曾瀧彪，張軍東，唐文燕，吳君蓮

(1.中國(guó)藥科大學(xué) 藥劑學(xué)教研室，江蘇 南京 210009；2.上海信誼藥廠(chǎng)有限公司 藥物研究所，上海 201206；3.安徽職業(yè)技術(shù)學(xué)院 化工系分析教研室，安徽 合肥 230011)

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尼莫地平納米混懸劑在大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究

曾瀧彪1,2，張軍東2*，唐文燕2，吳君蓮3

(1.中國(guó)藥科大學(xué) 藥劑學(xué)教研室，江蘇 南京 210009；2.上海信誼藥廠(chǎng)有限公司 藥物研究所，上海 201206；3.安徽職業(yè)技術(shù)學(xué)院 化工系分析教研室，安徽 合肥 230011)

目的：研究尼莫地平納米混懸劑在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)情況。方法：以尼膜同為參比，研究自制尼莫地平納米混懸劑在SD大鼠體內(nèi)的生物利用度。結(jié)果：尼莫地平納米混懸劑在口服灌胃后禁食與進(jìn)食大鼠體內(nèi)的Cmax分別為(242.96±47.50)μg/mL 和(236.33±7.80)μg/mL，AUC(0-t)分別為(409.01±89.34)μg·h/mL和(415.42±42.76)μg·h/mL；以尼膜同為參比，尼莫地平納米混懸劑在禁食與進(jìn)食條件下大鼠體內(nèi)的相對(duì)生物利用度分別為657%和522%。結(jié)論：在比較食物效應(yīng)對(duì)口服尼莫地平制劑的影響時(shí)，尼膜同在進(jìn)食狀態(tài)下大鼠體內(nèi)的生物利用度是禁食組的1.28倍，而納米結(jié)晶進(jìn)食組大鼠的生物利用度僅為禁食組的1.02倍。

尼莫地平；納米混懸劑；生物利用度

尼莫地平(Nimodipine)是第二代鈣離子拮抗劑，其可選擇性地作用于腦血管平滑肌，擴(kuò)張腦血管，增加腦血流量，臨床用于治療急性高血壓、腦出血后腦血管痙攣引起的缺血性神經(jīng)損傷[1]。尼莫地平是一種溶于乙醇、乙醚等有機(jī)溶媒但不溶于水的藥物，且其存在嚴(yán)重的肝臟首過(guò)效應(yīng)，口服絕對(duì)生物利用度僅為3%～28%[2]。

納米混懸劑是以表面活性劑或聚合物為穩(wěn)定劑，將納米尺度的藥物粒子分散在水中形成的穩(wěn)定膠體分散體系[3]。因其粒徑極小，能顯著提高藥物的飽和溶解度，增加藥物溶出速率，提高其生物利用度。

1 儀器與材料

1.1 儀器

液相色譜儀(美國(guó)Waters公司， Empower系統(tǒng)和2487檢測(cè)器)；TGL-16G高速離心機(jī) (上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng))。

1.2 材料

尼莫地平納米凍干粉(自制)； 尼膜同(尼莫地平片，拜爾醫(yī)藥保健有限公司，批號(hào)： BJ08192)；甲醇(merck公司， 色譜純 )；乙腈(merck公司，色譜純)；健康SD大鼠，體重 230～270g (合格證號(hào)：2007000559729 )。

2 方法

2.1 尼莫地平體內(nèi)分析方法建立

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Phenomenex C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相為乙腈∶水=70∶30(v/v)；檢測(cè)波長(zhǎng)：358nm；流速：1.2mL/min；柱溫：35℃；內(nèi)標(biāo)：尼群地平；進(jìn)樣體積：20μL。

2.1.2 血漿處理 取大鼠空白血漿0.2mL，加入10μg/mL尼莫地平標(biāo)準(zhǔn)液20μL，其中內(nèi)標(biāo)濃度均為5.0μg/mL，加乙醚∶正己烷(1∶1，v/v)1mL，渦旋2min后，4 000rpm離心5min，取上清液0.7mL于離心管中，常溫避光，氮?dú)獯蹈?，避光保存?.1.3 血漿干擾試驗(yàn) 分別取大鼠空白血漿、尼莫地平對(duì)照品(含內(nèi)標(biāo))溶液、空白血漿加尼莫地平對(duì)照品(含內(nèi)標(biāo))溶液和給藥后大鼠血漿樣品，按“2.1.2”項(xiàng)方法處理、進(jìn)樣。

2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)建立 吸取6份大鼠空白血漿各0.2mL，分別加入0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16μg/mL尼莫地平標(biāo)準(zhǔn)溶液20μL(其中內(nèi)標(biāo)濃度均為5.0μg/mL)，加入乙醚∶正己烷(1∶1，v/v)1mL，渦旋2min，4 000rpm離心5min，取上清液0.7mL于離心管中，常溫避光，氮?dú)獯蹈?，試管中的殘留物加入甲?0μL，渦旋振蕩2min，取20μL注入高效液相色譜儀，分別記錄色譜圖中尼莫地平的峰面積(Anim)與尼群地平的峰面積(Anit)，并以峰面積比值A(chǔ)(Anim/Anit)對(duì)尼莫地平濃度C(μg/mL)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得回歸方程 Y =0.183 7X+0.017 3，R2=0.999 8(n=6)，表明尼莫地平在0.508～16.256μg·mL-1濃度范圍內(nèi)與其峰面積積分線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.1.5 回收率試驗(yàn) 在大鼠空白血漿中加入尼莫地平標(biāo)準(zhǔn)液適量，使其濃度分別為0.5μg/mL、2μg/mL、8μg/mL，其中內(nèi)標(biāo)濃度均為5.0μg/mL。按“2.1.2”項(xiàng)方法處理并進(jìn)樣分析，按“2.1.4”項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算測(cè)定值，測(cè)定值與實(shí)際加入值的比值即為回收率。低、中、高三個(gè)濃度的回收率分別為(102.14±0.11)%、(102.68±1.91)%、(102.32±1.93)%，表明方法準(zhǔn)確度較好。

2.1.6 精密度試驗(yàn) 在大鼠空白血漿中加入尼莫地平標(biāo)準(zhǔn)液適量，使其濃度分別為0.5μg/mL、2μg/mL、8μg/mL，其中內(nèi)標(biāo)濃度均為5.0μg/mL，按大鼠血漿中尼莫地平工作曲線(xiàn)制備法測(cè)定，1天內(nèi)進(jìn)樣3次，記錄峰面積，計(jì)算得日內(nèi)RSD為1.47%；每日測(cè)定峰面積，連續(xù)測(cè)定3天，計(jì)算得日間RSD為2.43%。

2.2 大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究

2.2.1 給藥方法與血樣處理 取SD大鼠12只，于實(shí)驗(yàn)前禁食12h，自由飲水，分成兩組，分別灌胃給予尼莫同混懸液和尼莫地平納米結(jié)晶片混懸液，給藥劑量為40.0mg/kg[4]。

取進(jìn)食的SD大鼠12只，分成兩組，分別灌胃給予尼莫同混懸液和尼莫地平納米結(jié)晶片混懸液，給藥劑量為40.0mg/kg。

2.2.2 血樣采集與測(cè)定 上述動(dòng)物給藥后，分別于給藥前(0h)和給藥后0.25h、0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、3.0h、4.0h、8.0h、12.0h、24.0h于大鼠眼底靜脈叢毛細(xì)管取血0.4mL于肝素化的離心管中，10 000rpm離心5min，取上層血漿-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

按照“2.1.2”項(xiàng)方法提取藥物，采用高效液相色譜法測(cè)定，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)尼莫地平的血藥濃度。

2.2.3 大鼠體內(nèi)尼莫地平血藥濃度 禁食組大鼠口服給藥后平均血藥濃度和進(jìn)食組大鼠口服給藥后平均血藥濃度分別見(jiàn)表1和表2。

2.2.4 數(shù)據(jù)處理 采用非房室模型法計(jì)算SD大鼠口服給藥后的各項(xiàng)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，其中Cmax和Tmax為實(shí)測(cè)值，AUC(0-t)為通過(guò)梯形法計(jì)算所得，結(jié)果見(jiàn)表3。

以尼膜同為參比制劑，根據(jù)血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)下面積AUC(0-t)分別計(jì)算禁食與進(jìn)食組納米結(jié)晶的相對(duì)生物利用度F，計(jì)算公式如下：

表1 禁食組大鼠口服給藥后平均血藥濃度

注：- 表示未檢出

表2 進(jìn)食組大鼠口服給藥后平均血藥濃度

3 結(jié)論

在相同狀態(tài)下，以尼膜同為參比制劑，經(jīng)計(jì)算，禁食組大鼠尼莫地平納米結(jié)晶的相對(duì)生物利用度為657%；進(jìn)食組大鼠尼莫地平納米結(jié)晶的相對(duì)生物利用度為522%。

在比較食物效應(yīng)對(duì)口服尼莫地平制劑的影響時(shí)，尼膜同在進(jìn)食狀態(tài)下大鼠體內(nèi)的生物利用度是禁食組的1.28倍；而納米結(jié)晶進(jìn)食組大鼠的生物利用度僅為禁食組的1.02倍，這也說(shuō)明納米結(jié)晶可消除食物效應(yīng)對(duì)口服制劑吸收的影響。

表3 口服給藥后大鼠藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

[1] 楊力,趙德化.尼莫地平的藥理和臨床應(yīng)用[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,1993,22(2):98-101.

[2] 李帥,王偉姣,李昌亮,等.國(guó)產(chǎn)尼莫地平及其制劑質(zhì)量的研究進(jìn)展[J].中南藥學(xué),2012,10(9):689-691.

[3] RABINOW BE. Nanosuspensions in drug delivery[J].Nat Rev Drug Discov,2004,3(9):785-796.

[4] 賀浪沖,王嗣岑.非手性與手性色譜法研究尼莫地平及其對(duì)映體在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)及組織分布[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),2003,38(8):603-608.

(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2014-03-12

曾瀧彪(1988-)，男，中國(guó)藥科大學(xué)藥劑學(xué)教研室碩士研究生，研究方向?yàn)樗幬镄聞┬团c新技術(shù)。

張軍東(1974-)，男，上海信誼藥廠(chǎng)有限公司藥物研究所高級(jí)工程師，研究方向?yàn)樗幬镄聞┬团c新技術(shù)。

R945

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1673-2197(2014)16-0009-02