郭愛玲，張淑蓉，王秀文，梁學(xué)偉，周 健

(山西中醫(yī)學(xué)院 中藥學(xué)院，山西 太原 030024)

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毛細(xì)管氣相色譜法測定山西產(chǎn)連翹中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

郭愛玲，張淑蓉*，王秀文，梁學(xué)偉，周 健

(山西中醫(yī)學(xué)院 中藥學(xué)院，山西 太原 030024)

目的：建立毛細(xì)管氣相色譜測定連翹中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法。方法：采用乙酸乙酯超聲提取樣品，活性炭小柱凈化，用毛細(xì)管氣相色譜法同時(shí)測定連翹中12 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量。結(jié)果：被測定的12種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r 為0. 999 0～0. 999 8，回收率為80.00%～96.76%，均符合要求；20批連翹樣品中均未檢測到農(nóng)藥殘留。結(jié)論：該方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可用于連翹中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量測定。檢測結(jié)果表明山西省野生連翹生長環(huán)境優(yōu)良，未受有機(jī)磷農(nóng)藥污染。

連翹；有機(jī)磷農(nóng)藥；毛細(xì)管氣相色譜法

有機(jī)磷農(nóng)藥是一類人工合成的磷酸酯類農(nóng)藥，其品種多、藥效高、藥害小、用途廣[1]。為提高我國中藥材的國際市場化程度，保證安全用藥，測定和控制中藥中的農(nóng)藥殘留量顯得十分重要。氣相色譜法是分析和測定各種農(nóng)藥殘留的重要方法之一[2-3]，目前已有學(xué)者采用氣相色譜法對有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[3-5]進(jìn)行了研究，但對中藥中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的研究很少，對連翹的有機(jī)磷殘留測定更未見報(bào)道。因此，本文采用毛細(xì)管氣相色譜法對野生連翹中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行測定，為連翹的質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

HP-6890氣相色譜儀(檢測器FPD)，KQ5200V型超聲波清洗機(jī)(昆山市超聲儀器有限公司) ，DB-1701彈性石英毛細(xì)管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海予華儀器設(shè)備有限公司)，Reacti-Therm Ⅲ氮?dú)獯祾邇x(廣州西譜實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司)，F(xiàn)A/JA1004型萬分之一電子天平(上海天平儀器廠)。

1.2 試劑

無水硫酸鈉、乙酸乙酯、正己烷均為農(nóng)殘級。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品敵敵畏、殺撲磷、乙酰甲胺磷、對硫磷、馬拉硫磷、甲基對硫磷、久效磷、樂果、甲胺磷、二嗪農(nóng)、乙硫磷和氧樂果(濃度均為1mg·mL-1)購于天津環(huán)境監(jiān)測總站。連翹藥材為山西太原、山西安澤、山西降縣、山西左權(quán)等地區(qū)采集(見表1)，由山西中醫(yī)學(xué)院副教授裴香萍鑒定為木犀科植物連翹Forsythiasuspensa(Thunb.) Vahl的干燥果實(shí)。

表1 樣品編號及來源

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

采用FPD檢測器，進(jìn)樣口溫度為220℃，檢測器溫度為300℃，載氣為高純氮?dú)?，采用分流進(jìn)樣；柱流量為1.00mL·min-1，分流比為10∶1，尾吹為60.0mL·min-1，進(jìn)樣量為1.0μL，采用外標(biāo)法定量。

2.2 對照品溶液制備

精密量取1mg·mL-1敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、二嗪農(nóng)、氧樂果、樂果、久效磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷、殺撲磷、乙硫磷對照品適量，分別用乙酸乙酯稀釋成濃度為0.1mg·mL-1的溶液。分別量取0.1mL該濃度12種標(biāo)準(zhǔn)溶液于10mL容量瓶中，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，即配制成1μg·mL-1混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.3 供試品溶液制備

取供試品粉末(過二號篩)約5g，精密稱定，置于100mL具塞錐形瓶中，加入5g無水硫酸鈉，50mL乙酸乙酯冰浴超聲提取2次，每次3min，濾過，合并濾液，濃縮至干，加乙酸乙酯再次溶解后轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中，量取1mL，上樣活性炭小柱(Supelclean ENVI-Carb SPE Tubes，120～400目，0.25g，3mL，用5mL乙酸乙酯預(yù)洗)，置于多功能真空樣品處理器上，用5mL正己烷-乙酸乙酯(1∶1)洗脫，置于氮吹儀上濃縮至干，加1mL乙酸乙酯溶解即得。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

分別精密量取上述12種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.01mL、0.05mL、0.1μL、0.2mL、0.5mL，置于10mL容量瓶中，用乙酸乙酯稀釋至刻度，即配制成0.1μg·mL-1、0.5μg·mL-1、1μg·mL-1、2μg·mL-1和5 μg·mL-1的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0μL進(jìn)樣測定，GC色譜見圖1。以濃度(μg·mL-1) 為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表2。

圖1 12種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液GC色譜

農(nóng)藥tR(min)回歸方程r線性范圍(μg·mL-1)敵敵畏2.583Y=9951X-6180.99960.1～5.0甲胺磷3.546Y=12286X-11910.99920.1～5.0乙酰甲胺磷6.500Y=8905X-15000.99900.1～5.0二嗪農(nóng)8.453Y=6445X-3220.99950.1～5.0氧樂果8.617Y=7090X-3750.99940.1～5.0樂果9.869Y=8390X-11550.99900.1～5.0久效磷10.098Y=8603X-5550.99910.1～5.0甲基對硫磷11.276Y=6818X-4290.99980.1～5.0馬拉硫磷11.557Y=5423X-2220.99930.1～5.0對硫磷12.191Y=7559X-3190.99940.1～5.0殺撲磷13.512Y=5140X-3290.99920.1～5.0乙硫磷14.848Y=9535X-4590.99970.1～5.0

2.5 精密度試驗(yàn)

分別精密吸取1μL 0.5μg·mL-1的12種混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定峰面積積分值，計(jì)算RSD，結(jié)果見表3。

表3 精密度試驗(yàn)結(jié)果 (%，n=6)

2.6 加樣回收試驗(yàn)

精密稱取山西太原青翹(6號樣品)5g，共6份，分別精密加入濃度為5μg·mL-1的12種混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.5mL，按照“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測定，計(jì)算回收率及RSD，結(jié)果見表4。

表4 加樣回收試驗(yàn)測定結(jié)果 (%，n=6)

2.7 樣品有機(jī)磷殘留測定

精密稱取20批樣品各5.0g，按照“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件測定。結(jié)果表明，20批連翹樣品中均未檢出12種有機(jī)磷農(nóng)藥，樣品色譜見圖2和圖3。

圖2 老翹樣品色譜

圖3 青翹樣品色譜

3 討論

本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，20批連翹藥材中均未檢測到有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，一方面由于有機(jī)磷農(nóng)藥中多含有酯鍵，性質(zhì)不穩(wěn)定，不易長期殘留[7-8]，另一方面可能是連翹本身不易吸收該類農(nóng)藥，或是因?yàn)?0批連翹均為野生，未被農(nóng)藥污染。本研究采用毛細(xì)管氣相色譜法同時(shí)測定了連翹中12種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，該法簡便、快速、準(zhǔn)確，可為連翹藥材的質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

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[2] 李欽,張保國.中藥中農(nóng)藥殘留及有害金屬檢測方法概述[J].開封醫(yī)專學(xué)報(bào),1997,16(1):42.

[3] 白艷玲,王麗玲.氣相色譜法快速測定蔬菜中六種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量[J].廣東衛(wèi)生防疫, 1999,25(1):9.

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[7] 張煒,王偉.幾種中成藥中有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留分析[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2002,18(1):56.

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(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2014-03-20

山西省科技攻關(guān)項(xiàng)目(2006031083-01)

郭愛玲(1976-)，女，碩士，山西中醫(yī)學(xué)院講師，研究方向?yàn)橹兴幓瘜W(xué)成分分析。

張淑蓉(1962-)，女，山西中醫(yī)學(xué)院教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幓钚猿煞址治黾八幮镔|(zhì)基礎(chǔ)。

R284.1

A

1673-2197(2014)10-0023-02