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(德州學(xué)院醫(yī)藥與護(hù)理學(xué)院，山東 德州 253023)

大鼠血漿或血清是研究藥物、疾病等最常用的生物樣本，體積較小的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物短期內(nèi)多次采血比較困難[1]，因此合適的采血方法是獲取寶貴血液樣本的關(guān)鍵。我們在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)采用大鼠眼內(nèi)眥采血法，每只眼睛可以一次性采血1.5 mL?，F(xiàn)將采血的操作體會(huì)總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為清潔級SD大鼠，共60只，雌雄各半，體質(zhì)量200～300 g；玻璃毛細(xì)管，內(nèi)徑0.9～1.1 mm。

1.2 方法

左手戴上皮手套，將大鼠放在45°的斜面上，用中指和食指按住老鼠的頭部，并且使老鼠的眼球外凸(便于取血)，左手掌按壓大鼠以便固定。以酒精擦拭大鼠眼內(nèi)眥，將消毒并用肝素鈉處理的毛細(xì)管(長約3～4 cm)插入眼眶下前方，保持毛細(xì)管與鼠面成40°左右夾角以便找準(zhǔn)靜脈叢位置。用玻璃管刺入時(shí)能明顯感到一層彈性薄膜，旋轉(zhuǎn)刺破薄膜，有種落空感，此時(shí)若沒有血液流出，調(diào)整毛細(xì)管插入深度(大約3～5 mm)，血液便成股流下，用肝素鈉處理的EP管在眼球下方接血即可。

2 結(jié)果

使用此方法采血量大于1.5 mL，3 h后可對同一只眼進(jìn)行相同操作，采血量大于1.5 mL。取血后置室溫徑直1 h，3 000 rpm，離心10 min，所得血清呈淡黃色的。若出現(xiàn)紅色血清，則說明出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。

3 討論

大鼠的采血方法主要有腹主動(dòng)脈采血法、眼內(nèi)眥采血法、尾尖采血法、尾靜脈采血法、斷頭采血法和頸靜脈采血法等[2]。當(dāng)科研試驗(yàn)要求短期內(nèi)多次多量采血時(shí)，需避免采取存在以下缺點(diǎn)的方法：取血量少，需使用麻醉劑，創(chuàng)傷大，采血后不能存活，不能連續(xù)多次采血等。我們采用的眼內(nèi)眥采血法是在大鼠非麻醉狀態(tài)下進(jìn)行的，避免了麻醉劑對血液生化指標(biāo)的影響，并且能夠短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行多次多量的采血。

采用該方法的注意事項(xiàng)包括：①采血場所要保持充足的光線及適宜的室溫[3-4]；②采血用具及大鼠采血部位要求消毒，否則易致大鼠眼部感染；③熟練操作要領(lǐng)，一旦使大鼠致盲，不利于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；④用EP管接血時(shí)切忌在眼部反復(fù)刮，以免導(dǎo)致溶血；⑤在對大鼠進(jìn)行眼眥取血之前，最好剪掉大鼠的胡須，以免流出的血液粘到胡須上不利于接血。

通過對60只大鼠眼內(nèi)眥采血的摸索，發(fā)現(xiàn)此方法具有較多優(yōu)點(diǎn)，如對大鼠的創(chuàng)傷較小、采血量較多、可多次取血、不用麻醉等。只要掌握正確的操作方法，多加練習(xí)，就能成功進(jìn)行多次多量的采血。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 吳曉晴,郝晨霞.160只小鼠心臟采血的操作體會(huì)[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理,2004,21(1):53-54.

[2] 車兆義,鄒 悅,宋清斌.大鼠實(shí)驗(yàn)中幾種常用的采血方法探討[J].局解手術(shù)學(xué)雜志,2008,17(2):84-85.

[3] 周曉春,陳 龍,劉紹晨.200只大鼠內(nèi)眥取血的操作體會(huì)[J].承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,22(4):328-329.

[4] 施新猷.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)[M].人民軍醫(yī)出版社,1999：101.