劉艷清， 汪洪武， 蔡 璇

（1.肇慶學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院， 廣東 肇慶 526061； 2.肇慶出入境檢驗(yàn)檢疫局， 廣東 肇慶 526040）

不同方法提取烏墨葉揮發(fā)油化學(xué)成分的研究

劉艷清， 汪洪武1， 蔡 璇2

（1.肇慶學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院， 廣東 肇慶 526061； 2.肇慶出入境檢驗(yàn)檢疫局， 廣東 肇慶 526040）

目的 研究烏墨葉揮發(fā)油的化學(xué)成分。方法 采用水蒸氣蒸餾與超聲波萃取分別提取烏墨葉揮發(fā)油，運(yùn)用毛細(xì)管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法結(jié)合計(jì)算機(jī)檢索對(duì)其揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行了分析。 結(jié)果 顯示從水蒸汽蒸餾法和超聲波萃取所得揮發(fā)油中分別鑒定出了 34 和 37 種化合物。 用面積歸一法測(cè)定了 2 種揮發(fā)油中各種成分的相對(duì)百分含有量， 各占總峰面積的 97.31%和 98.19%。 2 種揮發(fā)油化學(xué)組成各有異同， 其主要成分為 α-蒎烯、 β-杜松烯、 α-古蕓烯、 丁香烯、 α-蛇麻烯、 β-芹子烯、 異長葉烯-5-酮、 韋得醇、 1，4a-二甲基-7-異丙烯基-4，4a，5，6，7，8-六氫-萘-2-酮。 結(jié)論 不同提取方法所得烏墨葉揮發(fā)油化學(xué)成分存在差異，但主要成分基本相同。

烏墨； 揮發(fā)油； 水蒸氣蒸餾； 超聲波輔助提?。?氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

烏墨 Syzygium cumini（ L.） Skeels， 又稱烏楣， 海南蒲桃， 為桃金娘 科 Myrtaceae， 蒲桃屬 Syzygium［1］， 是藥用主要輔助蜜粉源植物，常綠喬木。烏墨富含黃酮及黃酮苷類、花青素類、 酚類、 β-谷甾醇、 蒲桃堿、 樺木酸、 齊墩果酸、鞣酸、 烷烴和醇類等主要成分［2-5］。 現(xiàn)代研究表明， 烏墨具有治療 糖 尿 病［6-8］、 殺 螨 蟲［9］、 抑 菌［10-11］、 抗 氧 化［12-13］、清除自由基［14］、 抗失憶［15］、 預(yù)防基因 損傷及氧化 應(yīng)激［16］等多種活性， 葉油具有抑菌活性［17］。 Vijayanand 等［18］對(duì)烏墨果實(shí)的揮發(fā)油進(jìn)行了研究，但鮮見烏墨葉揮發(fā)油化學(xué)成分的報(bào)道。

為了更好利用烏墨資源，擴(kuò)大其藥用部位，本實(shí)驗(yàn)對(duì)烏墨干葉分別采用水蒸氣蒸餾法和超聲波萃取法進(jìn)行揮發(fā)油提取，采用毛細(xì)管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法分析其化學(xué)成分，比較所得各揮發(fā)油化學(xué)成分，以便更好地開發(fā)利用烏墨資源。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料 揮發(fā)油提取器； Agilent 7890A-5975C氣-質(zhì)聯(lián)用儀 （ 美國 Agilent（ 安 捷 倫） 科 技 公司） ， SK8200H臺(tái)式超聲波清洗器 （上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）。

烏墨， 2012 年 7 月采自校園內(nèi)， 經(jīng)肇慶學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 陳 雄 偉 副 教 授 鑒 定 為 Syzygium cumini（ L.） Skeels的葉。

1.2 揮發(fā)油的提取

1.2.1 水蒸氣蒸餾法 稱取 100 g烏墨干葉， 于揮發(fā)油提取器中， 加水 1 000 mL， 按 《中國藥典》 2010 年版提取植物精油的方法［19］， 水蒸氣蒸餾 5 h， 收集揮發(fā)油， 得黃色透明、 濃郁香味的油狀液體， 揮發(fā)油收率為 0.12%。

1.2.2 超聲波輔助提取法 參考文獻(xiàn) ［20］， 即稱取 100 g烏墨干葉于 1 L圓底燒瓶中， 加入500 mL正戊烷， 置于超聲波清洗器中， 選用 60%的功率于 50 ℃水浴超聲震蕩50 min后， 過濾， 回收溶劑， 得黃色透明、 濃郁香味油狀液體， 揮發(fā)油收率為 0.13%。

1.3 GC-MS 分析條件 氣相色譜條件： DB-5ms石英毛細(xì)管柱 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）； 升溫程序從 70 ℃開始， 保溫 2 min， 以 20 ℃ /min 升 溫 到 120 ℃， 然 后 以2 ℃ /min 升溫到 200 ℃， 最后以 30 ℃ /min 升溫到 250 ℃，保溫 1 min。 汽化室溫度 240 ℃； 載氣為高純氦氣； 載氣體積流量 0.75 mL/min； 分流比 30 ∶1， 進(jìn)樣量 1.0 μL。

質(zhì)譜條件： 電離方式為 EI， 燈絲電流 0.6 mA； 電子能量 70 eV， 倍增器電壓1.0 kV， 離子源溫度200 ℃， 掃描周期 0.5 s， 溶劑延遲 3 min。

1.4 分析 分別取 1.0 μL揮發(fā)油， 用氣相色譜 -質(zhì)譜進(jìn)行分析鑒定。所得各色譜峰經(jīng)峰純度檢測(cè)，并將得到的質(zhì)譜數(shù)據(jù)經(jīng) NIST’ 05.L質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索， 以確認(rèn)揮發(fā)油中各化學(xué)成分。 然后通過 Agilent ChemStation 化學(xué)工作站， 按照峰面積歸一法進(jìn)行定量分析，求出不同揮發(fā)油中各化學(xué)成分的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

2 結(jié)果與討論

不同方法提取所得烏墨葉揮發(fā)油化學(xué)組分經(jīng) GC-MS 測(cè)定， 結(jié)果見圖 1、 圖 2 及表 1。

由表1可知，烏墨葉水蒸氣蒸餾法所得揮發(fā)油中共鑒定出 34 種化合物， 占總峰面積的 97.31%， 其中單萜 7種， 占 19.77%； 單萜氧化物 5 種， 占 8.78%； 倍半萜8 種， 占 31.18%； 倍半萜氧化物 10 種， 占 32.36%； 其他5 種， 占 5.04%。 在所鑒定出的化合物中， 丁香烯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)高達(dá) 11.24%， 其次是 α-蛇麻烯 （10.36%）、 1，4a-二甲基-7-異 丙 烯 基-4， 4a， 5， 6， 7， 8-六 氫-萘-2-酮 （ 8.01%） 、異長葉烯-5-酮 （6.91%） 和 α-蒎烯 （6.40%）。

圖1 水蒸汽提取烏墨葉揮發(fā)油總離子流色譜圖

圖2 超聲波提取烏墨葉揮發(fā)油總離子流色譜圖

表1 不同方法所得烏墨葉揮發(fā)油成分表

續(xù)表1

而烏墨葉超聲波法所得揮發(fā)油中共鑒定出 37種化合物， 占總峰面積的 98.19%， 其中單萜類化合物 6 種， 占10.38%； 單萜氧化物 5 種， 占 10.45%； 倍半萜 10 種， 占32.14%； 倍半萜氧化物 13 種， 占 41.06%； 其他 3 種， 占4.16%。 在鑒定出的 37 種化合物中， α-古蕓烯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高， 達(dá) 8.05%， 其次是 1，4a-二甲基-7-異丙烯基-4，4a，5，6，7，8-六 氫-萘-2-酮 （ 7.81%）、 異 長 葉 烯-5-酮 （ 7.23%） 、β-杜 松 烯 （ 6.41%）、 韋 得 醇 （ 5.66%） 和 β-芹 子 烯（4.36%）。

兩種方法共鑒定出41種化合物， 不同提取方法烏墨葉揮發(fā)油成分存在差異， 其中丁香烯、 α-蛇麻烯、 1，4a-二甲基-7-異丙 烯 基-4，4a，5，6， 7， 8-六 氫-萘-2-酮、 異 長 葉 烯-5-酮、 α-蒎烯、 α-松油醇、 b-香葉烯、 α-古蕓烯、 喇叭茶醇、橙花叔醇、 （-） 藍(lán)桉醇、 馬兜鈴?fù)?β-杜松烯、 石竹烯氧化物、 b-沒藥醇、 反-羅勒烯、 β-芹子烯、 桃金娘醇、 反-Z-α-甜沒藥烯氧化物、 β-桉葉烯 30 種化合物為 2 種揮發(fā)油共有，但所占的質(zhì)量分?jǐn)?shù)具有一定差異。

α-蒎烯、 β-杜松烯、 α-古蕓烯、 丁香烯、 α-蛇麻烯、 β-芹子烯、 異長葉烯-5-酮、 韋得醇、 1，4a-二甲基-7-異丙烯基-4，4a，5，6，7，8-六氫-萘-2-酮等為烏墨葉的主要成分 （見表2）。 而 α-蒎 烯、 β-蒎 烯、 β-檸 檬 烯、 β-香 葉 烯、 反-羅 勒烯、 二氫香芹酮、 桃金娘醇、 α-松油醇、 β-杜松烯、 α-古蕓烯、 丁香烯、 α-蛇麻烯、 β-桉葉烯、 β-芹子烯、 δ-杜松烯、 橙花叔醇、 石竹烯氧化物、 反-α-甜沒藥烯氧化物、 喇叭茶醇、 馬兜鈴?fù)?（-） 藍(lán)桉醇、 異長葉烯-5-酮、 韋得醇、1，4a-二甲基-7-異丙烯基-4，4a，5，6，7，8-六氫-萘-2-酮、 β-沒藥醇等構(gòu)成了烏墨的特有香味。烏墨葉揮發(fā)油主要成分見表 2。 所得結(jié)果與 Vijayanand 等人所研究的果實(shí)揮發(fā)油成分具有較大差別， 果實(shí)揮發(fā)油的主要成分是順式-羅勒烯（29.95%）、 反式-羅勒烯 （23.03%）、 β-月桂烯 （6.99%）α-松油醇 （6.46%）。 說明不同部位揮發(fā)油的成分具有一定差異。

3 結(jié)論

不同提取方法所得烏墨葉揮發(fā)油化學(xué)成分存在差異，但主要成分基本相同， 均為 α-蒎烯、 β-杜松烯、 α-古蕓烯、丁香烯、 α-蛇 麻烯、 β-芹子 烯、 異長葉烯-5-酮、 韋 得 醇、1，4a-二甲基-7-異丙烯基-4，4a，5，6，7，8-六氫-萘-2-酮， 但所占的質(zhì)量分?jǐn)?shù)具有一定差異。

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R284.1

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： 1001-1528（2014）05-1091-04

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2013-08-05

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目 （2011B020314011）； 廣東 省自然科學(xué) 基金項(xiàng)目 （S2011010004004）； 肇慶市科 技計(jì)劃項(xiàng)目（2011C005）； 肇慶市科技創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目 （2012G25）

劉艷清 （1973—） ， 女， 博士， 副教授， 研究方向： 天然產(chǎn)物化學(xué)。 E-mail： yqliu@zqu.edu.cn