彭金年 程庚金生 張付遠(yuǎn) 李丹丹

摘要 [目的]建立氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GCMS）分析炮制后安徽枳殼中揮發(fā)性成分的方法。[方法]采用頂空進(jìn)樣對(duì)樣品中揮發(fā)性成分進(jìn)行提取，運(yùn)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行分離鑒定，以峰面積歸一化法計(jì)算各揮發(fā)性組分的相對(duì)百分含量。[結(jié)果]從炮制后安徽枳殼中分離出26種揮發(fā)性成分，鑒定出25個(gè)化學(xué)成分，其中主要成分是檸檬烯，占總揮發(fā)性成分的86.50%。[結(jié)論]GCMS適用于枳殼中揮發(fā)性成分的分析，可作為枳殼飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)的方法和依據(jù)。

關(guān)鍵詞 GCMS;安徽枳殼;揮發(fā)性成分;定性分析

中圖分類號(hào) S567 ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A ?文章編號(hào) 0517-6611（2014）34-12071-02

Analysis of Volatile Components in Anhui Fructus Aurantii after Processing by GCMS

PENG Jinnian1，CHENG Gengjinsheng1， ZHANG Fuyuan2 et al

（1.College of Pharmacy， Gannan Medical University， Ganzhou， Jiangxi 341000;2.Jiangxi Environmental Engineering Vocational College， Ganzhou， Jiangxi 341000）

Abstract [Objective] The research aimed to establish a GCMS method of analyzing volatile components in Anhui Fructus aurantii after processing. [Method]The volatile components in Fructus aurantii obtained by headspace sampling were isolated and identified by GCMS. The relative percentage of each volatile component was determined by area normalization method.[Result]26 compounds were isolated and 25 compounds were identified in Anhui Fructus aurantii and one of the main components was limonene， which was 86.50 percent of the total volatile components.[Conclusion]GCMS was suitable for analysis of volatile components from Chinese medicine and this research provides certain scientific basis for the quality evaluation of Fructus aurantii pieces.

Key words GCMS; Fructus aurantii; Volatile components;Qualitative analysis

枳殼為蕓香科植物酸橙（Citrus aurantium L.）及其栽培變種的干燥未成熟的果實(shí)，具有理氣寬中、行滯消脹功效[1]。臨床上常用于胸脅氣滯、脹滿疼痛、食積不化、痰飲內(nèi)停、胃下垂、脫肛、子宮脫垂等癥[2]。枳殼的有效成分主要有生物堿類、黃酮類和揮發(fā)油類三大類[3]。揮發(fā)油成分是枳殼理氣、行滯、鎮(zhèn)咳、祛痰、抑菌等作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，主要為α檸檬烯，但因其有“燥性”，中醫(yī)傳統(tǒng)入藥需先炮制[4-8]。

目前全國(guó)市場(chǎng)商品藥材主流品種有江枳殼、湘枳殼和川枳殼，部分地區(qū)還應(yīng)用香圓枳殼、紅河枳殼和建枳殼（綠衣枳殼）等。來源不同、炮制方法不同，枳殼揮發(fā)性成分必有差異。枳殼所含揮發(fā)油成分較復(fù)雜，雖然目前有部分關(guān)于枳殼揮發(fā)油類成分的文獻(xiàn)報(bào)道，但對(duì)于不同產(chǎn)地及炮制前后揮發(fā)性成分的異同及變化的系統(tǒng)研究報(bào)道較少，且報(bào)道的文獻(xiàn)大部分采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油。筆者以炮制后安徽枳殼為分析材料，采用頂空進(jìn)樣技術(shù)萃取，GCMS分析其中的揮發(fā)性成分，為枳殼炮制品的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

枳殼購(gòu)于江西樟樹中藥材市場(chǎng)，原產(chǎn)地為安徽，經(jīng)贛南醫(yī)學(xué)院中藥學(xué)教研室教師鑒定為正品。

1.2 試驗(yàn)儀器和試劑

GCMS QP2010 plus 氣相色譜質(zhì)譜儀（日本島津公司），DK8001A自動(dòng)頂空進(jìn)樣器，SGK2LB低噪音空氣泵。

1.3 試驗(yàn)方法

枳殼去除雜質(zhì)，適當(dāng)粉碎，裝入20 ml頂空進(jìn)樣瓶中，用密封鉗封口，設(shè)置頂空儀器及GCMS儀器參數(shù)，啟動(dòng)儀器，分析樣品，解析質(zhì)譜圖。

1.4 試驗(yàn)條件

1.4.1 頂空條件。

頂空溫度80 ℃，平衡時(shí)間20 min，進(jìn)樣間隔20 min，接口溫度150 ℃。

1.4.2 氣相色譜條件。

色譜柱為Rtx5MS，柱長(zhǎng)30 m;液膜厚度0.25 μm;內(nèi)徑0.25 mm;進(jìn)樣口溫度250 ℃;載氣為高純氦氣（99.999%），柱流量1.0 ml/min;分流比為10∶1，進(jìn)樣量1 μl; 程序升溫是柱溫60 ℃，保持3 min，以2 ℃/min升至80 ℃，再以5 ℃/min升至120 ℃，再以2 ℃/min升至160 ℃，最后以15 ℃/min升至250 ℃。

1.4.3 質(zhì)譜條件。

電離方式EI;電子能量70 eV，離子源溫度200 ℃;溶劑切除時(shí)間1.6 min;質(zhì)譜檢測(cè)時(shí)間48.5 min;全掃描采集模式;掃描范圍45～800 m/z。

2 結(jié)果與分析

在上述試驗(yàn)條件下，對(duì)炮制后安徽枳殼進(jìn)行GCMS分離分析，檢出26個(gè)峰（圖1），并以峰面積歸一化法計(jì)算出各揮發(fā)性組分的相對(duì)百分含

圖1 炮制后安徽枳殼GCMS總離子流圖

量（表1）。經(jīng)過質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)圖譜庫(kù)（FFNSC1.2揮發(fā)油標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫(kù)、NIST05化合物標(biāo)準(zhǔn)圖譜庫(kù)）檢索，共鑒定了其中25個(gè)化學(xué)成分（表1）。由表1可知，炮制后安徽枳殼中含有多種揮發(fā)性成分，其中相對(duì)百分含量最高的是檸檬烯，高達(dá)86.50%;其他相對(duì)百分含量較高的成分是檜烯（3.02%）、月桂烯（2.21%）、α蒎烯（1.69%）、1甲基4（1甲基乙基）1，4環(huán)己二烯（1.08%）等。

該試驗(yàn)檢出炮制后安徽枳殼中檸檬烯含量明顯高于頓文亮等研究的江西枳殼中檸檬烯含量（50%以上）[5-6]，而該試驗(yàn)檢出炮制后安徽枳殼中β蒎烯僅占0.37%，比頓文亮檢出的3.23%大大降低了[5]，另外還檢出了頓文亮[5]沒檢出的檜烯、月桂烯，表明枳殼中揮發(fā)性成分的種類和含量隨產(chǎn)地、炮制方法、提取方法及氣相分離方法的不同而有所不同。

表1 炮制后安徽枳殼GCMS分離鑒定的揮發(fā)性成分

峰組保留時(shí)間∥min峰面積比化學(xué)成分分子量化學(xué)式相似度∥%

12.1250.06基丁醛86C5H10O96

24.3170.26糠醛96C5H4O298

36.9490.32側(cè)柏烯136C10H1696

47.2181.69α蒎烯136C10H1697

58.5830.075甲基糠醛110C6H6O291

68.8393.02檜烯136C10H1697

78.9830.37β蒎烯136C10H1696

89.6192.21月桂烯136C10H1697

910.2770.203乙烯基2，2 二甲基1，4環(huán)己二烯134C10H1489

1010.8700.38α萜品烯136C10H1696

1111.2900.82甲基異丙基苯134C10H1491

1211.59386.50檸檬烯136C10H1695

1312.5820.09羅勒烯136C10H1492

1413.1511.081甲基4（1甲基乙基）1，4環(huán)己二烯136C10H1696

1514.7010.14萜品油烯136C10H1692

1615.3320.30芳樟醇154C10H18O89

1716.3240.104順式對(duì)薄荷2，8二烯1醇152C10H16O84

1817.0030.09順式-對(duì)-薄荷2，8二烯1醇152C10H16O85

1918.7430.643環(huán)己烯1醇154C10H18O91

2019.7000.112環(huán)己烯1醇194C12H18O280

2120.3890.48反式環(huán)己烯1醇152C10H16O91

2220.8230.11香芹醇152C10H16O90

2321.3230.24香芹酮150C10H14O95

2423.1020.55香芹酚150C10H14O95

2544.0330.17苯磺酰丁醇213C10H15NO2S91

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)以炮制后的安徽枳殼為分析樣品，采用頂空進(jìn)樣技術(shù)，通過GCMS分離分析其中的揮發(fā)性成分，試驗(yàn)過程中，通過優(yōu)化頂空條件和GC程序升溫條件，最終檢出26個(gè)峰，并鑒定出25個(gè)化學(xué)成分，其中相對(duì)百分含量最高的是檸檬烯，高達(dá)86.50%，其他相對(duì)百分含量較高的成分是檜烯（3.02%）、月桂烯（2.21%）、α蒎烯（1.69%）、1甲基4（1甲基乙基）1，4環(huán)己二烯（1.08%）等。

該試驗(yàn)測(cè)得的枳殼揮發(fā)性成分的種類和含量與頓文亮等的研究結(jié)果[5-6]存在較大差異，主要是因?yàn)樗幉漠a(chǎn)地、炮制方法、提取條件及GC升溫程序不一樣所導(dǎo)致的。頓文亮等主要以江西枳殼為研究對(duì)象，有炮制的，也有未炮制的，對(duì)揮發(fā)性成分的提取采用的是傳統(tǒng)的水蒸氣蒸餾法，水蒸氣蒸餾法溫度較高，容易使沸點(diǎn)較低的成分揮發(fā)損失，含氧極性化合物溶解于水中[5-6];而該試驗(yàn)以炮制后安徽枳殼為對(duì)象，運(yùn)用頂空進(jìn)樣技術(shù)對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行提取，對(duì)樣品的破壞較少，得到的大部分均是樣品的本身組分，且不受水基體對(duì)色譜的干擾，故測(cè)定的檸檬烯含量更高（86.50%）、β蒎烯含量更低（0.37%），還檢出了其他成分。

參考文獻(xiàn)

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