鄭瑞 張嘉 董志姍 李靈敏 郝艷春 馮艷 白春愛

[摘要]目的：觀察不同年齡階段，光暴露以及光保護(hù)皮膚中彈性纖維的變化，研究皮膚彈性纖維在紫外線作用下的改變。方法：收集30例不同年齡階段患者（年齡為9～78歲）正常皮膚標(biāo)本，觀察彈性纖維在醛品紅法染色后的結(jié)果。結(jié)果：在光暴露部位，中老年與青少年人相比，真皮層彈性纖維明顯增多、增粗，同時出現(xiàn)扭曲、排列紊亂的現(xiàn)象，真皮上層與表皮之間出現(xiàn)不染區(qū)；反之，在光保護(hù)部位，兩個年齡階段患者皮膚的彈性纖維均減少。結(jié)論：在紫外線的長時間作用下，皮膚彈性纖維會出現(xiàn)增多變性，其變化的特征及程度與日曬時間程度之間呈正相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]光老化；彈性纖維；格默里染色法

[中圖分類號]R758.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]1008-6455（2014）10-0818-03

The related study on alteration of elastic fibers during the process of cutaneous photoaging

ZHENG Rui1,ZHANG Jia1,DONG Zhi-shan1,LI Ling-min2,HAO Yan-chun1,FENG Yan1,

BAI Chun-ai1

（1.Department of Dermatology, The First Hospital, Shanxi Medical University,Taiyuan 030001, Shanxi,China;2.Department of Pathology,Shanxi Medical University）

Abstract:ObjectiveTo observe the changes of elastic fibers in the skin which in light exposure and photoprotection from different ages, and to investigate the influence of UV on elastic fibers of skin.MethodsCollect normal skin specimens from 30 patients of different ages (9～78y), observe the results of elastic fibers in the Gomori staining method.ResultsCompared with adolescent,elastic fibers of middle aged and aged skin expressed elastic fibers increased significantly,thickening, while distorted, disorganized and there is non-stained area between epidermis and dermis in the exposure skin, while in the unexposure skin,elastic fibers decreased.ConclusionElastic fibers will be proliferated and denatured in ultraviolet radiation, which is characteristic and positively correlated with the amount of sun exposure.

Key words:photoaging;elastic fibers;Gomori staining

皮膚光老化指的是在紫外線長期作用下，暴露部位皮膚出現(xiàn)結(jié)構(gòu)上的改變，如皮膚松弛、色素增多、皺紋加大加深、皮膚出現(xiàn)結(jié)節(jié)等，以及功能上的改變，如毛細(xì)血管擴(kuò)張、彈性減小等。免疫組化顯示彈性纖維變性，網(wǎng)狀真皮上層的結(jié)締組織呈現(xiàn)出淡藍(lán)色、均質(zhì)化的組織學(xué)特征的改變[1]，故稱作“日光性彈性纖維變性”。本研究采用的是Gomori醛品紅法，是Gomori在1950年提出的一種彈性纖維特殊染色法，有報(bào)道稱其是判定彈性纖維染色的簡單、有效的方法[2]。

1材料和方法

1.1 材料：獲知情同意書后，30例不同年齡階段患者（年齡為9～78歲）正常皮膚標(biāo)本，均來自于2013年5月至9月就診我院皮膚科和普外科門診的患者，光暴露皮膚標(biāo)本取自面部，光保護(hù)皮膚標(biāo)本取自大腿內(nèi)側(cè)、腋下、臀部。標(biāo)本均為正常皮膚組織，排除淀粉樣變、糖尿病和有脂褐素沉積的患者標(biāo)本。獲取正常標(biāo)本后迅速OCT包埋、液氮冷凍、-70℃冷藏備用，并制冰凍切片。彈性纖維染色盒購自廈門邁威生物技術(shù)有限公司。

1.2 方法

1.2.1彈性纖維染色：將組織切片脫臘、水洗，泡入70%酒精1min，再入醛品紅粉劑瓶中搖勻浸染10min，70%酒精分化至無余色脫下、彈力纖維清晰，再脫水，透明，封固、結(jié)果彈性纖維為紫色。

1.2.2彈性纖維變性程度分級：采用1969年Kligman[3]分級標(biāo)準(zhǔn)：即0級：無變化；l+：僅數(shù)量增加但無增粗；2+：中度增生，出現(xiàn)增粗、扭曲；3+：明顯的增粗、扭曲、增多并出現(xiàn)很多分叉；4+：大量增粗、扭曲、雜亂無序的纖維取代真皮層，同時沉積有深色不規(guī)則的彈力樣物質(zhì)。

2結(jié)果

青少年(<40歲)光保護(hù)部位的真皮彈性纖維表現(xiàn)為：上層較細(xì)，中下層較粗，排列基本與表皮平行。中老年人(≥40歲)光暴露部位的真皮彈性纖維表現(xiàn)為：上層增粗、扭曲、增多、分布無序，且與表皮間出現(xiàn)不染區(qū)（如圖1），光保護(hù)部位真皮彈性纖維表現(xiàn)：數(shù)量顯著減少，真皮中、上層彈性纖維輕度增粗及片段化（如圖2）。

3討論

皮膚中的彈性纖維決定著皮膚的彈性，隨著其數(shù)量與性質(zhì)的改變，皮膚的外觀也會發(fā)生改變。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著年齡的增加，彈性纖維的數(shù)量在光保護(hù)部位逐漸減少，在光暴露部位則顯著增多，而彈性纖維的形態(tài)卻出現(xiàn)增粗、扭曲、增多、排列紊亂等（見表1），這與國外以往的研究[4-5]結(jié)果相一致，被稱作“日光性彈性纖維變性”。真皮上層的結(jié)締組織經(jīng)蘇木精-伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining 簡稱HE染色) 顯示淡藍(lán)色，這種變化出現(xiàn)在光老化皮膚和一些由紫外線照射引起的皮膚惡性腫瘤以及癌前病變中，如皮膚黑色素瘤、日光性角化病[6-7]等。國外已有研究發(fā)現(xiàn)，在光暴露皮膚，青少年僅表現(xiàn)為彈性纖維輕度變性，而中老年則會在真皮內(nèi)出現(xiàn)較多非結(jié)晶物質(zhì)沉積；而在光保護(hù)部位則未發(fā)現(xiàn)有沉積[8]，亦可以說日光性彈性纖維變性是光老化皮膚的一個組織學(xué)特征。

本研究中一例來自一位48歲戶外工作者面部的標(biāo)本，被發(fā)現(xiàn)其彈性纖維的變性程度比老年人光暴露部位的更顯著。另一例來自一位60歲農(nóng)民的標(biāo)本，因其喜夏季赤裸上身，故胸部出現(xiàn)了明顯的彈性纖維變性。可以推測，日光性彈性纖維的變性程度與累積日曬量是緊密正相關(guān)的。

總之，皮膚彈性纖維隨著紫外線的長時間作用而出現(xiàn)數(shù)量上的增多，性狀上的改變，并且其改變的程度與日曬量之間呈正相關(guān)。在此種改變的發(fā)病機(jī)制中，非酶糖化反應(yīng)[9]以及氧化應(yīng)激[10]可能扮演有著一定的作用。

[參考文獻(xiàn)]

[1](美) R.B.奧多姆,W.D.詹姆斯,T.G.伯杰著,安德魯斯臨床皮膚病學(xué)[M],9版.北京:科學(xué)出版社,2004,28-29.

[2]鄧列華,劉賽君,胡云峰,等.強(qiáng)脈沖光照射對小鼠皮膚膠原纖維、彈性纖維及透明質(zhì)酸含量的影響[J].中華皮膚科雜志,2010,43(10):705-708.

[3]Kligman AM. Early destructive effect of sunlight on human skin[J]. Am Med Assx,1969,210(13): 2377-2380.

[4]Ogura Y,Kuwahara T,Akiyama M,et al. Dermal carbonyl modification is related to the yellowish color change of photo-aged Japanese facial skin[J].J Dermatol Sci,2011,64(1):45-52.

[5]石鈺,王利,王曦.老化皮膚的膠原與彈性組織變化研究[J].中國美容醫(yī)學(xué),2007,16(6):727-730.

[6]Hughes MC,Bredoux C,Salas F,et al.Comparison of histological measures of skin photoaging [J].Dermatology,2011,223(2):140-151.

[7]Miligi L,Benvenuti A,Legittimo P,et al. Solar ultraviolet radiation risk in outdoor workers: a specific project of Tuscany Region (Italy) [J]. Epidemiol Prev,2013,37(1):51-59.

[8]Manne SL,Coups EJ,Jacobsen PB,et al. Sun protection and sunbathing practices among at-risk family members of patients with melanoma[J].BMC Public Health,2011,11:122.

[9]Lozins'ka LM,Semchyshyn HM.Biological aspects of non-enzymatic glycosylation[J].Ukr Biokhim Zh,2012,84(5):16-37.

[10]Lee SJ,Cho SW,Kwon YY,et al. Inhibitory effects of ethanol extracts from nuruk on oxidative stress, melanogenesis, and photo-aging[J].Mycobiology,2012,40(2):117-123.

[收稿日期]2014-03-16[修回日期]2014-04-24

編輯/張惠娟