孫麗娜，劉曉莉，喬德才

運(yùn)動(dòng)疲勞可能通過(guò)激活海馬小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥降低大鼠學(xué)習(xí)記憶功能

孫麗娜1，2，劉曉莉2，喬德才2

目的：觀察反復(fù)力竭運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠海馬小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)及炎癥因子白介素-1β（interleukin 1 beta，簡(jiǎn)稱(chēng)IL-1β）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis fatctor-alpha，簡(jiǎn)稱(chēng)TNF-α）和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducer type Nitric-Oxide Synthase，簡(jiǎn)稱(chēng)iNOS）表達(dá)的影響。方法：雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（CG）和運(yùn)動(dòng)疲勞組（EG），CG大鼠常規(guī)飼養(yǎng)不進(jìn)行跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，EG大鼠進(jìn)行反復(fù)7天遞增負(fù)荷的力竭跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)。采用免疫組化方法觀察大鼠海馬小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)和激活水平，通過(guò)半定量PCR技術(shù)檢測(cè)海馬組織IL-1β、TNF-α及iNOS mRNA的表達(dá)，并使用Y迷宮主動(dòng)回避行為學(xué)檢測(cè)學(xué)習(xí)和記憶能力。結(jié)果：與CG相比，EG大鼠海馬小膠質(zhì)細(xì)胞體積較大、胞體變圓、突起增多并且染色變深，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析陽(yáng)性細(xì)胞面積和染色消減灰度值均顯著高于CG（P<0.05，P<0.01），IL-1β、TNF-α及iNOS mRNA的表達(dá)水平也顯著性高于CG（P<0.01），并且EG大鼠學(xué)習(xí)記憶能力較CG大鼠顯下降（P<0.05，P<0.01）。結(jié)論：反復(fù)力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠海馬小膠質(zhì)細(xì)胞處于激活狀態(tài)，海馬內(nèi)炎癥因子釋放增多，并伴隨有學(xué)習(xí)記憶能力的下降。提示：運(yùn)動(dòng)疲勞所致海馬小膠質(zhì)細(xì)胞的大量激活可能是引發(fā)神經(jīng)炎癥反應(yīng)，進(jìn)而降低大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的重要因素之一。

小膠質(zhì)細(xì)胞；運(yùn)動(dòng)疲勞；海馬；炎癥反應(yīng)；學(xué)習(xí)記憶功能

運(yùn)動(dòng)應(yīng)激所致的神經(jīng)炎癥反應(yīng)是否在中樞疲勞的神經(jīng)調(diào)控中發(fā)揮作用還鮮有報(bào)導(dǎo)。小膠質(zhì)細(xì)胞（microglia，簡(jiǎn)稱(chēng)MG）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中固有的免疫細(xì)胞，是神經(jīng)炎癥反應(yīng)的重要參與者。正常情況下，MG處于靜息狀態(tài)，形態(tài)呈分枝狀，胞體小且數(shù)量少；當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激刺激后，MG處于激活狀態(tài)，形態(tài)呈“阿米巴樣”，胞體變大、變圓，出現(xiàn)細(xì)胞增值、聚集等特征[1]，并顯著上調(diào)多種促炎性細(xì)胞因子的分泌，在神經(jīng)炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[2]。海馬是介導(dǎo)應(yīng)激的重要腦區(qū)，也是參與學(xué)習(xí)記憶的主要核團(tuán)。實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)疲勞后海馬CA1區(qū)突觸長(zhǎng)時(shí)程（long-termpotentiation，簡(jiǎn)稱(chēng)LTP）抑制以及神經(jīng)元電活動(dòng)的改變可能是導(dǎo)致大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降的重要原因[3-4]。近期的神經(jīng)病理學(xué)研究表明，由海馬MG激活介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)是抑制LTP誘導(dǎo)，降低學(xué)習(xí)記憶功能的主要原因。由此推測(cè)，運(yùn)動(dòng)應(yīng)激時(shí)可能也存在由海馬免疫細(xì)胞活化介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)，從而損害學(xué)習(xí)記憶功能。為此，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立大鼠反復(fù)力竭運(yùn)動(dòng)模型，觀察運(yùn)動(dòng)疲勞后海馬區(qū)MG的形態(tài)學(xué)改變以及IL-1β、TNF-α和iNOS的表達(dá)變化，并同時(shí)檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改變，揭示海馬區(qū)MG活化介導(dǎo)的免疫炎癥反應(yīng)是否參與了運(yùn)動(dòng)疲勞后學(xué)習(xí)記憶能力下降的神經(jīng)生物學(xué)調(diào)控過(guò)程。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

實(shí)驗(yàn)選擇清潔級(jí)健康雄性SD大鼠，體重（200±20）g，購(gòu)自北京大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心（許可證號(hào)：SCXK（京）2006-2008）。動(dòng)物常規(guī)分籠飼養(yǎng)、自然光照、自由攝食和飲水，室溫（20±3）℃，相對(duì)濕度40%～60%。適應(yīng)性飼養(yǎng)2天后，將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（control group，簡(jiǎn)稱(chēng)CG）和運(yùn)動(dòng)組（exercise group，簡(jiǎn)稱(chēng)EG），每組18只。其中，有6只用于MG免疫組織化學(xué)染色，6只用于半定量PCR檢測(cè)，另外6只用于Y迷宮主動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)。

1.2 運(yùn)動(dòng)疲勞模型的建立

本實(shí)驗(yàn)采用3級(jí)遞增負(fù)荷跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)方案。動(dòng)物先進(jìn)行3天適應(yīng)性跑臺(tái)訓(xùn)練，從第4天開(kāi)始正式跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，負(fù)荷分為3級(jí)，每級(jí)跑速分別為8.2、15、20 m/min，第1、2級(jí)分別運(yùn)動(dòng)15 min，第3級(jí)運(yùn)動(dòng)直至大鼠無(wú)法維持跑臺(tái)預(yù)定跑速，滯留于跑道后端3次以上，使用聲波和光、電刺激驅(qū)趕仍無(wú)效，并伴有呼吸急促，腹臥跑臺(tái)等行為表現(xiàn)[4]，運(yùn)動(dòng)周期為7天。對(duì)照組動(dòng)物相同條件下常規(guī)飼養(yǎng)，不進(jìn)行跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)。

1.3 Y迷宮主動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)

先將大鼠放在起步區(qū)無(wú)電刺激下適應(yīng)3～5 min后通電電擊，規(guī)定大鼠被電擊后10 s從起步區(qū)直接逃至安全區(qū)為一次“正確反應(yīng)”，若10 s后沒(méi)有逃至安全區(qū)且仍在起步區(qū)為“主動(dòng)回避錯(cuò)誤”，10 s后逃離起步區(qū)但未到達(dá)安全區(qū)為“辨別錯(cuò)誤”。每只大鼠被連續(xù)刺激20次，正確率90%作為學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)（即連續(xù)20次電擊中18次正確逃離），達(dá)標(biāo)后立即停止訓(xùn)練。如未達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，l min后大鼠進(jìn)行下一個(gè)20次訓(xùn)練，如此反復(fù)訓(xùn)練直到達(dá)標(biāo)。記錄其訓(xùn)練中出現(xiàn)的錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)和訓(xùn)練時(shí)間作為大鼠學(xué)習(xí)能力的評(píng)定指標(biāo)。學(xué)習(xí)測(cè)試結(jié)束24 h后，再用同樣方法測(cè)試大鼠的記憶能力，觀察并記錄大鼠20次電擊過(guò)程中的正確次數(shù)作為其記憶能力的評(píng)定指標(biāo)。

1.4 小膠質(zhì)細(xì)胞免疫組化染色

大鼠在運(yùn)動(dòng)力竭后即刻經(jīng)水合氯醛麻醉，開(kāi)胸經(jīng)左心室灌流生理鹽水200 mL沖洗血液，再用冰冷的4%多聚甲醛灌注5～ 10 min。灌流完畢后立即取腦，置于4%多聚甲醛后固定4 h，隨后將腦轉(zhuǎn)移到30%蔗糖溶液中直至沉底。切制50 μm厚的冠狀冰凍切片，收集于0.1 mol/L磷酸緩沖液內(nèi)，按下述步驟進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。切片置于3%H2O2中室溫封閉20 min；3%血清（中杉金橋生物技術(shù)有限公司）室溫封閉30 min；一抗（鼠抗OX-42，1：500稀釋?zhuān)琒erotec公司）室溫孵育2 h；二抗（生物素標(biāo)記的馬抗小鼠IgG，1：500稀釋?zhuān)猩冀饦蛏锛夹g(shù)有限公司）室溫孵育2 h，ABC復(fù)合物（1：200稀釋?zhuān)琕ector公司）結(jié)合反應(yīng)2 h；DAB顯色劑顯色20 min。然后將切片貼于涂有明膠的載玻片上，脫水透明，加拿大中性樹(shù)脂封片。

1.5 半定量PCR

運(yùn)動(dòng)組大鼠在運(yùn)動(dòng)力竭后即刻斷頭取腦，摳取海馬組織并提取總RNA，以oligo（dT）18為引物反轉(zhuǎn)錄為cDNA。根據(jù)基因庫(kù)已知序列設(shè)計(jì)IL-1β、TNF-α、iNOS和β-actin基因設(shè)計(jì)引物，引物序列見(jiàn)表1。每個(gè)樣本重復(fù)測(cè)定3次，用同一樣品中β-actin的含量進(jìn)行校正得到其相對(duì)值。

表1 半定量PCR目的基因和β-actin測(cè)試所用引物序列表Table1 The Primer sequence table of target gene and β-actin for semi-quantitative RT-PCR

1.6 圖像采集及數(shù)據(jù)分析

光學(xué)顯微鏡下觀察不同組別大鼠MG免疫組織化學(xué)腦片，采集圖片并使用Image Pro Analysis Software（Media Cybernetics公司）軟件進(jìn)行MG陽(yáng)性染色觀察分析。將各樣本PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析，使用凝膠定量分析軟件Quantity One version 4.3.1（Bio-Rad公司）進(jìn)行圖片處理，所得數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（Mean±SD）表示。應(yīng)用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間差異比較采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)，P<0.05表示組間有顯著性差異，P<0.01表示組間有極其顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)和表達(dá)變化

免疫組化結(jié)果顯示，MG廣泛分布于各組大鼠腦內(nèi)，免疫染色呈棕黃色，位于胞質(zhì)和突起中。安靜狀態(tài)下，海馬區(qū)MG呈分枝狀，胞體小并且數(shù)量少，處于非活化狀態(tài)；而在EG大鼠海馬內(nèi)MG染色變深，體積較大、胞體變圓、突起增多的“阿米巴樣”與SUGAMA等[1]的研究結(jié)果一致（見(jiàn)圖1）。EG大鼠海馬區(qū)免疫陽(yáng)性小膠質(zhì)細(xì)胞面積顯著大于CG大鼠（P<0.05），并且EG大鼠陽(yáng)性細(xì)胞染色消減灰度值也顯著高于CG（P<0.01）（見(jiàn)圖2）。

圖1 海馬區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)（n=6）Figure1 The expression of microglias cells in hippocampus（n=6）

圖2 海馬區(qū)MG陽(yáng)性細(xì)胞面積和染色消減灰度值統(tǒng)計(jì)柱狀圖（n=6）Figure2 The statistical histogram of the area and the staining gray level of positive microglia cells in hippocampus（n=6）

2.2 炎癥反應(yīng)因子的表達(dá)變化

半定量PCR結(jié)果顯示，運(yùn)動(dòng)疲勞后大鼠海馬區(qū)IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA的表達(dá)水平較對(duì)照組均具有極其顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），3種炎癥因子在EG大鼠海馬區(qū)內(nèi)分泌明顯增多（見(jiàn)圖3）。

圖3 不同組別大鼠海馬組織炎癥因子mRNA的表達(dá)變化（n=6）Figure3 The change of expression of inflammation factor mRNA in hippocampus（n=6）

2.3 大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改變

Y迷宮主動(dòng)回避測(cè)試運(yùn)動(dòng)疲勞對(duì)大鼠學(xué)習(xí)能力的影響，其中，反應(yīng)學(xué)習(xí)能力的指標(biāo)，即主動(dòng)回避錯(cuò)誤次數(shù)、辨別錯(cuò)誤次數(shù)和訓(xùn)練時(shí)間統(tǒng)計(jì)結(jié)果均為EG大鼠顯著高于CG（P<0.05，P< 0.01）。EG大鼠記憶能力，即記憶正確次數(shù)則顯著低于CG（P< 0.01），可見(jiàn)運(yùn)動(dòng)疲勞后大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力均明顯降低（見(jiàn)表2）。

表2 Y迷宮主動(dòng)回避測(cè)試指標(biāo)（Mean±SD，n=6）Table2 The testing index of Y maze active avoidance（Mean± SD，n=6）

3 討論

電刺激、冷刺激[1-2]等急性刺激可激活腦內(nèi)的MG已得到證實(shí)。在急性應(yīng)激條件下，內(nèi)分泌系統(tǒng)中下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)（hypothalamic pituitary adrenal，簡(jiǎn)稱(chēng)HPA）軸的迅速激活，以及交感神經(jīng)系統(tǒng)活動(dòng)的增強(qiáng)，是腦內(nèi)MG活化的重要通路[2]。與急性應(yīng)激類(lèi)似，運(yùn)動(dòng)應(yīng)激也可快速激活HPA軸并增強(qiáng)交感神經(jīng)系統(tǒng)的活動(dòng)[5]，從而引起下丘腦內(nèi)去甲腎上腺素（norepinephrine，簡(jiǎn)稱(chēng)NE）分泌的增加，NE可與MG膜上的β-腎上腺素能受體結(jié)合，通過(guò)第二信使環(huán)-磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，簡(jiǎn)稱(chēng)cAMP）將信號(hào)傳入細(xì)胞核內(nèi)，啟動(dòng)IL-1等多種炎癥因子DNA轉(zhuǎn)錄，從而導(dǎo)致MG活化并合成釋放大量炎癥因子，如IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-18等。CARMICHAEL等[6]研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)疲勞引發(fā)神經(jīng)炎性反應(yīng)與外周炎癥信號(hào)激活位于腦連接部位血管周?chē)木奘杉?xì)胞和腦內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答有關(guān)。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)疲勞時(shí)，腦內(nèi)免疫細(xì)胞MG被大量激活。雖然目前還沒(méi)有直接證據(jù)表明上調(diào)的炎癥因子是否全部由激活狀態(tài)的MG分泌，但大量神經(jīng)病理學(xué)研究已證實(shí)[1-2，7]，MG激活是腦內(nèi)炎癥因子分泌增加的主要來(lái)源。由此推測(cè)，MG可能參與介導(dǎo)了運(yùn)動(dòng)疲勞引發(fā)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)過(guò)程。

IL-1β和TNF-α是應(yīng)激時(shí)產(chǎn)生的主要促炎因子，其受體廣泛分布于神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞膜上。2種促炎因子與其受體（IL-1R、TNF-R）結(jié)合后，可激活絲裂原激活蛋白激酶類(lèi)（mitogen-activated protein kinases，簡(jiǎn)稱(chēng)MAPKs）和核內(nèi)NF-κB通路，啟動(dòng)IL-6、前列腺素E2、iNOS等炎癥介質(zhì)的基因轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)生[8-9]。目前，由MG激活引起的IL-1β、TNF-α分泌上調(diào)所致的腦高級(jí)功能的損害越來(lái)越受到學(xué)者們的關(guān)注。本研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)疲勞可顯著增加炎癥因子IL-1β、TNF-α以及炎癥介質(zhì)iNOS的分泌，并伴隨學(xué)習(xí)記憶能力的下降。然而，運(yùn)動(dòng)疲勞大鼠海馬腦區(qū)內(nèi)IL-1β、TNF-α和iNOS的上調(diào)是否與學(xué)習(xí)記憶功能下降有關(guān)，尚缺乏直接的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。根據(jù)現(xiàn)有的文獻(xiàn)報(bào)道，大致可將致炎因子造成學(xué)習(xí)記憶功能下降的可能機(jī)制歸為以下2個(gè)方面。（1）腦內(nèi)上調(diào)的IL-1β、TNF-α可與其受體結(jié)合，啟動(dòng)胞內(nèi)不同的信號(hào)通路，最終導(dǎo)致胞內(nèi)鈣超載，從而抑制LTP誘導(dǎo)。如TNF-α與TNF受體1（TNF-receptor 1，簡(jiǎn)稱(chēng)TNF-R1）結(jié)合后，上調(diào)α甲基惡唑丙酸（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid receptor，簡(jiǎn)稱(chēng)AMPA）受體的表達(dá)，激活由第二信使三磷酸肌醇（inositol 1，4，5-triphosphate，簡(jiǎn)稱(chēng)IP3）介導(dǎo)的信號(hào)通路，引起鈣離子大量?jī)?nèi)流[10]；IL-1β、TNF-α分別與膜受體IL-1R、TNF-R1和TNF-R2結(jié)合，激活Jun氨基末端激酶（jun N-terminal kinase，簡(jiǎn)稱(chēng)JNK）和p38促分裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase，簡(jiǎn)稱(chēng)p38 MAPKs）的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，造成突觸后NMDA受體磷酸化，觸發(fā)Ca2+大量?jī)?nèi)流，引起胞內(nèi)鈣超載[11-12]；TNF-α與TNF-R1的結(jié)合還可激活核內(nèi)NF-κB通路，啟動(dòng)iNOS基因的轉(zhuǎn)錄，引起iNOS表達(dá)的增加，促進(jìn)NO釋放，造成細(xì)胞凋亡和胞內(nèi)Ca2+濃度的升高[9，12]。（2）上調(diào)的IL-1β、TNF-α可抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞的谷氨酸（glutamate，簡(jiǎn)稱(chēng)Glu）轉(zhuǎn)運(yùn)功能，導(dǎo)致胞外Glu濃度升高，與膜上的G蛋白耦聯(lián)代謝型谷氨酸受體（metabotropic glutamate receptor，簡(jiǎn)稱(chēng)mGluR）結(jié)合，激活胞內(nèi)第二信使IP3，引起胞內(nèi)Ca2+的大量釋放[12]，也是造成LTP抑制的因素。在本研究的基礎(chǔ)上，今后將從胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的角度繼續(xù)深入研究神經(jīng)炎癥反應(yīng)導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶功能下降的可能機(jī)制，為闡明二者之間的相互關(guān)系提供直接的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

4 小結(jié)

反復(fù)力竭運(yùn)動(dòng)后，大鼠海馬小膠質(zhì)細(xì)胞處于激活狀態(tài)，海馬內(nèi)炎癥因子IL-1β、TNF-α及iNOS釋放增多，并伴隨有學(xué)習(xí)記憶能力的下降。提示，海馬腦區(qū)MG激活及其介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)，可能通過(guò)多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路參與了海馬LTP的抑制過(guò)程，也是導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)疲勞后大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降的重要因素之一。

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Exercise-induced Fatigue May Reduce Learning and Memory Function through Neuroinflammation Mediated byMicrogliaActivationinHippocampus

SUN Lina1，2，LIU Xiaoli2，QIAO Decai2
（1.School of PE，Taiyuan University of Technology，Taiyuan 030024，China；2.School of PE and Sport，Beijing Normal University，Beijing 100875，China）

Objective：To observe the effects of microglia morphology and expression of inflammation factors include interleukin 1 beta（IL-1β），tumor necrosis factor-alpha（TNF-α）and inducer type Nitric-Oxide Syntheses（iNOS）in SD rat hippocampus after repeated exhaustive exercise.Methods：Male SD rats were randomly divided into control group（CG）and exercise-induced fatigue group（EG）.Seven days of increasing load exercise to build exercise-induced fatigue model，CG group was not intervention.The immunohistochemistry were used to observe the morphological and the activation level of microglia.The expression of IL-1β，TNF-α and iNOS mRNA in hippocampus was detected with semi-quantitative RT-PCR，and the Y maze active avoidance behavior were used to detect the learning and memory ability.Results：Compared with CG group，the volume of microglia cells was larger，the soma became round，the protuberance was increased and the stained was darker.Statistical analysis that the area of positive cells and the staining gray level were significantly higher than in control group（P<0.05，P<0.01），while the expression of IL-1β，TNF-α and iNOS mRNA was also significantly higher than the control group（P<0.01）. And the learning and memory ability of rats in exercise-induced fatigue group was significantly lower than the control group（P<0.05，P<0.01）.Conclusions：After repeated exhaustive exercise，the microglia cells were activated，inflammation factors in rat hippocampus were increased and the learning and memory ability of rat was declined.The results indicate that the microglia activation caused by exercise-induced fatigue may induce neuroinflammation and it might be one of the important factors leading to the decline of learning and memory ability in rats.

microglia；exercise-induced fatigue；hippocampus；inflammation；the function of learning and memory

G 804.2

A

1005-0000（2014）03-190-04

2013-12-10；

2014-03-05；錄用日期：2014-03-06

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：31171138）

孫麗娜(1980-)，女，山西大同人，博士,講師，研究方向?yàn)檫\(yùn)動(dòng)與神經(jīng)調(diào)控；通信作者：?jiǎn)痰虏牛?957-），男，教授，博士，研究方向?yàn)檫\(yùn)動(dòng)與神經(jīng)調(diào)控。

1.太原理工大學(xué)體育學(xué)院，山西太原 030024；2.北京師范大學(xué)體育與運(yùn)動(dòng)學(xué)院，北京 100875。