摘要[目的]評價中藥處方犬糧的安全性及其對犬創(chuàng)傷恢復能力的影響。[方法]選取1齡中華田園犬8只，隨機分為試驗組和對照組，每組4只、雌雄各半。預試1周后，對照組飼喂普通犬糧、試驗組飼喂中藥處方犬糧4周，于試驗開始前和結束后測定體重并采血，分析體重和血液指標的變化。對試驗犬進行腹壁切開術，觀察各組犬創(chuàng)口愈合情況。[結果]中藥處方犬糧能極顯著提高犬體重和增加犬血液中紅細胞、白細胞、中性粒細胞、淋巴細胞數目（P<0.01），顯著增加血紅蛋白和單核細胞數目（P<0.05）。試驗前后，試驗組犬堿性磷酸酶含量顯著增加（P<0.01），其他血液生化指標變化不顯著（P>0.05）。剖腹傷口愈合時間試驗組顯著短于對照組（P<0.05）。[結論]該處方犬糧可安全用于寵物臨床，對創(chuàng)口愈合具有一定的促進作用。

關鍵詞中藥處方犬糧；安全性；創(chuàng)傷恢復能力；犬

中圖分類號S853.9文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）21-07095-04

Safety Evaluation of Traditional Chinese Medicine Prescription Dog Food and Its Effect on the Trauma Recovery Ability of Dogs

LI Zhanzhan， DENG Yifeng et al（College of Veterinary Medicine， Nanjing Agricultural University， Nanjing， Jiangsu 210095）

Abstract[Objective] To evaluate the safety of traditional Chinese medicine prescription for dogs and effects on trauma recovery ability. [Method] 8 1years old Chinese rural dog were selected and randomly divided into test group and control group， 4 dogs in each group. The control group was fed with normal dog food， test group was fed with traditional Chinese medicine preparation for dogs for 4 weeks. The change of weight and blood was analyzed. Then trauma recovery ability was recorded. [Result] Traditional Chinese medicine prescription for dogs can significantly（P<0.01） improve weight， erythrocyte， leukocyte， neutrophil， lymphocyte number in blood， obviously increase（P<0.05） hemoglobin， mononuclear cell number. After test， the content of alkaline phosphatase is significantly improved（P<0.01）， the variation of other blood biochemical index is not significant（P>0.05）. Trauma recovery time of test group is significantly shorter than control group（P<005）. [Conclusion] The dog food can be used in pet clinic， which has a promoting effect on wound healing.

Key wordsTraditional Chinese medicine prescription for dogs； Safety； Trauma recovery ability； Dog

19近年來，寵物犬的飼養(yǎng)數量與日俱增，各類寵物食品應運而生，其中各類處方食品在寵物疾病的預防、治療和恢復中發(fā)揮著巨大的作用。目前，寵物臨床上有多種處方食品，如尿石癥處方食品可有效預防尿石癥的發(fā)生并促進尿結石的排出；消化道處方食品可減輕消化道疾病的癥狀，促進機體的恢復；肝臟處方食品可減輕肝臟負擔，配合臨床治療可促進疾病的恢復等。鑒于寵物術（大?。┖髾C體食欲不振、氣血兩虧、抵抗力低下的體況，南京農業(yè)大學動物醫(yī)學院外科教研組研制出一種可以促進寵物盡快恢復的處方食品。該處方食品針對患犬體況，通過選用易消化的原料和添加中藥活性物質，以提高患犬食欲、促進消化機能、增強機體免疫力，加速患犬體質恢復。筆者探討了該處方食品對犬免疫力及病犬恢復效果的影響，旨在為其在市場上的推廣應用提供參考。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1試驗動物及其飼養(yǎng)。選用體格健壯、發(fā)育良好、體重相近的中華田園犬8只，隨機分為試驗組和對照組，每組4只，雌雄各半。試驗組飼喂中藥處方犬糧，對照組飼喂普通犬糧。每天8：00和16：00飼喂2次，飼料不限量，給食以吃飽且食槽無剩余料為原則；保證充足清潔飲水，犬舍清潔，通風良好。

1.1.2試驗飼料。試驗犬糧為中藥處方犬糧（蘇州珍妮寵物食品有限公司提供），含有當歸、黃芪、蒼術等中藥提取物及酵母提取物等成分；對照犬糧為市售“好滋味”牛肉味犬糧（上海諾瑞寵物食品有限公司產品）。

1.1.3主要試劑谷丙轉移酶（ALT）、谷草轉移酶（AST）、谷氨?；D移酶（GGT）、堿性磷酸酶（ALP）、血清尿素氮（UREA）、血清肌酐（CREA）等生化測定試劑，購自神舟英諾華公司；肝素鈉，由南京農業(yè)大學動物醫(yī)學院提供；舒眠寧，由南京農業(yè)大學動物醫(yī)學院外科教研組自制。

1.1.4主要儀器與設備。生化分析儀（神舟英諾華 D280）、血液分析儀（法國 HORIBA ABX60）、離心機（Anke TDL802B）。

1.2試驗方法

1.2.1試驗方案。試驗犬購買回來后，注射犬瘟熱、犬細小病毒二聯(lián)疫苗。先用普通市售犬糧預飼1周后開始試驗。試驗開始后，試驗組改喂試驗犬糧，對照組仍飼喂市售犬糧，每天記錄動物臨床表現，30 d后試驗結束，測定體重及相關血液指標。對所有試驗犬進行腹壁切開手術，術后不使用任何藥物，比較2組試驗犬的傷口愈合情況。

1.2.2血樣采集及處理。在試驗開始和結束前1 d，早晨空腹前肢頭靜脈采血5 ml，取0.5 ml血樣置于血常規(guī)檢測專用Eppendorf管內，與抗凝劑混勻后備用；將剩余血液3 000 r/min離心10 min，取血清分別裝于Eppendorf管中，-20 ℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3腹壁切開術。飼喂試驗結束后，1 d內為各組試驗犬施行剖腹術，試驗犬先肌注阿托品（0.4 mg/kg體重）和846（0.05 ml/kg體重）、10 min后靜脈推注舒眠寧（0.05 ml/kg體重），將犬麻醉后，腹底壁廣泛剪毛、消毒、隔離后行剖腹術。腹中線切開皮膚5 cm、分離皮下組織，提起腹壁、在腹中線上打開腹壁；徹底止血后進行縫合，7號線結節(jié)縫合腹膜和腹中線、4號線結節(jié)縫合皮下組織、7號線結節(jié)縫合皮膚。術后不使用抗生素，每天觀察傷口愈合情況。

1.2.4血液指標和生化指標的測定。將采集的動物血樣立即使用自動血球分析儀（HORIBA ABX60）進行血常規(guī)測定。將上述血清樣品解凍后，分別裝樣，使用血生化自動分析儀測定谷丙轉移酶（ALT）、谷草轉移酶（AST）、谷氨?；D移酶（GGT）、堿性磷酸酶（ALP）、血清尿素氮（UREA）、血清肌酐（CREA）等生化指標。

1.2.5平均日增重。分別于試驗開始和結束時測定各組犬體重，計算平均日增重。

1.2.6剖腹傷口愈合時間。觀察上皮爬行及閉合情況。傷口愈合標準：定義為創(chuàng)面完全上皮化所需的時間，而上皮化依靠肉眼觀察[1]。

1.3數據統(tǒng)計與分析所有數據使用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行自身配對t檢驗統(tǒng)計分析，結果均以平均值±標準差表示。

2結果與分析

2.1中藥處方犬糧對犬體重的影響由表1可知，試驗期間對照組犬平均體重增加0.09 kg，試驗前后差異不顯著（P>0.05）；試驗組犬的平均體重增加0.29 kg，試驗前后差異極顯著（P<0.01）。

2.4中藥處方犬糧對犬剖腹術后恢復時間的影響從圖1可以看出，試驗組犬手術創(chuàng)口愈合良好，平均在第7天已基本閉合完全；而第7天對照組犬術后創(chuàng)口尚有哆開，創(chuàng)緣有腫脹。試驗表明，對照組犬的術后傷口愈合所用時間為（10.50±0.87）d，顯著長于試驗組犬所用的恢復時間[（7.75±0.49）d]（P<0.05）。

42卷21期李占占等中藥處方犬糧的安全性評價及其對犬創(chuàng)傷恢復能力的影響3討論與結論

3.1中藥處方犬糧對犬體重的影響體重的變化能反映動物腸胃功能的狀況，食物的性狀和口味在一定程度上影響著動物的食欲和采食量。適口的食物與良好的消化機能在一

注：a.試驗組；b.對照組。

圖1犬第7天創(chuàng)口愈合情況定范圍內可以促進犬體重的提升。

蒼術為多年生草本植物，味辛、入脾、胃經，主要治療濕困脾胃、食欲不振、消化不良[2]。研究表明，蒼術能興奮胃平滑肌，促進胃蠕動，治療脾虛泄瀉和胃潰瘍，增加體重，蒼術的健脾胃作用一部分是由于蒼術口桉葉醇及茅蒼術醇能明顯抑制K、Ca及氨甲酰膽堿對回腸的收縮作用[3-4]。酵母提取物風味獨特，對犬具有較好的誘食性，其中的活性成分可以促進食物消化，提高機體抗病能力。該試驗中試驗組犬很快接受試驗犬糧，這與酵母提取物能改善食物風味有關；試驗結束后，試驗組犬體重極顯著增加（P<0.01），表明蒼術促進脾胃功能的作用，這與李偉等在大鼠試驗中的結果相一致。

3.2中藥處方犬糧對血液CBC的影響當歸味甘、辛，性溫，歸肝、心、脾經，具有補血活血、潤腸通便等功效[5]。該試驗中試驗組犬紅細胞數目和血紅蛋白含量均顯著性提高（P<0.05），可能與試驗犬糧中含有當歸成分有關。研究表明，當歸多糖能促進造血微環(huán)境中的巨噬細胞分泌紅細胞生成素（EPO）、粒-巨噬細胞集落刺激因子（GMCSF）等多種造血生長因子來促進血細胞的發(fā)生；能顯著增加內源性脾結節(jié)數并促進骨髓有核細胞DNA合成，從而刺激脾臟和骨髓造血功能[6-7]。

機體特異性免疫包括細胞免疫和體液免疫。正常生理情況下，動物血液中的T淋巴細胞數目以及由活化的B淋巴細胞產生的抗體水平是衡量機體細胞免疫和體液免疫功能的重要指標[8]。單核巨噬細胞系統(tǒng)細胞的數量和其吞噬能力能反映出動物機體非特異性免疫功能狀態(tài)。單俊杰[9]和楊鐵虹[10]等報道當歸多糖能通過誘導細胞因子L2和IFNγ，增強IFNγ活性，從而能顯著促進巨噬細胞、混合淋巴細胞的增殖反應。據報道，黃芪可明顯促進T細胞及nk B淋巴細胞的體外增殖，通過誘導ILα，IL1β及IL6m RNA的表達從而減輕氨甲蝶呤對巨噬細胞系增值的抑制作用、誘導臍血單核細胞定向分化為功能成熟的樹突狀細胞（DCs）來刺激同種異體T細胞增殖[11-13]。該試驗中試驗組犬的白細胞總數分類數目顯著升高（P<0.05），反映出當歸和黃芪活性成分的促相關白細胞增殖的作用，這與單俊杰等的研究結果相一致。當歸和黃芪共同促進了吞噬細胞和淋巴細胞的增殖，增強了犬的特異性免疫和非特異性免疫，提高了犬的抗感染能力，為創(chuàng)傷后的快速恢復奠定了基礎。

3.3中藥處方犬糧對犬血液生理生化指標的影響血清中ALP的活性反映動物的生長速度和生產性能。該試驗中飼喂中藥處方犬糧后試驗組犬ALP含量極顯著升高，而同時體重也極顯著高于試驗前（P<0.01），這與朱年華等在豬的試驗結果相一致。

血清中AST、ALT和GGT的含量變化是反映肝臟功能狀態(tài)的重要指標[14-16]。筆者通過對犬血清中AST、ALT和GGT含量的測定來評價試驗犬糧對肝功能的影響，結果表明AST、ALT、GGT含量均在正常范圍內。據報道，蒼術酮能抑制叔丁基過氧化物誘導的DNA損傷及大鼠肝細胞毒性，具有保肝作用[17-18]，這與該研究結果相一致。

腎臟是動物排泄體內代謝產物的主要器官。臨床上常用血清UREA和CREA的含量作為檢驗腎臟功能的指標[19]。該試驗結果表明試驗組犬UREA和CREA的含量均在正常范圍內。研究表明，黃芪成分可通過提高腎組織NO含量及NOS活性，提高SOD活性，清除氧自由基來減少過量氧自由基對腎組織的損害，同時可終止鏈式的脂質過氧化反應，保護血管內皮細胞結構和功能的完整性，達到改善腎臟血管內皮功能的作用，從而保護腎臟[20]。這與該試驗中試驗組犬腎功能正常的結果相一致。

3.4中藥處方犬糧對犬剖腹術后傷口恢復的影響 創(chuàng)傷愈合主要是以成纖維細胞增殖、遷移、肉芽組織形成、膠原分泌、創(chuàng)口膠原化瘢痕形成及改建為特點的過程。炎癥反應是創(chuàng)面愈合的基礎，創(chuàng)傷后48 h內白細胞可發(fā)揮吞噬作用、氧自由基抗菌效應和補體激活作用，同時組織中的單核細胞活化變成的巨噬細胞活化后能釋放 TGF-β、PDGF 以吸引平滑肌細胞和成纖維細胞來到傷口與白細胞一起清除壞死組織和異物，保護正常組織、防止感染。成纖維細胞是傷口愈合的重要修復細胞之一，其增殖速度通常與傷口愈合速度密切相關。

黃芪味甘微溫，入脾、肺經，具有補氣而托毒生肌、利水消腫、益衛(wèi)固表等功效，被譽為“瘡家圣藥”[2]。據報道，黃芪多糖能夠直接調節(jié)創(chuàng)傷后淋巴細胞的增殖，增強成纖維細胞的增殖及遷移能力，促進血管內皮細胞游走與增殖[21-23]。王剛等[24]發(fā)現當歸多糖能促進血小板聚集[25]，能通過調節(jié)對角質形成細胞的TGFβ及ILlα的表達，影響真皮成纖維細胞Ⅲ型膠原的分泌，從而促進成纖維細胞增殖，促進皮膚創(chuàng)面愈合。

該試驗結果表明試驗組犬傷口愈合時間顯著短于對照組（P<0.05）。究其原因，可能是因為當歸成分促使機體聚集血小板、促進傷口凝血閉合，黃芪成分通過提高患犬白細胞數目增強局部炎癥反應，促進炎性細胞清創(chuàng)和肉芽的新生，同時與當歸活性成分協(xié)同刺激成纖維細胞增殖，促進膠原分泌、創(chuàng)口膠原化，但其具體機制有待進一步研究。

筆者首次以直接飼喂中藥處方日糧方式代替以前用飼料添加劑拌料飼喂方式，研究了中藥活性成分對犬創(chuàng)傷后恢復能力的影響。結果表明，該中藥處方犬糧具有較好的適口性，能很好地被犬接受并適應，能夠改善犬的腸胃消化功能，從而促進犬的生長，增強犬的體質；犬食用該處方犬糧后不會影響肝腎等臟器功能，同時能夠在正常范圍內顯著提高犬白細胞數目，增強特異性免疫和非特異性免疫；該處方犬糧補血、補氣，可促進患病（手術）后犬機體的恢復。另外，犬體質的增強和患病后恢復能力的提高也說明該犬糧提高了犬的身體抵抗力，再次證明該犬糧有提高犬體質抵抗力的作用。此外，關于該中藥處方犬糧是否能促進幼犬的發(fā)育等，有待進一步探究。

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