哈斯巴根 達(dá)林太

【摘 要】 目的 建立石榴四味散中胡椒堿的含量測定方法。方法 采用反相高效液相色譜法，色譜主為C18柱，以甲醇—水（70：30）流動相，流速：1.0 ml/min，檢測波長為343nm。結(jié)果 胡椒堿在0.08947-0.8947μg 區(qū)間內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=0.9999，平均回收101.6%，RSD為1.6%（n=9）結(jié)論 實(shí)驗所用方法專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、精密度高，能準(zhǔn)確地對胡椒堿進(jìn)行含量測定。

【關(guān)鍵詞】 石榴四味散；高效液相色譜法；胡椒堿；含量測定

【中圖分類號】 R965 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A

1 儀器與試藥

1.1 儀器島津 SPD-20A型高效液相色譜儀，島津ΜV-2550型紫外分光光度儀，Mettler Toledo XS205型十萬分之一天平，Mettler Toledo XP6型百萬分之一天平。

1.2 試劑與試藥胡椒堿對照品，色譜甲醇，高純水，分析純。

2 方法學(xué)檢察

2.1 檢驗條件

2.1.1 色譜柱 ODS-SP C-18柱。

2.1.2 流動相 甲醇-水（70：30）流動相。

2.1.3 柱溫 應(yīng)控制在30℃

2.1.4 波長 2010年版《中國藥典》一部，測定“蓽撥”含量檢測項下，選擇343nm為波長度檢測。

2.1.5 理論板數(shù) 依據(jù)多批樣品的檢測數(shù)據(jù)證明，胡椒堿理論板數(shù)的分離效果在1500以上能達(dá)到較好，所以定為不小于1500。

2.2 效率檢察

2.2.1 溶劑確定 溶劑確定為乙醇（無水）。

2.2.2 效率檢察 溶劑為乙醇（無水），超聲處理半小時。

2.3 專屬性 制備對照品：精密稱定胡椒堿對照品，置褐色量瓶，加乙醇（無水），制作成15μg/1m的溶液。制備供試品：精密稱取樣品粉末800mg，置100ml褐色量瓶內(nèi)，加乙醇（無水）80ml，超聲處理半小時，放冷，乙醇（無水）加到刻度，搖勻，過濾，量取續(xù)濾液。陰性試驗 ：陰性對照供試品以缺蓽茇，同一個工藝制備出，按照處方比例稱取，制得陰性對照溶液。上述條件下，分別對三種溶液各精密吸取10μl，逐次注入液相色譜儀中，測得結(jié)果：三種色譜圖相對應(yīng)的保留時間處無出現(xiàn)色譜峰，這充分證明其他組分對胡椒堿的測定沒有干擾。

2.4 檢察線性關(guān)系 胡椒堿對照品（0.17894mg/ml），精密量取0.5、1、2、3、4、5ul進(jìn)樣，按照上述條件下檢測，以進(jìn)樣量對峰面積進(jìn)行回歸分析，結(jié)果為胡椒堿在0.01790-0.53683μg區(qū)間內(nèi)具有良好的線性聯(lián)系。

2.5 穩(wěn)定試驗 溶液穩(wěn)定試驗：取同一份溶液，在0、4、8、12、24h進(jìn)行測定，結(jié)果詳見表1。由表1數(shù)據(jù)證明，在24小時內(nèi)胡椒堿的峰面積積分值基本穩(wěn)定無大的變動。

2.6 精密度測定 重復(fù)性試驗取模擬樣6份，精密稱定約400mg，按上述供試品溶液的制備方法操作測定。得出結(jié)果見表2。

2.7 準(zhǔn)確限度 添加樣品試驗：取樣品（含量2.028mg/g）6份，各取約400mg，精稱，置100ml 褐色量瓶，精密加入用乙醇（無水）配制的胡椒堿對照品溶液（濃度為0.17895mg/ml）2、4、6ml，再精密加入乙醇（無水）80ml，分別按照含量測定方法進(jìn)行操作，測定每份樣品含量值，計算其回收率。三批樣含量測定，取本品按上述方法處理并測定與模擬樣的測定結(jié)果：見表3

3 檢測限的確定

理論折算，本批次模擬樣應(yīng)含胡椒堿2.658mg/g，轉(zhuǎn)移率=2.061/2.658×100%=77.5%。按照2010年版《中國藥典》一部，蓽茇檢驗項下規(guī)定：胡椒堿的量不得小于2.5%。含量低限=50/500×2.5%×77.5%×1000=1.938mg/g。所以暫時規(guī)定本品含蓽茇/1g以胡椒堿（C17H19NO3）計算，不得小于1.5mg。

試驗證明：該方法操作簡便，測定結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，回收率高，對控制石榴四味散內(nèi)在質(zhì)量具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

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