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        花葉豆瓣綠組培技術研究

        2014-04-09 14:35:00黃靖
        安徽農(nóng)學通報 2014年6期
        關鍵詞:生長調節(jié)劑組織培養(yǎng)

        黃靖

        摘 要:以花葉豆瓣綠品種的葉片、葉柄、莖段為外植體接種于MS附加不同激素的培養(yǎng)基中誘導愈傷組織,并進一步誘導分化出芽及再生植株,結果表明:葉柄誘導效果好于葉片及莖段,MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L配方最適宜初代誘導。誘導獲得的愈傷組織在MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L的培養(yǎng)基上進一步分化成苗,以無根苗培養(yǎng)在1/2 MS+NAA 0.2mg/L的培養(yǎng)基中,經(jīng)23d培養(yǎng)生根。

        關鍵詞:花葉豆瓣綠;組織培養(yǎng);生長調節(jié)劑

        中圖分類號 S68 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2014)06-36-03

        花葉豆瓣綠(Peperomia obtusifoli)又名花葉椒草,屬胡椒科豆瓣綠屬變種,多年生草本植物。花葉型植株無主莖,葉簇生,近肉質較肥厚,倒卵形,其葉中部綠色,邊緣為一闊金黃色鑲邊。常用塑料盆、白瓷盆栽培,置于茶幾、裝飾柜、博古架、辦公桌上,十分美麗。多適用于室內觀賞,在我國南方亦可作為地被植物栽植。

        花葉豆瓣綠很難獲得種子,故以無性繁殖為主。其無性繁殖有2種方法:一種為水插,只要溫度適宜,一年四季均可進行繁殖,簡單,成活率較高;另一種為土插,但由于豆瓣綠生長緩慢,采用此法扦插繁殖培養(yǎng)周期長,增殖系數(shù)低[1]。本實驗在前人研究的基礎上,進一步試驗了花葉豆瓣綠組織培養(yǎng)和工廠化快繁程序,以篩選出適合花葉豆瓣綠組織培養(yǎng)快速繁殖的最佳外植體,建立花葉豆瓣綠組培快繁技術體系,以期探索出利于花葉豆瓣綠工廠化生產(chǎn)的有效途徑[2-3]。

        1 材料與方法

        1.1 材料 供試材料取自福州建新園藝場,選取生長健壯、無病蟲危害的盆栽花葉豆瓣綠品種。

        1.2 材料處理 將剪取的花葉豆瓣綠葉片、葉柄、莖段用自來水流水沖洗,后置于75%酒精中30s,倒去酒精,用無菌水漂洗,轉入0.1%HgCl2中分別消毒4min、6min、8min、10min、12min,用無菌水漂洗5~8次,將葉片切為0.5~0.7cm2的方塊,將葉柄、莖段切為0.3~0.5cm的小節(jié)備用。

        1.3 培養(yǎng)基配制 以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,不同階段附加不同濃度的BA、NAA等生長調節(jié)劑(表1~3)。培養(yǎng)基煮沸后調pH值至5.8,注入容器中,封口后置于高壓鍋中在121℃,1.1kg/cm2下滅菌30min。

        1.4 培養(yǎng)條件 將處理好的花葉豆瓣綠葉片切塊與莖段分別接種在不同配方培養(yǎng)基上,置于光照培養(yǎng)室內,室溫保持25±2℃,光照強度1 500~2 000lx,光照時間12h/d的條件下誘導。

        1.5 繼代增殖培養(yǎng) 將形成的愈傷組織轉移到含⑤、⑥培養(yǎng)基中培養(yǎng),每瓶接種3塊,培養(yǎng)25d左右后,將形成的叢生芽繼續(xù)分割接種,進一步擴大增殖。

        1.6 生根培養(yǎng) 選擇生長健壯的小苗移至1/2 MS+NAA 0.2mg/L的生根培養(yǎng)基上,觀察記錄生根和小苗生長狀況,并統(tǒng)計生根率。

        1.7 小苗移栽 為了使小苗適應盆載環(huán)境,可將已經(jīng)生根的試管苗在室溫下開瓶練苗3~5d。取出試管苗,將小苗根部附著的培養(yǎng)基用清水洗凈,移入育苗盆中,培養(yǎng)土用消毒過的蛭石及泥炭土。

        1.8 觀察記載 接種后每隔10d觀察一次,記錄成活數(shù)、污染率、出愈綠、萌芽率、生根率等情況。

        2 結果與分析

        2.1 消毒時間對花葉豆瓣綠無菌系建立的影響 外植體不同消毒時間處理效果如表3所示。通過表3數(shù)據(jù)可見,消毒時間不宜少于8min,消毒4min和消毒6min的外植體的污染率顯著高于其他消毒時間的外植體的污染率。而消毒12min,HgCl2殘留難以清洗,外植體全部死亡。經(jīng)比較可知,消毒時間在8~10min為最優(yōu)。

        2.2 不同外植體的選擇 外植體接入時采用了葉片、葉柄與莖段3個部分,經(jīng)過觀察記錄如表4所示。在相同條件下,葉柄分化速度較快,葉片其次,莖段較慢。但葉片褐化問題較其他部位嚴重。因此,從外植體來源上看,以葉柄效果最好,且誘導時間短,增殖率高。

        2.3不同激素配比對愈傷組織誘導的影響 將消毒后的豆瓣綠葉柄外植體分別接入培養(yǎng)基①、②、③、④中,培養(yǎng)25d以后葉柄切口及基部周圍產(chǎn)生黃綠色愈傷組織。具體情況如表5所示。由表5可見,在不同激素配比和添加物情況下,花葉豆瓣綠葉柄的成芽率不同。在①、②、③培養(yǎng)基配比中,隨著BA與NAA使用比例提高,出愈率有顯著提升,但在④號培養(yǎng)基中BA用量超過一定比例時,出愈率顯著下降。因此,花葉豆瓣綠誘導最適配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L。

        2.4 不同培養(yǎng)基對芽增殖的影響 外植體產(chǎn)生小苗以后,繼續(xù)采用同樣的培養(yǎng)基做繼代增殖,小苗高2~3cm時將轉移的叢生小苗切成較小的叢,或將較大的苗再切碎,分別在⑤、⑥、⑦培養(yǎng)基上培養(yǎng)30~40d,愈傷組織開始分化出芽,后增殖得到更多的叢生苗。三組激素配比中以⑥號效果最優(yōu)。因此,花葉豆瓣綠最佳增殖配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L。

        2.5 根的誘導 選取生長健壯的2~3cm小苗,移植到生根培養(yǎng)基1/2 MS+ NAA 0.2mg/L上。一般在23d左右便可生根,根長度多為1~2cm。

        2.6 移栽 選擇生長健壯、無玻璃化現(xiàn)象、根長2~3cm、高4~5cm的生根苗進行移栽。移栽前把培養(yǎng)瓶打開后于室溫下煉苗。一周后將苗從培養(yǎng)基中拔起,將根部培養(yǎng)基清除干凈后再移植入培養(yǎng)土中。培養(yǎng)土選用消毒過的泥炭土+蛭石,加強溫濕管理,通常情況下移栽成活率可達100%。

        3 結論與討論

        (1)花葉豆瓣綠的葉片、葉柄、莖段等均可作為外植體培養(yǎng)成功,在誘導時間上,各部位外植體差異并不大,誘導效果上葉柄較好,同等條件下葉片作為外植體雖然褐化率較高,但其為相對值,絕對值尚在可接受范圍。考慮到葉片最易獲取,在工廠化快繁中也可用葉片代替葉柄。

        (2)植物激素是培養(yǎng)基中關鍵物質,在基本培養(yǎng)基確定的前提下,篩選合適的激素種類和激素配比是組織培養(yǎng)成功與否的關鍵。綜上所述,花葉豆瓣綠快繁的基本培養(yǎng)基為Ms培養(yǎng)基,誘導愈傷組織的最適配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L;叢生芽增殖的最優(yōu)配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L;生根配方為:1/2 MS+NAA 0.2mg/L。

        (3)花葉豆瓣綠的組培快繁潛力很大。理論上,花葉豆瓣綠每次增殖可達10~20倍,在1a內通過組培繁殖出幾十萬株苗是實際可行的。如能做到培養(yǎng)過程中初代誘導、繼代增殖、生根都可在同一培養(yǎng)基上進行,一次成苗將大大提高花葉豆瓣綠大批量商業(yè)生產(chǎn)的效率,從而獲得更好的經(jīng)濟效益。

        參考文獻

        [1]王濤,彭立新.豆瓣綠的組織培養(yǎng)與快速繁殖研究[J].天津農(nóng)學院學報,2011,18(2):1-5.

        [2]蔡明,李樹貴.豆瓣綠葉片再生植株[J].西南園藝,2001,29(4):43.

        [3]蔣澤平,朱鹿鳴.豆瓣綠試管苗快速繁殖 [J].江蘇林業(yè)科技,1990(1):14-15.

        [4]譚文澄,戴策剛.觀賞植物組織培養(yǎng)技術[M].北京:中國林業(yè)出版社,2000. (責編:施婷婷)endprint

        摘 要:以花葉豆瓣綠品種的葉片、葉柄、莖段為外植體接種于MS附加不同激素的培養(yǎng)基中誘導愈傷組織,并進一步誘導分化出芽及再生植株,結果表明:葉柄誘導效果好于葉片及莖段,MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L配方最適宜初代誘導。誘導獲得的愈傷組織在MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L的培養(yǎng)基上進一步分化成苗,以無根苗培養(yǎng)在1/2 MS+NAA 0.2mg/L的培養(yǎng)基中,經(jīng)23d培養(yǎng)生根。

        關鍵詞:花葉豆瓣綠;組織培養(yǎng);生長調節(jié)劑

        中圖分類號 S68 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2014)06-36-03

        花葉豆瓣綠(Peperomia obtusifoli)又名花葉椒草,屬胡椒科豆瓣綠屬變種,多年生草本植物?;ㄈ~型植株無主莖,葉簇生,近肉質較肥厚,倒卵形,其葉中部綠色,邊緣為一闊金黃色鑲邊。常用塑料盆、白瓷盆栽培,置于茶幾、裝飾柜、博古架、辦公桌上,十分美麗。多適用于室內觀賞,在我國南方亦可作為地被植物栽植。

        花葉豆瓣綠很難獲得種子,故以無性繁殖為主。其無性繁殖有2種方法:一種為水插,只要溫度適宜,一年四季均可進行繁殖,簡單,成活率較高;另一種為土插,但由于豆瓣綠生長緩慢,采用此法扦插繁殖培養(yǎng)周期長,增殖系數(shù)低[1]。本實驗在前人研究的基礎上,進一步試驗了花葉豆瓣綠組織培養(yǎng)和工廠化快繁程序,以篩選出適合花葉豆瓣綠組織培養(yǎng)快速繁殖的最佳外植體,建立花葉豆瓣綠組培快繁技術體系,以期探索出利于花葉豆瓣綠工廠化生產(chǎn)的有效途徑[2-3]。

        1 材料與方法

        1.1 材料 供試材料取自福州建新園藝場,選取生長健壯、無病蟲危害的盆栽花葉豆瓣綠品種。

        1.2 材料處理 將剪取的花葉豆瓣綠葉片、葉柄、莖段用自來水流水沖洗,后置于75%酒精中30s,倒去酒精,用無菌水漂洗,轉入0.1%HgCl2中分別消毒4min、6min、8min、10min、12min,用無菌水漂洗5~8次,將葉片切為0.5~0.7cm2的方塊,將葉柄、莖段切為0.3~0.5cm的小節(jié)備用。

        1.3 培養(yǎng)基配制 以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,不同階段附加不同濃度的BA、NAA等生長調節(jié)劑(表1~3)。培養(yǎng)基煮沸后調pH值至5.8,注入容器中,封口后置于高壓鍋中在121℃,1.1kg/cm2下滅菌30min。

        1.4 培養(yǎng)條件 將處理好的花葉豆瓣綠葉片切塊與莖段分別接種在不同配方培養(yǎng)基上,置于光照培養(yǎng)室內,室溫保持25±2℃,光照強度1 500~2 000lx,光照時間12h/d的條件下誘導。

        1.5 繼代增殖培養(yǎng) 將形成的愈傷組織轉移到含⑤、⑥培養(yǎng)基中培養(yǎng),每瓶接種3塊,培養(yǎng)25d左右后,將形成的叢生芽繼續(xù)分割接種,進一步擴大增殖。

        1.6 生根培養(yǎng) 選擇生長健壯的小苗移至1/2 MS+NAA 0.2mg/L的生根培養(yǎng)基上,觀察記錄生根和小苗生長狀況,并統(tǒng)計生根率。

        1.7 小苗移栽 為了使小苗適應盆載環(huán)境,可將已經(jīng)生根的試管苗在室溫下開瓶練苗3~5d。取出試管苗,將小苗根部附著的培養(yǎng)基用清水洗凈,移入育苗盆中,培養(yǎng)土用消毒過的蛭石及泥炭土。

        1.8 觀察記載 接種后每隔10d觀察一次,記錄成活數(shù)、污染率、出愈綠、萌芽率、生根率等情況。

        2 結果與分析

        2.1 消毒時間對花葉豆瓣綠無菌系建立的影響 外植體不同消毒時間處理效果如表3所示。通過表3數(shù)據(jù)可見,消毒時間不宜少于8min,消毒4min和消毒6min的外植體的污染率顯著高于其他消毒時間的外植體的污染率。而消毒12min,HgCl2殘留難以清洗,外植體全部死亡。經(jīng)比較可知,消毒時間在8~10min為最優(yōu)。

        2.2 不同外植體的選擇 外植體接入時采用了葉片、葉柄與莖段3個部分,經(jīng)過觀察記錄如表4所示。在相同條件下,葉柄分化速度較快,葉片其次,莖段較慢。但葉片褐化問題較其他部位嚴重。因此,從外植體來源上看,以葉柄效果最好,且誘導時間短,增殖率高。

        2.3不同激素配比對愈傷組織誘導的影響 將消毒后的豆瓣綠葉柄外植體分別接入培養(yǎng)基①、②、③、④中,培養(yǎng)25d以后葉柄切口及基部周圍產(chǎn)生黃綠色愈傷組織。具體情況如表5所示。由表5可見,在不同激素配比和添加物情況下,花葉豆瓣綠葉柄的成芽率不同。在①、②、③培養(yǎng)基配比中,隨著BA與NAA使用比例提高,出愈率有顯著提升,但在④號培養(yǎng)基中BA用量超過一定比例時,出愈率顯著下降。因此,花葉豆瓣綠誘導最適配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L。

        2.4 不同培養(yǎng)基對芽增殖的影響 外植體產(chǎn)生小苗以后,繼續(xù)采用同樣的培養(yǎng)基做繼代增殖,小苗高2~3cm時將轉移的叢生小苗切成較小的叢,或將較大的苗再切碎,分別在⑤、⑥、⑦培養(yǎng)基上培養(yǎng)30~40d,愈傷組織開始分化出芽,后增殖得到更多的叢生苗。三組激素配比中以⑥號效果最優(yōu)。因此,花葉豆瓣綠最佳增殖配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L。

        2.5 根的誘導 選取生長健壯的2~3cm小苗,移植到生根培養(yǎng)基1/2 MS+ NAA 0.2mg/L上。一般在23d左右便可生根,根長度多為1~2cm。

        2.6 移栽 選擇生長健壯、無玻璃化現(xiàn)象、根長2~3cm、高4~5cm的生根苗進行移栽。移栽前把培養(yǎng)瓶打開后于室溫下煉苗。一周后將苗從培養(yǎng)基中拔起,將根部培養(yǎng)基清除干凈后再移植入培養(yǎng)土中。培養(yǎng)土選用消毒過的泥炭土+蛭石,加強溫濕管理,通常情況下移栽成活率可達100%。

        3 結論與討論

        (1)花葉豆瓣綠的葉片、葉柄、莖段等均可作為外植體培養(yǎng)成功,在誘導時間上,各部位外植體差異并不大,誘導效果上葉柄較好,同等條件下葉片作為外植體雖然褐化率較高,但其為相對值,絕對值尚在可接受范圍。考慮到葉片最易獲取,在工廠化快繁中也可用葉片代替葉柄。

        (2)植物激素是培養(yǎng)基中關鍵物質,在基本培養(yǎng)基確定的前提下,篩選合適的激素種類和激素配比是組織培養(yǎng)成功與否的關鍵。綜上所述,花葉豆瓣綠快繁的基本培養(yǎng)基為Ms培養(yǎng)基,誘導愈傷組織的最適配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L;叢生芽增殖的最優(yōu)配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L;生根配方為:1/2 MS+NAA 0.2mg/L。

        (3)花葉豆瓣綠的組培快繁潛力很大。理論上,花葉豆瓣綠每次增殖可達10~20倍,在1a內通過組培繁殖出幾十萬株苗是實際可行的。如能做到培養(yǎng)過程中初代誘導、繼代增殖、生根都可在同一培養(yǎng)基上進行,一次成苗將大大提高花葉豆瓣綠大批量商業(yè)生產(chǎn)的效率,從而獲得更好的經(jīng)濟效益。

        參考文獻

        [1]王濤,彭立新.豆瓣綠的組織培養(yǎng)與快速繁殖研究[J].天津農(nóng)學院學報,2011,18(2):1-5.

        [2]蔡明,李樹貴.豆瓣綠葉片再生植株[J].西南園藝,2001,29(4):43.

        [3]蔣澤平,朱鹿鳴.豆瓣綠試管苗快速繁殖 [J].江蘇林業(yè)科技,1990(1):14-15.

        [4]譚文澄,戴策剛.觀賞植物組織培養(yǎng)技術[M].北京:中國林業(yè)出版社,2000. (責編:施婷婷)endprint

        摘 要:以花葉豆瓣綠品種的葉片、葉柄、莖段為外植體接種于MS附加不同激素的培養(yǎng)基中誘導愈傷組織,并進一步誘導分化出芽及再生植株,結果表明:葉柄誘導效果好于葉片及莖段,MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L配方最適宜初代誘導。誘導獲得的愈傷組織在MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L的培養(yǎng)基上進一步分化成苗,以無根苗培養(yǎng)在1/2 MS+NAA 0.2mg/L的培養(yǎng)基中,經(jīng)23d培養(yǎng)生根。

        關鍵詞:花葉豆瓣綠;組織培養(yǎng);生長調節(jié)劑

        中圖分類號 S68 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731(2014)06-36-03

        花葉豆瓣綠(Peperomia obtusifoli)又名花葉椒草,屬胡椒科豆瓣綠屬變種,多年生草本植物。花葉型植株無主莖,葉簇生,近肉質較肥厚,倒卵形,其葉中部綠色,邊緣為一闊金黃色鑲邊。常用塑料盆、白瓷盆栽培,置于茶幾、裝飾柜、博古架、辦公桌上,十分美麗。多適用于室內觀賞,在我國南方亦可作為地被植物栽植。

        花葉豆瓣綠很難獲得種子,故以無性繁殖為主。其無性繁殖有2種方法:一種為水插,只要溫度適宜,一年四季均可進行繁殖,簡單,成活率較高;另一種為土插,但由于豆瓣綠生長緩慢,采用此法扦插繁殖培養(yǎng)周期長,增殖系數(shù)低[1]。本實驗在前人研究的基礎上,進一步試驗了花葉豆瓣綠組織培養(yǎng)和工廠化快繁程序,以篩選出適合花葉豆瓣綠組織培養(yǎng)快速繁殖的最佳外植體,建立花葉豆瓣綠組培快繁技術體系,以期探索出利于花葉豆瓣綠工廠化生產(chǎn)的有效途徑[2-3]。

        1 材料與方法

        1.1 材料 供試材料取自福州建新園藝場,選取生長健壯、無病蟲危害的盆栽花葉豆瓣綠品種。

        1.2 材料處理 將剪取的花葉豆瓣綠葉片、葉柄、莖段用自來水流水沖洗,后置于75%酒精中30s,倒去酒精,用無菌水漂洗,轉入0.1%HgCl2中分別消毒4min、6min、8min、10min、12min,用無菌水漂洗5~8次,將葉片切為0.5~0.7cm2的方塊,將葉柄、莖段切為0.3~0.5cm的小節(jié)備用。

        1.3 培養(yǎng)基配制 以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,不同階段附加不同濃度的BA、NAA等生長調節(jié)劑(表1~3)。培養(yǎng)基煮沸后調pH值至5.8,注入容器中,封口后置于高壓鍋中在121℃,1.1kg/cm2下滅菌30min。

        1.4 培養(yǎng)條件 將處理好的花葉豆瓣綠葉片切塊與莖段分別接種在不同配方培養(yǎng)基上,置于光照培養(yǎng)室內,室溫保持25±2℃,光照強度1 500~2 000lx,光照時間12h/d的條件下誘導。

        1.5 繼代增殖培養(yǎng) 將形成的愈傷組織轉移到含⑤、⑥培養(yǎng)基中培養(yǎng),每瓶接種3塊,培養(yǎng)25d左右后,將形成的叢生芽繼續(xù)分割接種,進一步擴大增殖。

        1.6 生根培養(yǎng) 選擇生長健壯的小苗移至1/2 MS+NAA 0.2mg/L的生根培養(yǎng)基上,觀察記錄生根和小苗生長狀況,并統(tǒng)計生根率。

        1.7 小苗移栽 為了使小苗適應盆載環(huán)境,可將已經(jīng)生根的試管苗在室溫下開瓶練苗3~5d。取出試管苗,將小苗根部附著的培養(yǎng)基用清水洗凈,移入育苗盆中,培養(yǎng)土用消毒過的蛭石及泥炭土。

        1.8 觀察記載 接種后每隔10d觀察一次,記錄成活數(shù)、污染率、出愈綠、萌芽率、生根率等情況。

        2 結果與分析

        2.1 消毒時間對花葉豆瓣綠無菌系建立的影響 外植體不同消毒時間處理效果如表3所示。通過表3數(shù)據(jù)可見,消毒時間不宜少于8min,消毒4min和消毒6min的外植體的污染率顯著高于其他消毒時間的外植體的污染率。而消毒12min,HgCl2殘留難以清洗,外植體全部死亡。經(jīng)比較可知,消毒時間在8~10min為最優(yōu)。

        2.2 不同外植體的選擇 外植體接入時采用了葉片、葉柄與莖段3個部分,經(jīng)過觀察記錄如表4所示。在相同條件下,葉柄分化速度較快,葉片其次,莖段較慢。但葉片褐化問題較其他部位嚴重。因此,從外植體來源上看,以葉柄效果最好,且誘導時間短,增殖率高。

        2.3不同激素配比對愈傷組織誘導的影響 將消毒后的豆瓣綠葉柄外植體分別接入培養(yǎng)基①、②、③、④中,培養(yǎng)25d以后葉柄切口及基部周圍產(chǎn)生黃綠色愈傷組織。具體情況如表5所示。由表5可見,在不同激素配比和添加物情況下,花葉豆瓣綠葉柄的成芽率不同。在①、②、③培養(yǎng)基配比中,隨著BA與NAA使用比例提高,出愈率有顯著提升,但在④號培養(yǎng)基中BA用量超過一定比例時,出愈率顯著下降。因此,花葉豆瓣綠誘導最適配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L。

        2.4 不同培養(yǎng)基對芽增殖的影響 外植體產(chǎn)生小苗以后,繼續(xù)采用同樣的培養(yǎng)基做繼代增殖,小苗高2~3cm時將轉移的叢生小苗切成較小的叢,或將較大的苗再切碎,分別在⑤、⑥、⑦培養(yǎng)基上培養(yǎng)30~40d,愈傷組織開始分化出芽,后增殖得到更多的叢生苗。三組激素配比中以⑥號效果最優(yōu)。因此,花葉豆瓣綠最佳增殖配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L。

        2.5 根的誘導 選取生長健壯的2~3cm小苗,移植到生根培養(yǎng)基1/2 MS+ NAA 0.2mg/L上。一般在23d左右便可生根,根長度多為1~2cm。

        2.6 移栽 選擇生長健壯、無玻璃化現(xiàn)象、根長2~3cm、高4~5cm的生根苗進行移栽。移栽前把培養(yǎng)瓶打開后于室溫下煉苗。一周后將苗從培養(yǎng)基中拔起,將根部培養(yǎng)基清除干凈后再移植入培養(yǎng)土中。培養(yǎng)土選用消毒過的泥炭土+蛭石,加強溫濕管理,通常情況下移栽成活率可達100%。

        3 結論與討論

        (1)花葉豆瓣綠的葉片、葉柄、莖段等均可作為外植體培養(yǎng)成功,在誘導時間上,各部位外植體差異并不大,誘導效果上葉柄較好,同等條件下葉片作為外植體雖然褐化率較高,但其為相對值,絕對值尚在可接受范圍??紤]到葉片最易獲取,在工廠化快繁中也可用葉片代替葉柄。

        (2)植物激素是培養(yǎng)基中關鍵物質,在基本培養(yǎng)基確定的前提下,篩選合適的激素種類和激素配比是組織培養(yǎng)成功與否的關鍵。綜上所述,花葉豆瓣綠快繁的基本培養(yǎng)基為Ms培養(yǎng)基,誘導愈傷組織的最適配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L;叢生芽增殖的最優(yōu)配方為:MS+BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L;生根配方為:1/2 MS+NAA 0.2mg/L。

        (3)花葉豆瓣綠的組培快繁潛力很大。理論上,花葉豆瓣綠每次增殖可達10~20倍,在1a內通過組培繁殖出幾十萬株苗是實際可行的。如能做到培養(yǎng)過程中初代誘導、繼代增殖、生根都可在同一培養(yǎng)基上進行,一次成苗將大大提高花葉豆瓣綠大批量商業(yè)生產(chǎn)的效率,從而獲得更好的經(jīng)濟效益。

        參考文獻

        [1]王濤,彭立新.豆瓣綠的組織培養(yǎng)與快速繁殖研究[J].天津農(nóng)學院學報,2011,18(2):1-5.

        [2]蔡明,李樹貴.豆瓣綠葉片再生植株[J].西南園藝,2001,29(4):43.

        [3]蔣澤平,朱鹿鳴.豆瓣綠試管苗快速繁殖 [J].江蘇林業(yè)科技,1990(1):14-15.

        [4]譚文澄,戴策剛.觀賞植物組織培養(yǎng)技術[M].北京:中國林業(yè)出版社,2000. (責編:施婷婷)endprint

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