任 榮，李正翔

（天津醫(yī)科大學總醫(yī)院，天津 300052）

多指標綜合評價不同產地前胡藥材質量*

任 榮，李正翔

（天津醫(yī)科大學總醫(yī)院，天津 300052）

[目的]采用多指標法研究并建立前胡質量評價系統(tǒng),進而對不同產地前胡質量進行差異性分析。[方法]對前胡水分、總灰分、酸不溶性灰分和醇溶性浸出物分別進行測定,并且采用高效液相色譜法同時測定前胡中白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量,將各個指標與含量相結合，建立前胡質量評價體系,并對不同產地前胡進行差異性分析和評價。[結果]不同產地前胡質量雖有差異,但均能符合《中國藥典》2010版規(guī)定。[結論]多指標結合含量測定的質量評價體系可用于不同產地前胡的等級評價,可以為擴大前胡的種植、栽培提供了理論依據(jù)。

前胡；多指標；含量測定；產地差異；質量評價

前胡為傘形科植物白花前胡（Peucedanum praeruptorum Dunn）的干燥根，在浙江、江西、安徽、福建、江蘇、四川等省份均有分布[1]，具有疏散風熱、降氣化痰作用，臨床上用于治療風熱咳嗽痰多，痰熱喘滿，咯痰黃稠等[2-3]。臨床上常與其他藥物組成復方使用[4]，如方劑前胡湯、前胡飲和前胡犀角湯等。前胡主要生理活性成分為各種類型的香豆素化合物，其中白花前胡甲素、白花前胡乙素為主要有效成分[5]。由于前胡的種植范圍廣，各產地的氣候、自然環(huán)境有很大差異[6]，受各種因素影響，不同產地前胡藥材質量可能存在差異，因此有必要對不同產地前胡藥材進行綜合質量評價，為規(guī)范臨床用藥提供依據(jù)，進一步規(guī)范前胡藥材的合理化種植。前胡中含有多種生物活性成分,如何評價多種生物活性成分中藥材的質量,分析影響中藥材質量的生態(tài)環(huán)境因子差異,是現(xiàn)代中藥產業(yè)研發(fā)中的關鍵問題[7-8]。筆者對不同產地前胡質量進行全面的綜合評價，建立其質量評價體系。本研究將水分、總灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物、白花前胡甲素、白花前胡乙素含量測定等多項指標結合起來，對不同產地前胡進行綜合質量評價。白花前胡甲素、白花前胡乙素的結構式見圖1。

1 儀器與試藥

LC-10ATvp型高效液相色譜儀（島津，日本），SPD-10Avp紫外檢測器（島津，日本）。白花前胡甲素對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：111711－200602），白花前胡乙素對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：111904-201203），前胡樣品的采集見表1。中藥材由亳州中藥總公司提供，并經天津醫(yī)科大學總醫(yī)院藥劑科胡建平副主任藥師鑒定為傘形科植物白花前胡（Peucedanum praeruptorum Dunn）的干燥根。甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

圖1 白花前胡甲素（A）和白花前胡乙素（B）的結構式Fig.1 Structural formula of praeruptorin A（A）and praeruptorin B（B）

2 方法與結果

2.1 水分、灰分及浸出物測定 藥材水分、總灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物的測定在一定程度上可以反映藥材的質量，本研究依據(jù)《中國藥典》2010版對不同產地前胡藥材進行相應測定。結果見表1。

2.2 不同產地前胡白花前胡甲素、白花前胡乙素含量的比較測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：島津ULTRON VX-ODS（250 mm×4．6 mm，5 μm）色譜柱，流動相：甲醇－水（7∶3），檢測波長：321 nm，流速：1.0 mL/min。柱溫：室溫，20 μL定量環(huán)進樣。對照品及樣品色譜圖見圖2。

表1 不同產地前胡水分、總灰分和酸不溶性灰分測定結果(n=3)Tab.1 Determination of water,total ash and acid-insoluble ash in Radix Peucedani from different districts(n=3)%

圖2 HPLC圖譜Fig.2 HPLC chromatograms

2.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取白花前胡甲素對照品、白花前胡乙素對照品適量，分別加甲醇制成0.102 mg/mL和0.039 6 mg/mL的對照品儲備液。

2.2.3 供試品溶液的制備 精密稱定各品種前胡藥材粉末（過3號篩）約0.5 g，置具塞錐形瓶中，精密加入氯仿25mL，稱定質量，超聲處理（功率250W，頻率33 kHz）20 min，放冷，用氯仿補足減失質量，精密吸取上清液5 mL，蒸干，殘渣加甲醇溶解，定容至25 mL，搖勻，用0.45 μm濾膜過濾，即得。

2.2.4 線性范圍考察 取“2.2.2”項下對照品儲備液，加甲醇制成含白花前胡甲素10.2、20.4、50.1、71.4、102 μg/mL及白花前胡乙素3.96、7.92、19.8、27.7、39.6 μg/mL的系列混合對照品溶液，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定色譜峰面積，以對照品濃度（X）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標，計算回歸方程：白花前胡甲素：＝52985X+9848.1（r＝0．9999），白花前胡乙素：＝51 777X＋24 258（r＝0．999 9），結果表明：白花前胡甲素、白花前胡乙素分別在10.2～102 μg/mL，3.96～39.6 μg/mL范圍內，呈良好的線性關系。結果見表2、表3。

表2 白花前胡甲素標準曲線Tab.2 Standard curve of praeruptorin A

表3 白花前胡乙素標準曲線Tab.3 Standard curve of praeruptorin B

2.2.5 精密度實驗 取“2.2.2”項下對照品溶液，連續(xù)進樣6次，測定兩種對照品峰面積，得出白花前胡甲素、白花前胡乙素RSD分別為0.96%和0.92%。結果見表4、表5。

表4 白花前胡甲素精密度實驗Tab.4 Precision test of praeruptorin A

表5 白花前胡乙素精密度實驗Tab.5 Precision test of praeruptorin B

2.2.6 重復性實驗 按“2.2.3”項下方法平行制備6份供試品溶液（產地安徽），分別測定色譜峰面積，白花前胡甲素RSD為1.53%（n＝6）。白花前胡乙素RSD為1．73%（n＝6），結果表明本法重復性良好。結果見表6。

表6 重復性實驗Tab.6 Reproducibility testmg/g

2.2.7 穩(wěn)定性實驗 取“2.2.3”項下供試品溶液（產地安徽），分別于0、2、4、6、10、24 h進樣，測定色譜峰面積，白花前胡甲素RSD為1.24%（n＝6），白花前胡乙素RSD為1．12%（n＝6），結果表明供試品溶液在24 h內穩(wěn)定。結果見表7。

表7 穩(wěn)定性實驗Tab.7 Stability test mg/g

2.2.8 加樣回收率實驗 取6份已知含量的樣品（產地安徽）各約0.25 g，精密稱定，每份分別精密加入適量的白花前胡甲素、白花前胡乙素對照品，按供試品溶液制備及測定方法操作，進行色譜分析，結果見表8。

表8 加樣回收率實驗結果(n=6)Tab.8 Results of recovery tests(n=6)

2.2.9 樣品測定 取不同產地的前胡樣品，按“2.2.2”項下操作，每個產地樣品平行制備3份，按上述色譜條件測定，用外標法計算白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量。結果見表9。

3 討論

本研究對前胡的水分、總灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物進行檢測，同時結合前胡中兩種主要成分白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量測定結果，建立全面的前胡藥材質量評價體系，并通過此體系綜合分析不同產地前胡藥材的質量差異。

表9 不同產地前胡中白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量Tab.9 Determination of praeruptorin A and B in Radix Peucedani from different habitats

白花前胡甲素和白花前胡乙素均為香豆素類物質，極性較小，因而采用氯仿作為提取溶劑，所制得的樣品溶液中雜質干擾峰較少。在筆者采用的色譜條件下，能很好的滿足含量測定要求。超聲提取5、10、20、30 min，結果表明20 min可基本提取完全。王維等[9]用紫外分光光度法測定不同產地前胡中總香豆素的含量，結果顯示，該方法精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、回收率均良好。系統(tǒng)考察了浙江不同產地栽培品和野生品前胡的總香豆素含量，結果發(fā)現(xiàn)個產地之間總香豆素含量無顯著差異。

俞年軍等[10]比較了不同產地前胡揮發(fā)油化學成分，結果顯示，主產區(qū)白花前胡飲品的揮發(fā)油成分沒有明顯差異。代麗萍等[11]對不同產地前胡單一成分白花前胡甲素的測定，結果顯示，不同產地前胡中白花前胡甲素含量差異顯著。通過查閱相關文獻，韓超[12]、黃瑞紅等[13]僅對提取物或制劑中的白花前胡甲素進行了含量測定。聶小忠等[14]對江西、浙江、安徽、重慶等地前胡質量進行比較，與本研究樣品采集地有差別，并且未對樣品水分、灰分等項目進行測定比較。本研究為首次使用HPLC法同時測定兩種香豆素含量的方法應用于評價不同產地前胡質量。并對各樣品的水分、灰分等項目進行全面評價，與上述文獻比較，方法簡便、快捷，全面，更具有代表性。

前胡中白花前胡甲素的含量約是白花前胡乙素含量的3倍，不同產地前胡中兩種香豆素成分的含量相差較大，其中白花前胡甲素的含量相差尤為明顯。以江蘇產前胡中香豆素含量最高，河南、浙江、安徽、江西等省產前胡差異不明顯，從測定結果可以看出，不同產地前胡由于生長環(huán)境、氣候條件的不同，這些因素均能影響中藥材次生代謝物的生成。通過對氣候類型的分析可知，溫暖濕潤的亞熱帶過渡型氣候比較適于前胡的生長。

水分、灰分及浸出物測定結果顯示，不同產地前胡水分含量在7.491%～10.89%，均符合《中國藥典》質量標準，其中湖北產前胡水分含量最高，湖南產最低。不同產地樣品總灰分、酸不溶性灰分存在一定差異。所測樣品總灰分含量在7.776%～3.689%，酸不溶性灰分為1.365%～0.265%。總灰分、酸不溶性灰均為湖南產前胡含量最高，其原因可作進一步研究?？偦曳趾孔畹偷臑榘不债a前胡，酸不溶性灰分最低為浙江產前胡?！吨袊幍洹?010版規(guī)定前胡藥材醇溶性浸出物的量不得少于20%，所測樣品均符合規(guī)定，最高的為安徽產前胡，最低為湖北產前胡。

通過對此體系進行分析，不同產地前胡醇溶性浸出物都在20%以上，水分不超過12%，總灰分不超過8%，酸不溶性灰分不超過2%，所有樣品都能符合《中國藥典》2010版標準，質量較好。

藥材具有道地性，不同產地藥材具有不同的質量差異[15]。本方法的建立可以用于評價不同產地前胡的質量差異，考察對不同產地前胡樣品的生長年限、加工方法、品種、貯藏年限、炮制方法等因素對藥品質量的影響。為前胡的大規(guī)模引種栽培和中藥材生產質量管理規(guī)范（GAP）基地建設提供了依據(jù)，為擴大前胡產區(qū)范圍，從《本草綱目》記載的浙江擴大到整個暖溫帶到亞熱帶氣候地區(qū)地區(qū)提供理論支持。本前胡藥材質量評價體系可以對不同產地前胡進行綜合質量評價，用以衡量前胡藥材質量，以為臨床用藥及藥品生產企業(yè)提供合格藥材。

[1]中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：化學工業(yè)出版社，2010：248.

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Comprehensive evaluation with multi-index for quality test of radix peucedani from different habitats

REN Rong,LI Zheng-xiang
（General Hospital of Tianjin Medical University,Tianjin 300052,China）

[Objective]To establish a multi-index system for comprehensive evaluating the quality of Radix Peucedani and analyzing the quality differences in Radix Peucedani from different habitats.[Methods]The moisture content,total ash,acid-insoluble ash,ethanolsoluble extracts and the contents of praeruptorin A and B of Radix Peucedani from different habitats were detected by HPLC.Then combining the indexes mentioned above a quality evaluation system for Radix Peucedani was established,which could be used to assess the quality for Radix Peucedani from different habitats.[Results]The detection results of moisture content,ash,acid-insoluble ash and contents of praeruptorin A and B indicated that these contents in all samples were met the standard of Chinese Pharmacopeia 2010 edition.[Conclusion]The quality of Radix Peucedani from different habitats can be assessed and controlled by the quality evaluation system established by multipoint test in this research.

Radix Peucedani;multiple index;content determination;different habitats;quality evaluation

R282.5

A

1672-1519（2014）10-0627-04

2014-04-16）

（本文編輯：高 杉，于春泉）

10.11656/j.issn.1672-1519.2014.10.14

天津市衛(wèi)生局科技基金資助項目（2012ky30）。作者簡介：任 榮（1979-）男，碩士，主管藥師，主要研究方向為藥物制劑。

李正翔，E-mail:lee41@sina.com。