摘要：目的：探討蛋白尿的中尿蛋白定性檢查及定量檢測(cè)。方法：對(duì)30例蛋白尿患者的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)資料進(jìn)行分析。結(jié)果：腎小球性蛋白 22例，混合性蛋白尿4例，腎小管性蛋白尿1例，生理性蛋白尿3例。結(jié)論：尿蛋白定性試驗(yàn)反應(yīng)受尿液濃縮與稀釋的影響，尿液濃縮時(shí)，尿蛋白濃度增高，可使尿蛋白陽性1+變?yōu)?+，甚至3+～4+，尿液稀釋時(shí)，可使原來的強(qiáng)陽性變?yōu)槿蹶栃?，甚至是陰性?/p>

關(guān)鍵詞：蛋白尿；定性檢測(cè)；定量檢測(cè)【中圖分類號(hào)】R446.12【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1672-8602（2014）02-0188-01

蛋白尿是腎臟疾病最常見的癥狀之一。尿中蛋白質(zhì)極微，尿常規(guī)定性檢查呈陰性。尿蛋白檢測(cè)可用于初步判斷腎臟功能，尿蛋白定性試驗(yàn)為人群健康篩檢及疾病的初步提示，陽性者可進(jìn)一步做定量檢測(cè)，一般以24小時(shí)尿蛋白總量較為準(zhǔn)確。

1臨床資料

選取2012年1月～2012年12月腎臟疾病患者30例，均為我院住院患者。其中男性10例，女性20例。腎小球性蛋白 22例，混合性蛋白尿4例，腎小管性蛋白尿1例，生理性蛋白尿3例。

2檢測(cè)方法

2.1尿蛋白質(zhì)定性測(cè)定

2.1.1加熱乙酸法：取試管1支，加清晰尿液至試管的2/3處。用夾子夾在試管的下端，將試管上端1/3處斜置在酒精燈火焰上加熱，沸騰即止。輕輕直立試管，在黑色背景下觀察煮沸部分有無混濁。滴加5%乙酸溶液3～4滴，再煮沸，立即觀察結(jié)果。注意操作的先后順序及加入乙酸的量[1]。 加熱時(shí)勿使底部尿液受熱，以便上下對(duì)照并防止尿液濺出。當(dāng)尿液中電解質(zhì)含量少時(shí)可在尿液上部滴加飽和NaCl溶液1～2滴，混勻后再進(jìn)行操作。陳舊尿液、含有其他分泌物的尿液，均可導(dǎo)致假陽性。

2.1.2磺基水楊酸法：取小試管加尿液3～5ml。加200g/L磺基水楊酸乙醇溶液3～4滴，形成界面。待2～3min后觀察結(jié)果。結(jié)果判斷根據(jù)液面接觸處絮狀物沉淀的多少。本法較為敏感，對(duì)酮體、尿酸可形成假陽性，尿液中鹽分增多時(shí)可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)，但經(jīng)加熱混濁可消失。如尿呈堿性，應(yīng)先加5%醋酸使其酸化后再進(jìn)行檢驗(yàn)，否則會(huì)造成假陰性。

2.1.3干化學(xué)試帶法：將干化學(xué)試紙條完全浸入尿中3～5s。拿出試紙條放到容器邊緣，把干化學(xué)試紙條邊緣多余的尿液去掉。將干化學(xué)試紙條放到尿液自動(dòng)化分析儀上，按【start】鍵即開始檢測(cè)。

2.2尿蛋白質(zhì)定量檢測(cè)：蛋白質(zhì)分子中的肽鍵在堿性條件下，與Cu2+產(chǎn)生紫紅絡(luò)合反應(yīng)，與縮二脲在堿性溶液中與Cu2+的反應(yīng)相似，故稱為雙脲反應(yīng)。產(chǎn)生顏色的強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)的含量成正比，尿液與同樣處理的蛋白標(biāo)準(zhǔn)液比較，經(jīng)計(jì)算即可求出血清總蛋白含量。先將尿液做蛋白定性測(cè)定。如為陰性，則報(bào)告<120 mg/24h。如為陽性，則取大約0.5ml液放入儀器標(biāo)本杯中。在儀器上先定義標(biāo)本編號(hào)，然后給出標(biāo)本所放的盤號(hào)。按下【start】鍵即開始檢測(cè)。

3討論

尿蛋白定性檢查只是篩選檢查，是較常見的一種方法，尿液標(biāo)本最好是晨尿，晨尿最濃，且可排除體位性蛋白尿。但是由于尿蛋白量受多種因素的影響，故應(yīng)正確評(píng)估。首先確定是否為真性蛋白尿。尿蛋白定量檢查，最常用的為24小時(shí)尿蛋白定量，小于1g，腎小球疾病的機(jī)會(huì)較少，正常24小時(shí)尿蛋白包括白蛋白（小于35mg/24h）及其他血漿蛋白，如球蛋白、結(jié)合珠蛋白、β2微球蛋白以及由腎小管上皮細(xì)胞分泌的Tamm-Horsfall蛋白（小于50 mg/24h）等。正常尿蛋白排泄量有隨年齡、體力活動(dòng)和長時(shí)間站立而增加的傾向。尿蛋白定量主要用于腎臟疾病治療效果評(píng)價(jià)。應(yīng)同時(shí)作尿蛋白電泳、肌酐，評(píng)價(jià)尿蛋白來源和腎功能[2]。如用于病因?qū)W和腎單位狀態(tài)評(píng)價(jià)應(yīng)同時(shí)測(cè)定血清蛋白和蛋白電泳、免疫球蛋白和輕鏈定量、肌酐和肌酐清除率、抗核抗體（ANA）、抗DNA抗體、總補(bǔ)體溶血活性（CH50）和C3、C4補(bǔ)體。常見于功能性蛋白尿、體位性蛋白尿、腎盂腎炎、腎動(dòng)脈硬化、尿路梗阻、尿路腫瘤及結(jié)石等。定量在1～3g之間，常見于原發(fā)性或繼發(fā)性腎小球疾病。定量大于3g者多見于原發(fā)或繼發(fā)的腎病綜合征。

測(cè)定選擇性蛋白尿的方法有很多種，如尿蛋白電泳、選擇性蛋白尿的θ角測(cè)定法、選擇性蛋白尿指數(shù)、輸入分子量不同的右旋糖酐的腎清除率測(cè)定法以及高效液相色譜分析法等。當(dāng)腎小球疾病較輕，濾過膜\"漏洞\"較小時(shí)，尿中以中分子的白蛋白為主，而大分子蛋白含量很少，稱為選擇性蛋白尿；當(dāng)腎小球病變明顯，濾過膜\"漏洞\"較大時(shí)，尿中不僅有大量的白蛋白，而且有大量的大分子蛋白如球蛋白，則稱為非選擇性蛋白尿。因此，蛋白尿的選擇性可反映腎小球?yàn)V過膜的通透性，在某種程度上與腎小球病變的嚴(yán)重程度有關(guān)。同時(shí)也可預(yù)測(cè)治療反應(yīng)與預(yù)后，選擇性高的蛋白尿其療效好，預(yù)后較好。

尿蛋白圓盤電泳測(cè)定（亦稱十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳，SDS-PAGE盤狀電泳），是目前分析尿蛋白成分的一種較為理想的方法。其原理是丙烯酰胺與交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合成大分子凝膠，用凝膠作為支持物進(jìn)行電泳。電泳前可先使分離的尿蛋白與十二烷基硫酸鈉（SDS）反應(yīng)，形成帶負(fù)電荷的SDS-蛋白復(fù)合物，消除原尿蛋白分子中的電荷差異，使電泳時(shí)尿中各種蛋白質(zhì)成分均向正極移動(dòng)，由于尿蛋白各種成分的分子量不同，在通過聚丙烯酰胺的分子篩作用后，將尿中各種蛋白按分子量大小的順序彼此分離，分子量大者泳動(dòng)慢，分子量小者泳動(dòng)快。故只要與已知分子量的蛋白一起電泳，便可判斷患者蛋白尿組分的性質(zhì)與分子量的范圍。尿蛋白電泳后可分為5型：①正常類型：無特殊臨床意義[3]。②低分子蛋白尿：提示腎小管及間質(zhì)病變或溢出性蛋白尿。③中分子蛋白尿：主要反映腎小球病變，見于急慢性腎小球腎炎及腎病綜合征、妊娠高血壓、糖尿病腎病等。④高分子蛋白尿，其臨床意義與中分子蛋白尿相同。⑤混合性蛋白尿，提示病變累及腎小球、腎小管及腎間質(zhì)，見于各種腎炎晚期、慢性腎功能不全及急性腎衰竭等。

參考文獻(xiàn)

[1]姜儻.尿液蛋白與腎臟病.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2002，25（5）：312-313.

[2]潘祥坡，王煥新，張風(fēng)美.尿液高pH值致尿蛋白假陽性4例分析.山東醫(yī)藥，2001，41（2）：32.

[3]張秀明，李健齋，魏明竟，等.現(xiàn)代臨床生化檢驗(yàn)學(xué)[M]，北京：人民軍醫(yī)出版社，1998.