陽文武，肖 琦

（重慶市萬州區(qū)食品藥品檢驗所，重慶 萬州 404100）

鼻舒適片是由蒼耳子、野菊花、鵝不食草、白芷、防風、墨旱蓮、白芍等11味藥組方，收載于《國家藥品標準·中藥成方制劑（第7冊）》，具有清熱消炎、通竅的功效，用于治療慢性鼻炎引起的噴嚏、流涕、鼻塞、頭痛，過敏性鼻炎，慢性鼻竇炎。原標準收載有3個鑒別項，包括撲爾敏的薄層和2個化學鑒別，檢驗項目不夠全面，為更有效地控制其質(zhì)量，提高標準，筆者采用薄層色譜法對方中蒼耳子、野菊花、鵝不食草進行定性鑒別，并采用高效液相色譜法對方中白芷的歐前胡素進行含量測定。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

島津LC－20A型高效液相色譜儀；硅膠G薄層板（青島海洋化工廠）；聚酰胺膜（青島海洋化工廠）。歐前胡素對照品（批號為110826－201013，含量以99．6%計，供含量測定用）、蒙花苷對照品（批號為111528－200606）、蒼耳子對照藥材（批號為120947－200405）、野菊花對照藥材（批號為 120927－200310）、鵝不食草對照藥材（批號為121551－200902）均由中國藥品生物制品檢定所提供；鼻舒適片（廣東省博羅先鋒藥業(yè)集團有限公司，批號分別為 000045，000057，000069）；甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2．1 薄層色譜鑒別

蒼耳子[1－3]：取本品 12片，加甲醇 25 mL超聲處理 20 min，濾過，濾液濃縮至2 mL作為供試品溶液。另取蒼耳子對照藥材1 g及按處方比例除去蒼耳子的陰性樣品2 g，同法制成對照藥材溶液及陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種溶液各5～10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－冰醋酸－水 (4∶1∶5)上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，而陰性對照品溶液無干擾(圖1 A)。

野菊花[1，4]：取本品 15 片，加甲醇 25 mL，超聲處理 30 min，濾過，濾液濃縮至2 mL作為供試品溶液。另取野菊花對照藥材1 g及按處方比例除去野菊花的陰性樣品2 g，同法制成對照藥材溶液及陰性對照品溶液。再取蒙花苷對照品，加甲醇制成每1 mL含0．2 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典（一部）》附錄Ⅵ B]試驗，吸取上述4種溶液各2 μL，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯－丁酮－三氯甲烷－甲酸－水(15∶15∶6∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 2%三氯化鋁溶液，熱風吹干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液和對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，而陰性對照品溶液無干擾（圖1 B）。

鵝不食草[1，5－6]：取本品 15 片，加二氯甲烷 30 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取鵝不食草對照藥材1 g及按處方比例除去鵝不食草的陰性樣品2 g，同法制成對照藥材溶液及陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典（一部）》附錄Ⅵ B]試驗，吸取上述3種溶液各 5 μL，分別點于同一硅膠 G薄層板上，以石油醚（60～90 ℃ ）－ 二氯甲烷（3∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%的硫酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，而陰性對照品溶液無干擾（圖 1 C）。

2．2 含量測定[1]

2．2．1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

圖1 薄層色譜圖

色譜柱：迪馬 C18柱（250 mm ×4．6 mm，5 μm）；流動相：甲醇 －水（60 ∶40）；流速：1．0 mL ／min；檢查波長：300 nm。理論板數(shù)按歐前胡素峰計算應不低于3 000。

2．2．2 溶液制備

取本品 10片，除去包衣，研細，混勻，稱取約 0．5 g，精密稱定，置50 mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇 10 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（250 W，頻率 33 kHz）1 h，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。精密稱取歐前胡素對照品適量，加甲醇制成每1 mL含約20 μg的溶液，作為對照品溶液。按處方工藝制備不含白芷的樣品，同供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。

2．2．3 方法學考察

專屬性試驗：分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照品溶液各10 μL，依法進樣測定。結(jié)果陰性對照品溶液無干擾，見圖 2。

圖2 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：分別精密吸取質(zhì)量濃度為0．023 43 g／L的歐前胡素對照品溶液 1，5，10，15，20，25 μL，進樣，測定峰面積，以峰面積對進樣量進行回歸，得回歸方程 Y＝2×106X＋460，r＝0．999 7(n ＝6)。結(jié)果表明，歐前胡素進樣量在 0．023 43 ～0．585 75 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

精密度試驗：精密吸取對照品溶液，連續(xù)進樣6次，每次10 μL。結(jié)果的 RSD＝0．98%（n＝6），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗：取同一供試品溶液，每2 h進樣1次，連續(xù)進樣5次。結(jié)果峰面積的 RSD＝1．2%，表明供試品溶液中歐前胡素在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

重復性試驗：取同一批樣品6份，按樣品溶液制備方法操作，測定歐前胡素峰面積。結(jié)果的 RSD＝1．8%，表明方法重復性良好。

加樣回收試驗：精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入歐前胡素對照品適量，按2．2．2項下方法處理，依法測定，計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 歐前胡素加樣回收試驗結(jié)果(n＝6）

2．2．4 樣品含量測定

取本品3批，按含量測定方法進行測定，外標法計算。結(jié)果批號分別為000045，000057，000069的樣品中歐前胡素的含量分別為 0．086，0．085，0．082 mg ／片。

3 討論

提取溶劑選擇：分別用50%甲醇、70%甲醇作為提取溶劑，結(jié)果表明以甲醇為提取溶劑所測得含量最高。

提取方式考察：對超聲處理1 h及水浴回流1 h兩種提取方式進行考察，結(jié)果表明以超聲處理所測得含量較高。

超聲處理時間考察：分別用甲醇超聲30，60，75 min，結(jié)果表明超聲處理60 min所測得含量較高，且與超聲處理75 min所測得含量相當，故最終選擇以甲醇超聲60 min來制備供試品溶液。

檢測波長的選擇：取歐前胡素對照品溶液在200～400 nm波長之間進行紫外光譜掃描，測得其最大吸收波長為300 nm，故以300 nm為檢測波長。

參考文獻：

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