陳芬 張曉飛 洪開聽 陳萍 劉曉光

2009—2012年舟山醫(yī)院送檢標(biāo)本中金黃色葡萄球菌的臨床分布和耐藥分析

陳芬 張曉飛 洪開聽 陳萍 劉曉光

目的 了解金黃色葡萄球菌（SAU）的臨床分布及耐藥情況。方法 收集2009—2012年微生物室分離培養(yǎng)的SAU，采用細(xì)菌鑒定分析儀及配套的鑒定條和藥敏條對菌株進(jìn)行鑒定和藥敏實驗。結(jié)果 共檢出672株SAU，其中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）365株，占54．3%，甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）307株，占45．7%。SAU主要分離自重癥監(jiān)護(hù)室、骨科和心血管科。MRSA主要分離自重癥監(jiān)護(hù)室、骨科和神經(jīng)內(nèi)科。痰標(biāo)本中分離的MRSA最多，其次為膿液分泌物。MRSA對大多數(shù)抗生素耐藥，其耐藥率＜50．0%的抗生素有利福平、萬古霉素、復(fù)方磺胺甲惡唑、喹奴普汀-達(dá)福普汀、替考拉寧和呋喃妥因等。MSSA對除青霉素外的大多數(shù)抗生素敏感。未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素菌株。結(jié)論 SAU臨床分布廣泛，MRSA檢出率較高，應(yīng)加強(qiáng)SAU耐藥性監(jiān)測。

金黃色葡萄球菌 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌 耐藥性 抗菌藥物

金黃色葡萄球菌（SAU）是感染常見致病菌，研究顯示，該菌已居醫(yī)院感染分離菌的第2位，成為醫(yī)院感染的主要致病菌之一[1]。近年來，由于抗生素的廣泛使用，SAU對青霉素、紅霉素等抗生素的耐藥率一直維持在較高水平[2]，尤其是出現(xiàn)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）后，其多藥耐藥性和交叉耐藥性加大了抗感染的治療難度，已受到全球衛(wèi)生界的廣泛關(guān)注[3]。因此，加強(qiáng)對SAU耐藥性監(jiān)測，及時了解醫(yī)院MRSA發(fā)展趨勢，對合理選用抗生素，有效控制其流行和傳播具有重要意義。筆者回顧了本院從門診及住院患者送檢的各類標(biāo)本中分離培養(yǎng)的672株SAU，對其分布和藥敏情況進(jìn)行分析比較，為抗生素的正確選用提供理論指導(dǎo)，現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法

1.1 菌株來源 2009-01—2012-12舟山醫(yī)院送檢的各種標(biāo)本中分離的672株SAU，包括痰液、膿液分泌物、潔尿、全血、穿刺液、胸水、引流液、前列腺液、腦脊液、組織、咽拭子、留置導(dǎo)管、膽汁等，同1例患者多次分離到的菌株不重復(fù)計入。

1.2 菌株鑒定及藥敏試驗方法 采用法國生物梅里埃公司AT月Expression細(xì)菌鑒定分析儀及配套的鑒定條和藥敏條，對菌株進(jìn)行鑒定和藥敏試驗。藥敏試驗判斷標(biāo)準(zhǔn)、結(jié)果解釋、MRSA檢測參照CLSI2009年標(biāo)準(zhǔn)[4]。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC25923。

2 結(jié)果

2.1 甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）和MRSA檢出情況 2009—2012年分離出的672株SAU中，MRSA 365株，占54.3%；MSSA 307株，占45.7%。4年間SAU檢出株數(shù)逐年增加，MRSA分離率呈先降后升的趨勢，詳見表1。

表1 2009—2012年MRSA和MSSA檢出情況[株（%）]

2.2 SAU臨床分布及MRSA、MSSA檢出率 重癥監(jiān)護(hù)室和骨科SAU檢出率最高，均占11.9%。MRSA檢出率重癥監(jiān)護(hù)室最高，其次為骨科和神經(jīng)內(nèi)科。MSSA檢出率骨科最高，其次為皮膚科，詳見表2。

2.3 SAU分離標(biāo)本來源構(gòu)成及MRSA、MSSA檢出率MRSA從痰中分離率最高，其次為膿液分泌物。MSSA痰中檢出率最高，其次為膿液分泌物，詳見表3。

2.4 MRSA和MSSA對常用抗生素的耐藥率 MRS A對青霉素和苯唑西林全部耐藥，紅霉素耐藥率4年均＞50.0%，對慶大霉素和四環(huán)素耐藥率均較高，對利福平、復(fù)方磺胺甲惡唑和喹奴普汀-達(dá)福普汀耐藥率較低。MRSA對替考拉寧治療有效，呋喃妥因耐藥率除2012年外均為0，至今尚未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素的MRSA。MSSA對青霉素基本耐藥，對紅霉素、慶大霉素、四環(huán)素和復(fù)方磺胺甲惡唑均有不同程度的耐藥率，對苯唑西林、替考拉寧、利福平、呋喃妥因、喹奴普汀-達(dá)福普汀和萬古霉素均較敏感，詳見表4。

3 討論

SAU是臨床上常見的致病菌之一，可引起局部化膿性感染，也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等，甚至敗血癥、膿毒癥等全身感染[5]，已成為醫(yī)院感染的主要病原菌之一。目前，MRSA在世界各地的感染和分離率明顯增加。1975年美國MRSA的分離率為2.4%，2002年已經(jīng)上升到50.0%[6]。本研究共檢出672株SAU，2009—2012年分離出MRSA分別為28、38、96、203株，檢出率分別為 50.0%、50.0%、49.5%、58.7%。2008年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測顯示MRSA在金黃色葡萄球菌感染中檢出率為55.9%（14.8%～77.5%），本研究的MRSA檢出率（54.3%），與文獻(xiàn)[7]報道基本一致。

表3 2009—2012年SAU分離標(biāo)本來源構(gòu)成及MRSA、MSSA檢出率[株（%）]

從感染部位看，本次調(diào)查中MRSA主要分離自下呼吸道標(biāo)本，其次是膿液分泌物、血標(biāo)本等，這與國內(nèi)報道[8]相符。從科室分布看，重癥監(jiān)護(hù)室和骨科SAU檢出率最高。重癥監(jiān)護(hù)室MRSA檢出率最高，其次為骨科和神經(jīng)內(nèi)科。此種現(xiàn)象與這些科室患者的疾病特點和治療方法密切相關(guān)。重癥監(jiān)護(hù)室患者大多病情危重，機(jī)體抵抗力弱，接受侵入性操作多，如呼吸機(jī)、導(dǎo)尿管和動靜脈插管等，破壞了皮膚黏膜的屏障作用，使得MRSA極易入侵。神經(jīng)內(nèi)科患者使用抗生素品種多、時間長，也極易感染MRSA。骨科患者多數(shù)為膿液和分泌物培養(yǎng)，而SAU是化膿性感染的常見菌之一，因此骨科MRSA檢出率也很高。此外，醫(yī)療環(huán)境不良如感染的患者、攜帶者、污染的空氣、污染的醫(yī)療器械和帶菌工作人員，同樣是MRSA醫(yī)院感染的重要環(huán)節(jié)。因此，加強(qiáng)重點科室的空氣、物體表面、醫(yī)療器械和工作人員手衛(wèi)生的監(jiān)測和管理，做好醫(yī)院感染工作，控制感染源，切斷傳播途徑，有效地保護(hù)易感人群，是降低院內(nèi)感染MRSA的重要措施。

本研究顯示，MRSA耐藥率顯著高于MSSA。MRSA除對萬古霉素和替考拉寧100%敏感外，對青霉素、苯唑西林、紅霉素和四環(huán)素均維持較高的耐藥性。據(jù)報道，MRSA耐藥性產(chǎn)生的主要機(jī)制有2種[8]：一種是質(zhì)粒介導(dǎo)的獲得性耐藥，主要是由于細(xì)菌產(chǎn)生大量β-內(nèi)酰胺酶，使青霉素及頭孢類抗生素緩慢失活，表現(xiàn)為耐藥；另一種是由于青霉素結(jié)合蛋白（P月Ps）改變所致，MRSA表達(dá)一種新的P月P即P月P2a，代替正常的P月Ps功能合成細(xì)胞壁，使細(xì)菌仍能生長，導(dǎo)致耐藥。臨床大量、不合理使用抗生素是細(xì)菌整合分子進(jìn)化和捕獲更多的耐藥基因的重要原因。萬古霉素仍然是臨床上公認(rèn)的治療MRSA感染的首選抗生素，加強(qiáng)聯(lián)合用藥是治療MRSA感染的有效方法。微生物實驗室要加強(qiáng)對SAU耐藥性的動態(tài)監(jiān)測，及時掌握住院患者M(jìn)RSA感染狀況和耐藥分布，更好地為臨床報告可靠的藥敏信息，指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物，延緩耐藥菌株的產(chǎn)生。

表4 2009—2012年分離的MRSA和MSSA對抗生素的耐藥率（%）

[1]李月翠．5年中金黃色葡萄球菌的藥敏及分離率變遷分析[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2007,17(1)：83-85．

[2]朱德妹,胡付品,汪復(fù),等．2007年中國CHINET葡萄球菌屬耐藥性監(jiān)測[J]．中國感染與化療雜志,2009,9(3)：168-174．

[3]李元君,余良芳,王東杰．178株金黃色葡萄球菌的耐藥性分析 [J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,21(7)：1468-1469．

[4] Clinical and Laboratory Standards Institute．Performance standards for antimicrobial susceptibility testing standards;nineteenth informational supplement[S]．CLSI,M100-S19,2009．

[5]張玉萍,裘霞雯．327株金黃色葡萄球菌耐藥性分析[J]．實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2008,26(1)：87．

[6]Oldfield E C．No mercy from MRSA[J]．Rew Gastroenterol Disord, 2004,4(2)：95-96．

[7]汪復(fù),朱德妹,胡付品,等．2008年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J]．中國感染與化療雜志,2009,9(5)：321-329．

[8]張和平,王萍,甘強(qiáng),等．168株金黃色葡萄球菌的臨床分布與耐藥分析[J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(24)：3355-3356．

Distribution and drug resistance of Staphylococcus aureus in Zhoushan during 2009-2012

ObjectiveTo investigate the distribution and drug resistance of Staphylococcus aureus(SAU)in Zhoushan during 2009—2012．Method SAU isolates from Zhoushan hospitals during 2009 to 2012 were identified with automatic microorganism analyzer and the drug susceptibility testing was performed by using matched ATB-test paper．Results Total 672 strains of SAU were isolated including 365 strains of methicillin resistant Staphylococcus aureus(MRSA)and 307strains of methicillin susceptible Staphylococcus aureus(MSSA)．Of all SAU strains,80 were isolated from intensive care unit(ICU),80 from department of orthopedics and 50 from cardiovascular department．Of all MRSA strains,55 were isolated from ICU,36 from department of orthopedics and 35 from neurology department．Among all MRSA 175 strains were isolated from sputum samples,124 from fester secretion．MRSA were resistant to most antimicrobial agents,the resistance rates to rifampicin,vancomycin,compound sulfamethoxazole,quinoline slave leptin-dufour leptin,teicoplanin and furantoin were below 50．0%．MSSA were sensitive to most antimicrobial agents,except penicillin．No resistant to vancomycin strains were found in this study．Conclusion The clinical distribution of SAU was extensive in Zhoushan hospitals and the isolation rate of MRSA is high．

Staphylococcus aureus Methicillin resistant Staphylococcus aureus Methicillin susceptible Staphylococcus aureus Drug resistance Antimicrobial agents

2013-12-09）

（本文編輯：嚴(yán)瑋雯）

325000 溫州醫(yī)科大學(xué)（陳芬為在職研究生，目前在舟山醫(yī)院檢驗中心工作）；舟山醫(yī)院檢驗中心（張曉飛、洪開聽、陳萍）；溫州醫(yī)科大學(xué)細(xì)胞分子生物學(xué)實驗室（劉曉光）

劉曉光，E-mail：lxg2004@foxmail.com