劉德經(jīng)，朱善央

(1．長樂市漳港海蚌場，福州350200；2．中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，上海200090)

西施舌(Coelomactraantiquatespengler)俗稱“海蚌”、“貴妃蚌”、“沙蛤”，屬軟體動物門(Mollusca)瓣鰓綱(Lamellibranchia)簾蛤目(Veneroida)蛤蜊科(Mactridae)腔蛤蜊屬(Coelomactra)。是一種生長快、個(gè)體大、品味好、價(jià)值高的海產(chǎn)雙殼貝類，也是我國正在研究的海水養(yǎng)殖珍品。有關(guān)西施舌的胚胎發(fā)育、幼蟲生長、繁殖生物學(xué)以及影響幼蟲發(fā)育的環(huán)境因素等方面的研究已有過報(bào)道[1～4]。近年來，在育苗過程中，筆者對不同采卵方法獲得的西施舌幼蟲進(jìn)行培養(yǎng)，比較其發(fā)育生長狀況，為完善西施舌人工育苗工藝提供參考。

1 材料與方法

1.1材料

從江蘇省啟樂自然海區(qū)采捕的殼長8.0cm～9.0cm西施舌60粒，作為親貝。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1采卵方法試驗(yàn)設(shè)A組、B組、C組3組，每組6次重復(fù)，每3次重復(fù)取其平均值，即第1、第2平行組。A組采卵前預(yù)先把20粒親貝在底面積11.25m2、水深0.8m的室內(nèi)水泥池里飼養(yǎng)。用養(yǎng)蝦池上層水，經(jīng)60目篩絹過濾后，加入扁藻(Platymonasspp.)0.4×104cell/mL、球等鞭金藻(Isochrysisgaldana)6×104cell/mL、新月菱形藻(Nitzschiaclosterium)6×104cell/mL為餌料。每日7∶00全量換水1次，并清理排泄物。在水溫24.0℃～26.8℃、鹽度27‰～30‰條件下飼育9d，自然排放后用600目篩絹收集受精卵；在A組親貝精、卵排放的當(dāng)日，解剖B組20粒西施舌，從中選擇4粒性腺較豐滿的親貝，以雌、雄3∶1采集精子、卵子，在玻璃皿內(nèi)混合30min后用砂濾海水稀釋，以200目篩絹濾除黏液，經(jīng)600目篩絹過濾，收集受精卵；C組親貝20粒陰干3h后經(jīng)20cm/s～25cm/s流水刺激，精子、卵子排放后用600目篩絹收集受精卵。

1.2.2受精卵的孵化收集到的A組、B組、C組受精卵，分別放入3個(gè)1000mL的玻璃燒杯里，用砂濾海水孵化受精卵，孵化密度30粒/mL～40粒/mL。每1h倒去燒杯50%海水，加入新鮮的砂濾海水，使它恢復(fù)懸浮狀態(tài)，連續(xù)5次，直至擔(dān)輪幼蟲上浮為止。

1.2.3幼蟲培育在8000mL玻璃缸里，用5000mL砂濾海水，移入1000個(gè)西施舌的直線鉸合期幼蟲，放到裝有等溫海水的泡沫箱里，采用水浴法，使缸內(nèi)水溫相對穩(wěn)定。每天7∶00～8∶00、17∶00～18∶00各換水1次，每次換水60%，換水后投入球等鞭金藻1×104cell/mL。幼蟲發(fā)育到殼頂期后，添加扁藻0.3×104cell/mL。每天7∶00、14∶00觀測水溫和比重，按文獻(xiàn)[5]換算成鹽度值。

1.2.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析每隔2d，上午換水前，在各試驗(yàn)組及其平行組隨機(jī)取樣，鏡檢30個(gè)幼蟲，觀察發(fā)育狀況，測量其殼長，求平均值。試驗(yàn)數(shù)據(jù)參照文獻(xiàn)[6]進(jìn)行差異顯著性測定、方差分析及多重比較。

2 結(jié)果

2.1不同采卵方法幼蟲發(fā)育生長情況

不同采卵方法所獲得的直線鉸合期幼蟲在水溫25.60℃±1.15℃、鹽度28.10‰±3.20‰、光照200lx～600lx條件下，經(jīng)9d培養(yǎng)，A組、B組、C組殼長平均值分別為272.00μm±18.4μm、239.60μm±19.97μm、C組260.00μm±20.07μm，日平均殼長增長度分別為21.11μm/d、17.51μm/d、19.78μm/d。由此可見，幼蟲生長速度A組>C組>B組(圖1)。

Fig.1ContrastgrowthofmethodofdifferentgatherovumforlarvaeshelllengthCoelomactraantiquata

A組與B組的殼長平均值相差32.4μm，是A組與B組機(jī)誤4.91的6.598倍，顯示差異極顯著(P<0.01)。A組與C組、C組與B組的殼長平均值相差分別為機(jī)誤的2.03倍和3.94倍，表明差異顯著(P<0.05)(表1)。方差分析，F(xiàn)=9.06，F(xiàn)>0.01(2.87)(P<0.01，n=30)，差異極顯著。LSD法多重比較，A組、C組與B組相比，均達(dá)1%極顯著水準(zhǔn)。

表1幼蟲殼長生長度差異顯著性

Table1ThelarvalshelllengthgrowthandsignificantdifferencebetweendegreeofdeferminationofCoelomactraantiquate

組間Towgroup平均值差異(X)Averagedifference機(jī)誤(S、E)Standarderror差異顯著度SignificangdegreeofdifferenceA組與B組32404916598C組與B組20405173945A組與C組10004922030

2.2幼蟲培育成活率、變態(tài)率的比較

2.2.1幼蟲培育成活率A組、B組、C組 3組9日齡幼蟲平均成活率依次為50.00%±4.82%、37.00%±6.64%、42.86%±3.57%(圖2)。方差分析，差異顯著，F(xiàn)=6.00，F(xiàn)>0.05(2.6)(P<0.01，n=3)。多重比較，A組與C組差異不顯著(P>0.05)，A組與B組比較，達(dá)1%顯著水準(zhǔn)。

Fig.2Nine-day-oldsurvialrateoflarvaeCoelomactraantiquata

2.2.2幼蟲附著變態(tài)率幼蟲經(jīng)12d培養(yǎng)，A組、B組、C組 3組變態(tài)率的平均值分別為51.33%±6.05%、35.77%±10.55%、40.59%±3.19%(圖3)。方差分析，差異顯著，F(xiàn)=8.58，F(xiàn)>0.05(2.6)(P<0.01，n=3)。多重比較，A組與B組、C組間差異顯著，A組與B組間差異極顯著(P<0.01)，A組與C組間差異顯著(P<0.05)。

3 討論

西施舌的卵子與長牡蠣(Crassostreagigas)一樣，發(fā)育到初級卵母細(xì)胞就具有受精能力，并能發(fā)育生長成稚貝。受精卵發(fā)育和分化所必需的物質(zhì)來源于卵母細(xì)胞在發(fā)育過程中的積累。棲息在自然海區(qū)野生群體的西施舌的親本，由于受不同生境的制約，其性腺發(fā)育并不同步。因此，不同發(fā)育階段的卵母細(xì)胞所含的內(nèi)源營養(yǎng)亦不盡相同。所以，通過解剖取卵、人工受精所獲得受精卵發(fā)育生長較慢，幼蟲個(gè)體大小差異顯著，其標(biāo)準(zhǔn)差較大，幼蟲培養(yǎng)成活率亦較低。筆者認(rèn)為，這主要緣于卵細(xì)胞內(nèi)源營養(yǎng)欠佳所致。Jones等[7]對麥哲倫扁圓扇貝(Placopectenmagellanic-us)幼蟲生長的研究后指出，貝類幼體發(fā)育生長主要受到親本的影響，其中以“母本效應(yīng)”為主。此后，Bayne[8]闡釋，海產(chǎn)雙殼類軟體動物配子發(fā)生的能源來源于親本營養(yǎng)的積累。粟志民等[9]闡述，生殖腺的質(zhì)量是貝類繁殖成敗的關(guān)鍵。可見，產(chǎn)前對野生西施舌親本進(jìn)行人工飼育，有助于生殖腺的發(fā)育及其卵母細(xì)胞的營養(yǎng)積累，有利于幼蟲的發(fā)育生長，也是提高西施舌人工育苗種質(zhì)質(zhì)量的有效措施。

在西施舌的人工育苗中，利用蝦池水中含有的多種浮游硅藻，再添加蘊(yùn)含二十二碳六烯酸(DHA)的金藻和二十碳五烯酸(EPA)的扁藻作為產(chǎn)前及產(chǎn)后親貝的餌料，對于促進(jìn)親貝性發(fā)育效果良好。采取解剖取卵人工受精方法所獲得的幼蟲，附著變態(tài)后1個(gè)月，大部分稚貝殼可達(dá)10mm左右，但有些稚貝殼長僅2mm～3mm，原因在于先天不足。每年的5月～6月份，水溫24℃～26℃，西施舌親貝經(jīng)10d左右精養(yǎng)，在1個(gè)月內(nèi)可連續(xù)自行排放精卵2次～3次。采取上述辦法采卵，既簡便、省工，又能充分發(fā)揮親貝生殖能力的作用；既減少親貝用量與消耗，又有利于幼蟲發(fā)育生長，提高人工育苗的種質(zhì)質(zhì)量。這對于節(jié)省育苗成本、改善育苗工藝模式乃至保護(hù)匱乏的西施舌自然資源，均有助益。

在文章撰寫過程中，廈門海洋職業(yè)技術(shù)學(xué)院張?jiān)骑w教授、廣東海洋大學(xué)蔡英亞教授給予了大力幫助，謹(jǐn)致謝意。

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