薛正楷，鄭文武，張宿義

(1.瀘州職業(yè)技術學院 生物與醫(yī)學工程研究所，四川 瀘州 646005；2.瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院 醫(yī)學實驗中心，四川 瀘州 646100；3.瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院 心內科，四川 瀘州 646100；4.瀘州老窖股份有限公司，四川 瀘州 646000)

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KPL-1保健酒制備及功能分析

薛正楷1,2，鄭文武3，張宿義4

(1.瀘州職業(yè)技術學院 生物與醫(yī)學工程研究所，四川 瀘州 646005；2.瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院 醫(yī)學實驗中心，四川 瀘州 646100；3.瀘州醫(yī)學院附屬醫(yī)院 心內科，四川 瀘州 646100；4.瀘州老窖股份有限公司，四川 瀘州 646000)

目的：根據(jù)中醫(yī)關于疲勞形成的五臟失調、精氣血耗損觀點，遵從中醫(yī)以疏肝解郁、養(yǎng)血安神、補益脾腎為主的調補療法原則，研制一款抗疲勞中藥保健酒。方法：選用人參、鹿茸、熟地、何首烏、淫羊藿、阿膠、枸杞等中藥配伍組方,并以白酒作為溶媒，采用現(xiàn)代提取工藝，制備抗疲勞保健酒KPL-1(抗疲勞1號)，并進行感官檢測、理化檢測和動物實驗。結果：經檢測，KPL-1的酒體感官特征及理化特征符合GB/T27588-201l和GB 2757-2012標準；動物生長分析顯示實驗組體重顯著低于空白對照組和陰性對照組(P<0.01)，但體長實驗結果比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；力竭實驗顯示，實驗組游泳時間顯著高于對照組(P<0.01)。結論：研究表明KLP-1保健酒具有較強的抗疲勞和減肥作用。

調補療法；保健酒；功能分析

保健酒在生產管理規(guī)范中屬于露酒，根據(jù)GB/T27588-2011對露酒的定義，保健酒是指以蒸餾酒、發(fā)酵酒或食用酒精為酒基,加入可食用、藥食兩用(符合相關規(guī)定)的輔料或食品添加劑，進行調配、混合及再加工制成的飲料酒[1]。保健酒已改變原酒基風格，其功效較為廣泛，具有抗氧化、抗疲勞、降血壓、增強免疫、壯陽提性等功效，深為歷代醫(yī)家推崇[2-5]。根據(jù)現(xiàn)代西方醫(yī)學的疲勞形成理論及中醫(yī)的五臟失調、精氣血耗損觀點，遵從中醫(yī)以疏肝解郁、養(yǎng)血安神、補益脾腎為主的調補立法原則，本研究選用人參、鹿茸、熟地、何首烏、淫羊藿、阿膠、枸杞等中藥配伍組方，并以白酒作為溶媒，采用現(xiàn)代工藝，以期開發(fā)出一款具有抗疲勞功能的新型保健酒。

1 實驗部分

1.1 材料與試劑

1.1.1 藥材及基酒 人參、馬鹿茸、阿膠、制何首烏、枸杞子、甘草、淫羊霍、金銀花、熟地、蜂蜜，均購自瀘州圣杰大藥房；食用酒精(95.6%(V/V)，20℃)，購自四川北方綠園生物科技有限公司。

1.1.2 試劑 陽性對照38度參茸酒，購自四川瀘州福源酒行；硅藻土，購自沈陽伊萊普克斯貿易有限公司。

1.1.3 動物 昆明小鼠，SPF級，體重18～22g，由瀘州醫(yī)學院實驗動物中心提供，動物許可證號SYXK-(川)2013-065。

1.1.4 器具 藥篩(成都企航儀器有限公司)；分光光度計(UV-1100，上海美普達)；恒溫水浴鍋(浙江金壇市晨陽電子儀表廠)；臺式離心機(四川蜀科儀器有限公司)；渦旋混勻器(浙江金壇市白塔新寶儀器廠)；微量移液器(大龍興創(chuàng)實驗儀器(北京)有限公司)；中藥粉碎機(濟南億健醫(yī)療設備有限公司)；微孔濾膜(0.45μm)。

1.2 方法

參考閆永亮等實驗方法[3-5]，見圖1。

圖1 KPL-1保健酒制備工藝

操作要點：原料處理：去除原料的霉變、蟲蛀成分，用溫水漂洗兩次至干凈為止，60℃烘烤5h，取出攤涼；阿膠、制何首烏、枸杞子、甘草、淫羊霍、金銀花采用中藥粉粹機粉粹處理，熟地采用串料方法粉碎，鹿茸、人參研磨成細粉，所有粉碎藥物過40目篩備用[5]。浸提：按質量比1∶10，粉粹藥物加入65%(V/V)食用酒精，室溫下浸提，每24h攪拌1次，28天過濾得藥渣和浸提液；按質量比1∶5，藥渣于80℃熱水浴浸提5h，過濾，并將兩次浸提藥液混合。澄清：濾液加入0.5%硅藻土，攪拌，除去濾液中懸浮顆粒及無效大分子物質。調配：澄清液用蒸餾水將酒精含量降至38%(V/V)，加入冰糖調味，調配結束酒液于-15℃靜置24h。精濾：靜置液采用0.45μm濾膜精濾，精濾液進行理化、感官、衛(wèi)生檢測，合格液經0.0001%臭氧滅菌進行罐裝，即得成品。

1.3 成品酒標準檢測

KPL-1保健酒的感官、理化和衛(wèi)生檢測，均按露酒國家標準GB/T27588-201l和GB 2757-2012執(zhí)行，理化檢測由中國酒類及加工食品質量監(jiān)督檢驗中心瀘州實驗室進行。

1.3.1 分組及給藥 小鼠在實驗室馴化1周后，隨機分為空白對照組(蒸餾水)、陰性對照組(38度食用酒精)、陽性對照組(38度參茸酒)、實驗組(38度食用酒精浸提物溶液)，每組均分高、中、低三個劑量組[6]。每組各10只動物，灌胃時間為30天。

1.3.2 體長測定 待小鼠伸直后，起自小鼠兩耳連線中點，終至體尾相接處，測得結果即為體長。

1.3.3 游泳試驗 連續(xù)灌胃30天,末次灌胃30min。于小鼠根部加5%體重的鉛皮，室溫下放入水深30cm的游泳箱中,每次放入5 只小鼠，記錄負重小鼠開始游泳到力竭死亡的時間。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結果

2.1 感官特征

實驗制備的保健酒符合國標GB/T27588-201l感官檢測標準，本品具有特別淡雅藥香，酒度適中，不濃不烈，符合大眾消費習慣。具體見表1。

表1 KPL-1感官評定結果

2.2 理化指標

研制的保健酒均符合GB/T27588-201l和GB 2757-2012要求，實驗表明試驗工藝具備生產合格保健酒的理化條件。詳見表2。

表2 KPL-1理化檢測結果

指標數(shù)值總酸(以乙酸計)0．52±0．02總糖(以葡萄糖計)55±12．36總酯(以乙酸乙酯計)0．85±0．26干浸出物0．62±0．03甲醇0．38±0．01氰化物(以HCN計)0．00365±0．00027

2.3 對小鼠體重生長的影響

各組小鼠組間和組內初始體重比較差異均無統(tǒng)計學意義(P=0.541、0.557>0.05)。經30天灌胃實驗,高劑量組中KPL-1灌胃組與空白對照組差異有統(tǒng)計學意義(P=0.01<0.05),說明該保健酒可顯著抑制小鼠體重增長；中劑量組中，KPL-1灌胃組與空白對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P=0.00<0.01)，與陽性對照組和陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P=0.085、0.053>0.05)；低劑量組中，KPL-1灌胃組與陽性對照組、陰性對照組、空白對照組比較均無統(tǒng)計學意義(P=0.813、0.557、0.514>0.05)。與對照組比較，高、中劑量實驗組均具有抑制小白鼠體重增長的作用(P<0.05)，低劑量實驗組對體重增長無明顯影響(P>0.05)。詳見表3。

表3 小鼠體重增長結果比較 ±s，g)

2.4 對小鼠體長生長的影響

結果表明：各組小鼠初始體長比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；經灌胃，各組小鼠最終體長比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。詳見表4。

表4 小鼠體長增長結果比較

組別劑量動物數(shù)(只)初始體長最終體長高劑量106．12±0．218．35±0．49實驗組中劑量106．25±0．098．48±0．35低劑量106．04±0．358．55±0．4高劑量106．16±0．238．35±0．43陽性對照組中劑量105．95±0．248．19±0．22低劑量106．07±0．818．49±0．4高劑量106．11±0．418．41±0．29陰性對照組中劑量106．05±0．118．43±0．40低劑量106．07±0．338．46±0．42高劑量106．15±0．088．48±0．41空白對照組中劑量106．10±0．248．31±0．13低劑量106．15±0．228．27±0．27

2.5 對小鼠負重游泳時間的影響

經KPL-1灌胃后，實驗組小鼠負重游泳時間與陽性對照組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，說明兩者抗疲勞功效差異不顯著，但實驗組小鼠平均游泳時間長于陽性對照組；實驗組小鼠平均負重游泳時間顯著高于陰性對照組和空白對照組(P<0.05)。詳見表5。

表5 各組小鼠負重游泳時間比較 ±s，min)

3 討論

隨著生活和工作節(jié)奏的日益加快及心理、社會壓力的不斷加重，由于缺乏規(guī)律飲食、長期睡眠不足等因素引發(fā)的非健康狀態(tài)及疾病復雜而多樣，疲勞即其中之一。據(jù)WHO調查，全球疲勞狀態(tài)發(fā)生率達35% 以上，中年男性人群疲勞狀態(tài)達60%，我國廣東地區(qū)公務員發(fā)生率高達78.49%,疲勞成為了一個全球性的公共問題[7-8]。

中醫(yī)對疲勞的認識始于兩千多年前，以《黃帝內經》為開端，其《素問·舉痛論》云：“勞則氣來重”，《素問·調經證》亦云：“有所勞倦，形乏衰少”。歷代醫(yī)家均將“疲勞”作為致病因素之一，并認為其病理機制涉及五臟六腑，以脾、肝、腎為主，首推脾，如《素問·示從容論篇》云：“肝虛、腎虛、脾虛，皆令人體重煩冤”，《素問·本病論篇》云：“飲食勞倦即傷脾”。金元時期李東垣系統(tǒng)性地論述了勞倦內傷，明代孫志宏的《簡明醫(yī)彀·內傷》記載：“無胃氣納受，脾主運動，脾虛谷氣不真，脾愈無所稟唉。脾運冗肢，已無稟氣有虛虧則明可倦怠而嗜臥也?！敝嗅t(yī)理論認為臟腑機能失調、精氣血陰陽虧耗損，是形成多種慢性衰弱征象疾病性疲勞的主要病因[9]。西方對疲勞的研究始于1880年，現(xiàn)代西方醫(yī)學將疲勞定義為：機體生理過程不能持續(xù)其機能在特定水平上或不能維持預定的運動強度，其產生機制涉及機體生理和心理狀態(tài)的綜合性變化，與細胞內有害代謝產物的積累、能源物質的消耗及細胞的生理生化反應異常有關，進而導致機體發(fā)生內分泌紊亂、免疫力下降、肝脾損傷、性功能減退等，若不能及時糾正，最終將導致慢性疲勞綜合征[10-12]。

目前，西醫(yī)主要采用抗疲勞藥物治療，多為大腦皮層興奮藥，包括咖啡因(caffeine)、苯丙胺(Amphetamine)、哌甲酯(Methylphenidate)、甲氯芬酯(Meclofenoxate)、乙酰胺(Acetamide)、莫達非尼(Modafil)、尼可丁(Nicotine)及其類似物、激素及其類似物等；其中哌甲酯、苯丙胺、莫達非尼為最常用的中樞神經興奮劑，主要抗疲勞機理為刺激大腦、消除睡意，可使服用者保持較長時間的連續(xù)工作狀態(tài)，但該類藥物多具有成癮性，且副作用較大，長期使用會加重肝腎損傷，還會導致精神疾病[13-18]。多數(shù)中藥具有抗疲勞的藥理作用，其中包括西洋參、紅景天、淫羊藿、人參等[19-26]，抗疲勞中藥多以滋補氣血為主，副作用相對較小。我國利用中藥與酒結合制備保健酒工藝具有悠久的歷史，據(jù)考證遠在殷商時期，古代先民將郁金香草加入黑黍中釀制成藥酒(保健酒)，可用于祭祀、占卦、驅惡防腐等，直至清代藥酒結合達到高峰，藥酒專著及品種繁多，尤其以滋補保健酒居多[27]。中藥浸制保健型養(yǎng)生酒是民間最常用的生產工藝，以酒為藥媒，且使用成本較低，易于接受，具有抗疲勞、提高免疫功能等多種功效。目前國內已開發(fā)的保健酒品牌主要包括勁酒、椰島鹿龜酒、五糧酒黃金酒、張裕三鞭酒、寧夏紅、致中和等[28-30]，其中參茸酒是以道地名貴藥材為原料開發(fā)的一款中檔保健酒，精選人參、鹿茸等名貴藥材，具有抗疲勞、免疫調節(jié)等功效，酒助藥性，藥添酒香，既享飲酒之樂，又與健康隨行。

4 結論

根據(jù)現(xiàn)代西方醫(yī)學對疲勞形成理論及中醫(yī)的五臟失調、精氣血耗損觀點，遵從中醫(yī)以疏肝解郁、養(yǎng)血安神、補益脾腎為主的調補立法原則，選用人參、鹿茸、熟地、何首烏、淫羊藿、阿膠、枸杞等中藥配伍組方，并以白酒作為溶媒。其中人參可加速自由基的清除，節(jié)省糖原利用，增加糖原儲存，減少乳酸堆積及增強乳酸脫氫酶(LDH) 活性，及時為肌肉活動提供能量，具有較好的抗疲勞作用；淫羊藿含有黃酮類、多糖、揮發(fā)油、木脂素、微量元素、生物堿等多種活性化學成分，具有提高免疫系統(tǒng)、增加骨代謝、改善心腦血管系統(tǒng)、抗氧化、抗腫瘤、性激素分泌等藥理作用，還可抗疲勞、提高運動能力；鹿茸含有多種有機化合物，主要有氨基酸、脂肪酸、含N類化合物，此外還含有多糖及多種對人體有益的微量元素,可用于治療心血管、神經、生殖、腫瘤、免疫、衰老等疾病，具有壯元陽、補氣血、益精髓、強筋骨、治虛勞贏瘦、精神倦乏、眩暈、耳聾、目暗、腰膝酸痛等功效，可較好地解除疲勞[31]。

實驗研究表明，采用優(yōu)化工藝可制得KPL-1保健酒成品，各項感官和理化指標均達標；KPL-1高、中劑量實驗組小鼠體重與陰性對照組、空白對照組比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，表明KPL-1保健酒具有抑制體重增長的特性；各組小鼠最終體長比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，表明該保健酒具有減肥功效；實驗組小鼠負重游泳時間顯著高于陰性對照組、空白對照組(P<0.01)，表明該保健酒具有抗疲勞功能。綜上所述，運用中西醫(yī)現(xiàn)代理論成功開發(fā)制得具有減肥和抗疲勞功能的KPL-1保健酒，其減肥和抗疲勞機理有待進一步研究。

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(責任編輯：李嵐春)

The Development of Anti-fatigue Healthcare Wine Based on the TCM Theory

Xue Zhengkai1,2,Zheng Wenwu3，Zhang Suyi4

(1.Institute of Biomedical Engineering of Luzhou Vocational and Technical College,Luzhou,Sichuan 646005,China;2.Medical Experimental Center of Affiliated Hospital of Luzhou Medical College,Luzhou,Sichuan 646100,China；3.The Affiliated Hospital of Luzhou Medical College，Luzhou,Sichuan 646100,China;4.Luzhou Laojiao Co. Ltd., Luzhou 646000,China)

Objective:The wine KPL-1(No 1 anti-fatigue) was prepared based on the views of the five internal organs disorders , Qi and blood loss in traditional Chinese medicine(TCM),To develop a Traditional Chinese medicine healthcare wine with anti-fatigue function.Methods: To comply with the medical principles in TCM , those are Soothing the liver and alleviating mental depression, nourishing blood for tranquillization, invigorating spleen and kidney by tonifying therapy, formulating prescription with the combination of ginseng, deer horn, radix rehmanniae, radix poly multiflori, shorthorned epimedium herb, gelatin, barbary wolfberryfruit.And Chinese white liquor was utilized as a solvent to prepare the anti-fatigue health wine KPL-1 by the use of modern extraction technology.The prepared health wine KPL-1 was tested in sensory, physical and chemical properties. Results:The sensory, physical and chemical properties of KPL-1 health wine met the demands of GB/T27588-201l and GB 2757-2012；the assay of growth on Kunming mice demonstrated that the significant difference existed among the experimental group, the empty control group and the alcohol control group(P<0.01), but the difference of body length of the groups was not significant(P>0.05) ；the exhaustive experiments showed that the swimming time in the experimental group was significantly higher than those of the empty control group and the alcohol control group (P<0.01). Conclusion:The Traditional Chinese medicine healthcare wine with anti-fatigue function was prepared successfully.

Anti-Fatigue; Health Wine; Preparation; Function Analysis

2014-07-05

四川省教育廳理工重點項目(14ZA0334)；瀘州市科技局科技苗子項目(2013-R-51(5/18))

薛正楷，博士，四川省瀘州職業(yè)技術學院副教授，研究方向為功能食品的設計與開發(fā)。E-mail：zk.xue988@163.com。

R28

A

1673-2197(2014)20-0019-04