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        不同產地敗醬草中齊墩果酸、熊果酸含量測定

        2014-04-26 08:48:26周獻詞
        亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2014年12期
        關鍵詞:敗醬草齊墩果酸

        周獻詞

        (鎮(zhèn)江市句容黃梅社區(qū)衛(wèi)生服務中心, 江蘇 鎮(zhèn)江 212426)

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        不同產地敗醬草中齊墩果酸、熊果酸含量測定

        周獻詞

        (鎮(zhèn)江市句容黃梅社區(qū)衛(wèi)生服務中心, 江蘇 鎮(zhèn)江 212426)

        目的:建立采用反相高效液相色譜法(HPLC)測定不同產地敗醬草中齊墩果酸、熊果酸含量,為控制敗醬草的質量提供一定參考。方法:采用Hypersil ODS2 C18色譜柱,以乙腈-甲醇-0.5%醋酸銨溶液(67∶12∶21)為流動相,檢測波長為215nm,流速為1mL/min,柱溫為室溫。結果:敗醬草中齊墩果酸在0.052~10.4μg/L范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系(r=0.9992),平均回收率為99.4%,RSD為2.41%;熊果酸在0.048~9.6μg/L范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系(r=0.9994),平均回收率為99.2%,RSD為2.16%。結論:使用反相高效液相色譜法測定不同產地敗醬草中齊墩果酸、熊果酸的含量,具有簡便、快捷、重復性好等優(yōu)點,可用于不同產地敗醬草藥材中齊墩果酸、熊果酸的含量測定。

        敗醬草;齊墩果酸;熊果酸;高效液相色譜法

        敗醬草是多年生的草本植物,始載于《神農本草經》,味辛、苦,具有清熱解毒、祛瘀排膿等功效,在臨床應用較為廣泛,質量差異較大[1-2]。為控制藥材質量,提高臨床療效,本文采用反相高效液相色譜(HPLC)法對不同產地敗醬草中齊墩果酸、熊果酸的含量進行測定,為評價藥材質量、合理選用藥材提供參考。

        1 材料與儀器

        1.1 材料

        齊墩果酸對照品(中國藥品生物制品檢定研究院,批號:110709-201206);熊果酸對照品(中國藥品生物制品檢定研究院,批號:110742-201220);乙腈(山東禹王試液有限公司禹成化工廠,色譜純,批號:201209060);甲醇(上海振興化工一廠,色譜純,批號:201213104);敗醬草藥材自購,其余試劑均為分析純。

        1.2 儀器

        超聲波清洗器(上海必能信超聲有限公司);Agilent 1200高效液相色譜儀(Agilent 1200色譜泵,Agilent 1200自動進樣器紫外檢測器,Agilent 1200色譜工作站);AL104/01電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);TG16-WS臺式高速離心機(長沙湘儀離心機儀器有限公司)。

        2 方法與結果

        2.1 色譜條件

        色譜柱為Hypersil ODS2 C18色譜柱;齊墩果酸、熊果酸的色譜條件為:以乙腈-甲醇-0.5%醋酸銨溶液(67∶12∶21)為流動相,檢測波長為215nm,流速為1mL/min,柱溫為室溫。

        2.2 對照品溶液制備

        精密稱定齊墩果酸、熊果酸對照品適量,均置于10mL量瓶中,加流動相溶解并定容,即得混合對照品,其中齊墩果酸的濃度為10.6μg/L,熊果酸的濃度為10.2μg/L,備用。

        2.3 供試品溶液制備

        取敗醬草原藥材,烘干,打成細粉(過20目篩),取粉末1.0g,精密稱定,置于100mL具塞的錐形瓶中,加入甲醇30mL超聲(500W,40Hz)提取45min,放冷,補足減失的重量,靜置10min后濾過。精密量取續(xù)濾液1mL,置于10mL量瓶中,用甲醇適量定容,即得。

        2.4 方法學考察

        2.4.1 線性關系考察 精密吸取混合對照品溶液0.05、0.5、1、2、5mL置于10mL量瓶中,定容,吸取對照品溶液20μL,測定,以濃度(X)與峰面積(Y)作圖得標準曲線,經回歸得齊墩果酸曲線:Y1=1.8684X+6.3298,r=0.9993;熊果酸曲線:Y2=1.9231X+7.6523,r=0.9996。結果表明,齊墩果酸在0.053~10.6μg/L、熊果酸在0.051~10.2μg/L范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系。

        2.4.2 精密度實驗 取供試品溶液,在色譜條件下,連續(xù)進樣5次,每次進樣20μL,測定齊墩果酸、熊果酸的峰面積。結果顯示,齊墩果酸的RSD值為1.98%,熊果酸的RSD值為2.16%,表明該方法的精密度良好。

        2.4.3 穩(wěn)定性實驗 取供試品溶液,在色譜條件下,每隔2h精密吸取20μL注入高效液相色譜儀,連續(xù)進樣7次,測定峰面積。結果顯示:齊墩果酸的RSD值為1.14%,熊果酸的RSD值為1.52%,表明供試品溶液中齊墩果酸、熊果酸在12h內基本穩(wěn)定。

        2.4.4 重復性實驗 取同一批樣品,按照“2.3”項下方法平行制備5份供試品溶液,精密吸取20μL注入高效液相色譜儀,按照色譜條件測定齊墩果酸、熊果酸的峰面積,計算含量。結果顯示,齊墩果酸的RSD值為1.42%,熊果酸的RSD值為1.19%,表明采用該方法測定敗醬草中齊墩果酸、熊果酸的含量,重現(xiàn)性良好。

        2.4.5 加樣回收率實驗 精密稱取同一批已知含量的敗醬草藥材粉末(過20目篩)樣品6份,每份為0.2g,按比例加入齊墩果酸、熊果酸對照品,按照“2.3”項下方法制備溶液,溶液制備好之后,分別精密吸取20μL注入高效液相色譜儀,按照色譜條件測定齊墩果酸、熊果酸的峰面積,計算回收率。結果顯示:齊墩果酸的回收率為99.6%,RSD值為2.26%,熊果酸的回收率為99.1%,RSD值為2.11%,表明該方法的回收率符合含量測定基本要求。

        2.4.6 含量測定 按照“2.3”項下方法制備供試品溶液,按照色譜條件測定6個不同產地敗醬草樣品中齊墩果酸、熊果酸的峰面積,按照回歸方程,計算含量,結果見表1。

        表1 不同產地敗醬草中齊墩果酸、熊果酸的含量 (%)

        3 討論

        已有文獻報道[3],敗醬草中含有白花敗醬甙、莫羅忍冬甙、番木鱉甙等化學成分,具有鎮(zhèn)靜、保肝利膽、抗病原微生物、抗癌等作用,臨床主要與其它中藥材合理配伍,用于治療肺癰、腸癰、產后血、腹中刺痛等疾病。因市場對敗醬草需求的日益增大,原有的資源已不能滿足臨床需求,為解決藥材資源緊缺的狀況,人工種植敗醬草的規(guī)模逐步增大,但因各地的種源、氣候、管理等不同,導致不同產地敗醬草的質量差異比較大[4]。

        齊墩果酸、熊果酸屬三萜皂苷類化合物,其吸收位于紫外吸收的末端,故吸收波長采用215nm,同時對提取條件及流動相進行篩選,最終確定了含量測定條件[5]。通過對6個不同產地敗醬草的含量測定發(fā)現(xiàn),齊墩果酸、熊果酸的含量差異比較大,可能與各地的種源、氣候、管理等不同有關,故臨床應選用符合要求的敗醬草,以提高臨床治療效果。

        [1] 楊東輝,魏璐雪,蔡少青,等.黃花敗醬根及根莖化學成分的研究[J].中國中藥雜志,2000,25(1):39-41.

        [2] 馮京,王麗莉,張鐵軍.HPLC同時測定藏藥花錨中齊墩果酸和熊果酸含量[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(23):79-81.

        [3] 楊柳,姜海,王雪瑩,等.黃花敗醬草化學成分和藥理作用的研究進展[J].中醫(yī)藥信息,2012,29(4):169-172.

        [4] 張一芳,周淑琴,杜文煒.敗醬草藥材高效液相色譜指紋圖譜鑒別研究[J].中國藥業(yè),2011,20(12):25-26.

        [5] 毛紅梅,平欲暉,宗星星,等.HPLC同時測定敗醬草中常春藤皂苷元、齊墩果酸和熊果酸的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2012,18(15):89-92.

        (責任編輯:余 婷)

        2014-03-14

        周獻詞(1973-),男,江蘇省鎮(zhèn)江市句容黃梅社區(qū)衛(wèi)生服務中心主管中藥師,研究方向為中藥學。

        R284.2

        A

        1673-2197(2014)12-0032-01

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