徐金鳳 孫 妍 張洪娟

（黑龍江澳利達(dá)奈德制藥有限公司·慶安 152400）

芪連腸寧膠囊制劑處方來源于臨床經(jīng)驗(yàn)方劑，并經(jīng)過多年療效觀察總結(jié)而制成的現(xiàn)代有效中藥制劑，由黃芪、黨參、黃連、牡丹皮等十余味中藥組成，具有溫腎固腸，健脾益胃，調(diào)氣行血，祛濕排毒之功效。主治慢性潰瘍性結(jié)腸炎，慢性頑固性結(jié)腸炎（過敏性結(jié)腸炎），直腸炎等癥。為保證臨床用藥安全、療效穩(wěn)定，通過薄層層析法建立了制劑中藥味的鑒別方法，以有效保證制劑質(zhì)量。

1 儀器與藥品

薄層層析缸，紫外光燈；黃芪甲苷，芍藥苷，甘草苷、鹽酸小檗堿對(duì)照品，大黃對(duì)照藥材均購自中國藥品生物檢定所；藥品：參芪腸寧膠囊自制；薄層層析用硅膠購自于青島海洋化工廠；所用試劑均為分析純。

2 芪連腸寧膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中薄層鑒別方法

2.1 黃芪的鑒別

取本品內(nèi)容物10g，加甲醇40ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱（100～120目，5g，內(nèi)徑10～15mm）上，用40%甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗滌2次，每次20ml；棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。將處方中去掉黃芪，按成品制備工藝制成缺黃芪陰性樣品，以下操作同供試品前處理方法，制成黃芪陰性對(duì)照液，照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取對(duì)照品溶液2μl，供試品溶液及陰性對(duì)照液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的粉紅色斑點(diǎn)，而陰性液色譜對(duì)應(yīng)處則無相同斑點(diǎn)，說明陰性無干擾。

2.2 牡丹皮的鑒別

取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。將處方中去掉牡丹皮，按成品制備工藝制成牡丹皮陰性樣品，以下操作同鑒別2.1供試品前處理方法，制成牡丹皮陰性液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取鑒別1.1項(xiàng)下供試品溶液、對(duì)照品溶液及陰性對(duì)照液各5～10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱數(shù)分鐘，日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，而陰性液色譜則無相應(yīng)的斑點(diǎn)，說明陰性無干擾。

2.3 黃連的鑒別

取本品內(nèi)容物5g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮至2～3ml，作為供試品溶液。另取黃連對(duì)照藥材1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的對(duì)照品溶液。將處方中去掉黃連，按成品制備方法制成黃連陰性樣品，以下操作同供試品溶液方法制成黃連陰性對(duì)照液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各5～10μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7：1：2）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的一個(gè)熒光斑點(diǎn)，而陰性液色譜則無相應(yīng)的斑點(diǎn)，說明陰性無干擾。

2.4 大黃的鑒別

取本品內(nèi)容物5g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，再加鹽酸1ml，加熱回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?ml使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對(duì)照藥材1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。將處方中去掉大黃，按成品制備工藝制成大黃陰性樣品，以下操作同供試品溶液制備方法制成大黃陰性對(duì)照液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取對(duì)照藥材溶液、供試品溶液及陰性對(duì)照液各5～10μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色斑點(diǎn)，置氨蒸汽中熏后，斑點(diǎn)變?yōu)榧t色，而陰性液色譜則無相應(yīng)的斑點(diǎn)，說明陰性無干擾。

2.5 甘草的鑒別

取本品內(nèi)容物10g，加正丁醇60ml，超聲處理30分鐘，時(shí)時(shí)振搖，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，再加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2～3，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。將處方中去掉甘草，按成品制備工藝制成缺甘草陰性樣品，以下操作同供試品前處理方法，制成甘草陰性對(duì)照液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取供試品溶液及陰性對(duì)照液各10～15μl，對(duì)照品溶液5～10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（10：2：0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，而陰性液色譜則無相應(yīng)的斑點(diǎn)，說明陰性無干擾。

3 討論

本產(chǎn)品的制劑工藝設(shè)計(jì)以臨床多年用藥經(jīng)驗(yàn)為基礎(chǔ)，根據(jù)處方中各藥所含成分和理化性質(zhì)，參考各藥味現(xiàn)代藥理研究結(jié)果，將本品制成膠囊劑[1.2]。在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究中，分別建立黃芪、牡丹皮、黃連、大黃、甘草5味藥薄層定性鑒別方法[3.4]，結(jié)果表明：薄層斑點(diǎn)分離好，陰性無干擾，所選方法專屬性強(qiáng)，可作為制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下鑒別方法，為開發(fā)復(fù)方中藥芪連腸寧膠囊提供了質(zhì)量研究的基礎(chǔ)資料。

[1]雷載權(quán)，張廷模.中華臨床中藥學(xué)（上、下卷）[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1998

[2]江蘇新醫(yī)學(xué)院《中藥大辭典》編寫組，中藥大辭典（上、下卷，附編）[M].1995

[3]王寶琴.中成藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究[M].北京，中國醫(yī)藥科技出版社.1994

[4]國家藥典委員會(huì)，中華人民共和國藥典.2005年版一部