若有明顯下降則預(yù)后不良。慢性胰腺炎淀粉酶升高不如急性胰腺炎淀粉酶升高顯著,多為一過(guò)性,日間變化大。因此須反復(fù)測(cè)定血清淀粉酶,連續(xù)檢查3天,從慢性胰腺炎發(fā)展成為胰腺萎縮、胰腺硬化時(shí),血清淀粉酶活性則呈現(xiàn)出低值。胰腺癌患者的血清淀粉酶活性,并不一定經(jīng)常出現(xiàn)異常,一般在早期時(shí)增高,到晚期則降低。一般認(rèn)為在急性胰腺炎血清中淀粉酶活性會(huì)比較顯著。
參考文獻(xiàn)
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