楊 超，李尚秀，田 倩，羅 陽，李海濱，李干鵬

(云南民族大學 民族藥資源化學國家民委-教育部重點實驗室，云南 昆明 650500)

山姜屬(Alpinia L.)系姜科植物，全世界約有250種，分布于亞洲熱帶地區(qū)，我國有50種，主產西南至臺灣[1].該屬植物普遍具有芳香氣味，有很重要的藥用價值，通常用于保護胃黏膜、鎮(zhèn)痛、抗癌、抗氧化、抗應激等作用，臨床上主要用于脾胃寒證[1-2]，其中，山姜、節(jié)鞭山姜、艷山姜、高良姜、益智、草豆蔻、紅豆蔻、小草蔻等收載于《中華本草》.桂南山姜(AlpiniaguinanensisK.Schumann)屬姜科山姜屬植物，原產于我國廣西等地，其他未見報道；而毛紅豆蔻 (AlpiniapyramidataK.Schumann)未見任何報道，僅見對紅豆蔻的文獻描述，紅豆蔻亦為常用中藥，有燥濕散寒，醒脾消食的功能[3];用于脘腹冷痛，食積脹滿，嘔吐止瀉，飲酒過多[3].《中國藥典》(1995年版)收載的紅豆蔻為姜科山姜屬植物紅豆蔻(AlpiniagalangalWilld)[4].

目前，山姜屬植物的研究主要集中在高良姜、大高良姜、山姜等植物的化學成分及活性；且山姜屬植物的揮發(fā)性成分的研究多集中在高良姜、大高良姜、草豆蔻、紅豆蔻、艷山姜等植物[5],除此之外，目前未見有關其它山姜屬植物揮發(fā)性成分的研究報道.故本文采用同時蒸餾萃取法對桂南山姜莖葉、毛紅豆蔻莖葉的揮發(fā)性成分進行提取，并結合氣相色譜-質譜(GC-MS)聯(lián)用技術及其相關數(shù)據(jù)庫對其揮發(fā)性化學成分進行分析確定，以期為桂南山姜莖葉和毛紅豆蔻莖葉的揮發(fā)性成分提供詳細的表征數(shù)據(jù)，確定其藥效成分基礎，為該資源得以合理地開發(fā)和利用提供理論依據(jù).

1 實驗部分

1.1 試驗儀器、試劑與藥材

儀器：GC/Tof高分辨氣質聯(lián)用儀(美國Waters公司)；R-210旋轉蒸發(fā)儀(瑞士BUCHI公司)；ZDHW220V電熱套(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；同時蒸餾萃取裝置為筆者組裝.

試劑：二氯甲烷、無水硫酸鈉等有機試劑均為分析純，水為純凈水.

藥材：桂南山姜(AlpiniaguinanensisK.Schumann)莖葉和毛紅豆蔻(AlpiniapyramidataK.Schumann)莖葉，2011年8月采于西雙版納，室內陰干，經(jīng)中國科學院西雙版納熱帶植物園黃建平研究員鑒定，憑證標本存放于該園.

1.2 GC-MS條件

氣相色譜條件：PE-35MS色譜柱(30 m×0.32 mm×0.25 m)，進樣口溫度為250 ℃，載氣為高純氦氣，流速為1.5 mL·min-1；進樣量為1.0 μL，分流比為50∶1；升溫程序：起始柱溫為50 ℃，保持5 min，以5 ℃·min-1的速率升至250 ℃，保持5 min.

質譜條件：接口溫度為220 ℃；離子源溫度.

1.3 莖葉揮發(fā)性成分提取

稱取桂南山姜的莖葉約30.0 g，加入 1 000 mL純凈水(溶有25 g氯化鈉，以減少揮發(fā)油成分在水中的溶解度)及20 mL二氯甲烷進行同時蒸餾萃取3 h，冷卻，加入適量無水硫酸鈉靜置24 h，旋蒸回收二氯甲烷，得到具有特殊芳香氣味的黃色油狀物，二氯甲烷溶出，待分析.

毛紅豆蔻的莖葉的處理方法同上.

2 結果與討論

按上述測試條件進行GC-MS 分析，得桂南山姜莖葉和毛紅豆蔻莖葉的揮發(fā)油的揮發(fā)性成分的總離子流色譜圖(見圖1～2).結合NIST2008、WILEY譜圖庫和相關文獻分別確定了其中的化學成分(見表1～2)，并按峰面積歸一化法計算各成分在揮發(fā)油中的百分含量.

表1 桂南山姜莖葉的揮發(fā)性化學成分

續(xù)表

序號t/min化合物分子式相對含量/%3024.163,7-二甲基-2-辛烯-1-醇C10H20O0.073124.61異乙酸龍腦酯C12H20O20.113224.70乙酸龍腦酯C12H20O20.253324.953,4,4a,5,6,8a-六氫-2,5,5,8a-四甲基-2H-1-苯并吡喃(dihydroedulani)C13H22O0.073426.30異胡薄荷醇乙酯C12H20O20.063527.20α-古巴烯C15H240.253627.52欖香烯C15H240.493728.44反式-石竹烯C15H240.673828.65α-香柑油烯C15H240.663928.90香葉基丙酮C13H22O0.084029.05順式-石竹烯C13H22O0.274129.37α-蛇麻烯C15H240.304229.49alloaromadendreneC15H240.724329.78sinulareneC15H240.674430.10桉葉烯C15H242.574530.28香橙烯C15H243.234630.71白菖酮C15H24O1.374730.85杜松烯C15H240.784831.017-α-桉葉油醇C15H26O0.864931.783,7,11-三甲基-1,6,10-十二三烯-3-醇3,7,11-三甲基C15H26O1.135032.38(-)-斯巴醇C15H24O0.595132.54石竹烯氧化物C15H24O0.475233.13二氫異水菖蒲二醇C15H24O3.895333.49白千層醇C15H26O0.255433.86tau-杜松醇C15H26O1.005534.22杜松醇C15H26O1.605634.53藍桉烯C15H26O2.395735.303,7,11-三甲基-1,3,6,10-十二四烯C15H240.285835.78(1)-香橙烯氧化物C15H24O0.215936.902-異烯丙基-5-甲基己烯-4-醛C10H16O0.216037.21順式-甜沒藥烯氧化物C15H24O0.146138.78三十六醇C37H76O0.046239.42金合歡基丙酮C18H30O0.066340.36油酸C18H34O20.036443.24葉綠醇C20H40O0.056545.56冰片基肉桂酸酯C19H24O20.19

表2 毛紅豆蔻莖葉的揮發(fā)性化學成分

續(xù)表序號t/min化合物分子式相對含量/%614.74β-蒎烯C10H166.76714.896-甲基-5-庚烯-2酮C8H14O0.23815.07β-月桂烯C10H162.25916.381-甲基-4異丙基本C10H140.361016.53檸檬烯C10H161.321116.67葉桉油素C10H18O12.651217.05反式-羅勒烯C10H160.521317.302,6,10-三甲基十四烷C17H360.221417.50香檜烯水合物C10H18O0.221517.94松油醇C10H18O0.321618.45紫丁香醇CC10H18O20.111718.622-Hexenaldiethylacetal,transC10H20O20.531818.82酮棕櫚酸C17H32O30.291919.00十一醛C11H22O0.442019.27新異薄荷醇C10H20O0.122119.643,7-二甲基-2-壬烯-1醇C10H20O0.152220.33異松香芹醇C10H16O0.352320.434,6,6-三甲基二環(huán)[3.1.1]庚-3-烯-2-醇C10H16O0.142421.00薰衣草醇C15H26O0.082521.534-松油醇C10H18O0.192621.99α-松油醇C10H18O0.932722.38黃連酮C10H14O0.142823.17香葉醛C10H16O0.132924.02香葉醛C10H16O0.223024.153,5,24-三甲基四十烷C43H880.163124.58exobornylacetateC12H20O20.123224.89溴代十六烷C16H33Br0.163326.43丁子香酚C10H12O20.433427.01橙花醇乙酸酯C12H12O20.193527.18雪松烯C15H240.213627.50欖香烯C15H240.593727.63甲基丁子香酚C11H14O20.783828.11橙花叔醇C15H26O0.063928.41反式-石竹烯C15H242.744028.62α-香干油烯C15H240.644129.01法尼烯C15H241.324229.157,11-二甲基-3-亞甲基-1,6,10-十二三烯C15H241.154329.35α-蛇麻烯C15H241.254429.83芳姜黃烯C15H220.724529.97香橙烯C15H240.244630.19十六烷C16H340.654730.50β-甜沒藥烯C15H245.954830.91倍半水芹烯C15H246.924931.19二氫獼猴桃內酯C11H16O20.315031.74橙花叔醇C15H26O1.445132.36斯巴醇C15H24O1.45

續(xù)表序號t/min化合物分子式相對含量/%5232.52石竹烯氧化物C15H24O0.935333.103,7,11-三甲基-1,3,6,10-十二三烯醇C15H243.975433.48香橙烯C15H240.955533.67石竹烯氧化物C15H24O0.315633.91榧烯醇C15H26O0.855734.14杜松醇C15H26O1.355834.28香葉基芳樟醇C20H34O0.625934.49雪松烯C15H240.476034.841,1-二甲基-2,4二乙丙烯基環(huán)己烷C14H248.716134.99三十七醇C37H76O0.386236.04γ-1-杜松烯基乙醛C15H22O0.436336.913,7,11-三甲基-2,6,10-十二三烯-1-醇C15H26O0.276437.77法基尼乙酸C17H28O21.616537.972,10,14-三甲基-2十五酮C18H36O2.786640.37油酸C18H34O20.426743.24葉綠醇C20H40O1.126843.79異十三醇C13H28O0.246945.282-延胡索酸-二(2-乙基己基)酯C20H36O40.277046.25EPOXYCHOLESTANEC27H46O0.117146.753,5,24-三甲基四十三烯C43H880.14

從總離子流色譜圖中可以發(fā)現(xiàn)，桂南山姜莖葉和毛紅豆蔻莖葉的揮發(fā)性成分都非常豐富.通過GC-MS 分析，從桂南山姜莖葉中共分離鑒定了65個化合物，占總峰面積的95.40%.其中桂南山姜莖葉的主要揮發(fā)性成分為桉油精(25.66%)、崁酮(17.74%)、β-蒎烯(4.77%)、β-葑醇蛇(3.93%)、二氫異水菖蒲二醇(3.89%)、莰烯(3.77%)等；從表1中可以發(fā)現(xiàn)寬唇山姜莖葉的揮發(fā)性成分主要是萜類、烴類化合物及其含氧衍生物.從毛紅豆蔻莖葉中共分離鑒定了71個化合物，占總峰面積的92.38%.毛紅豆蔻莖葉的主要揮發(fā)性成分為主要成分為葉桉油素12.65%、1，1-二甲基-2,4二乙丙烯基環(huán)己烷8.71%、β-萜品烯8.58%、倍半水芹烯6.92%、β-蒎烯6.67%、β-甜沒藥烯5.95%，占總峰面積的49.48%(表2)，此外,在紅豆蔻揮發(fā)油中還含有少量的醛、醚、酚、酯、有機酸及烷烴等化合物.

姜花屬植物中豐富的揮發(fā)性成分具有各種生理活性及功效.β-蒎烯特有的松節(jié)油香氣，干燥木材和松脂氣味，主要用于合成萜烯樹脂、橙花醇、香茅醛等重要的香料[6].而且，α-蒎烯和β-蒎烯都具有鎮(zhèn)咳、祛痰和抗真菌作用.莰烯具有樟腦的氣味，是用于合成樟腦、香精香料的重要原料，還能抗高血脂[7].由此看來，山姜屬植物莖葉在香原料和中草藥領域具有一定的開發(fā)利用價值.

參考文獻:

[1] 亓淑芬,姚慶強.山姜屬植物化學成分及藥理活性的研究進展[J].齊魯藥事,2009,28(5):284-287.

[2] 秦華珍,王曉倩,柳俊輝,等. 姜科山姜屬中藥藥理作用的研究進展[J].廣西中醫(yī)藥,2010,33(5):1-3.

[3] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M].北京: 人民衛(wèi)生出版社, 化學工業(yè)出版社，2000.

[4] 劉磊,秦華珍,王曉倩,等.10味山姜屬藥物揮發(fā)油成分的氣相-質譜聯(lián)用分析[J].廣西植物,2012,32(4):561-566.

[5] 中華人民共和國藥典委員會編. 中華人民共和國藥典[M].廣州：廣東科技出版社,1995.

[6] 徐曉琴,廖丹葵,李立碩,等.α-蒎烯+β-蒎烯+對傘花烴常壓汽液平衡測定與關聯(lián)[J].化工學報,2007,58(12):2970-2974.

[7] 周家駒,謝桂榮,嚴新建.中藥原植物化學成分手冊[M].北京：化學工業(yè)出版社,2004.