殷國田等

【摘要】 目的：探討不同劑量辛伐他汀對阿霉素所致心衰兔保護(hù)作用及其抗心衰的機(jī)制。方法：雄性新西蘭大耳白兔60只，隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對照組（CON）、CHF模型組（CHF）、CHF+辛伐他汀低劑量組（LD-SIM）、CHF+辛伐他汀中劑量組（MD-SIM）、CHF+辛伐他汀高劑量組（HD-SIM）。正常對照組（CON）給予耳緣靜脈等體積生理鹽水，每周1次，共10周。其余組均給予生理鹽水注射液稀釋的鹽酸阿霉素，按4 mg/kg，每周1次，共10次，而辛伐他汀干預(yù)組同時(shí)給予低、中、高劑量辛伐他汀灌胃治療，劑量分別為0.3 mg/（kg·d），

1.5 mg/（kg·d），3.0 mg/（kg·d）。10周后測定大鼠心功能左室肥厚指數(shù)、ELISA測定血清中hs-CRP和MMP-13含量。結(jié)果：各藥物治療組可不同程度改善左室肥厚，其中辛伐他汀大劑量組與CHF模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），而辛伐他汀中劑量組與其比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而小劑量治療組與之比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；大中劑量治療組心功能指標(biāo)（±dp/dtmax）明顯優(yōu)于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），辛伐他汀大劑量組與中劑量組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而小劑量治療組與模型組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；各藥物治療組能降低血清中CRP、MMP-13含量（P<0.01或P<0.05）。結(jié)論：辛伐他汀能夠預(yù)防左心肥厚，降低血漿CRP、MMP-13濃度，從而減緩細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的降解改善心功能，這可能是辛伐他汀抗心衰作用機(jī)制之一。

【關(guān)鍵詞】 辛伐他?。?阿霉素； 心力衰竭； 左室重構(gòu)； MMP-13； hs-CRP

心力衰竭（heart failure，HF）是由諸多原因造成心肌損傷或壞死，繼而引發(fā)心臟結(jié)構(gòu)和功能改變，最終導(dǎo)致心室舒張和/或收縮功能低下，不能滿足全身各器官的代謝需求并導(dǎo)致體/肺循環(huán)淤血。盡管數(shù)十年來得益于理念、技術(shù)和藥物的進(jìn)步，然慢性心衰（chronic heart failure，CHF）5年存活率不足50%，已給全社會(huì)和患者家庭帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，成為心血管領(lǐng)域需要攻堅(jiān)的最后堡壘。因此如何及早防控HF發(fā)生發(fā)展尤為重要。迄今研究表明，HF發(fā)生發(fā)展的基本機(jī)制是心室重塑。其中，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）是一組降解基質(zhì)蛋白的水解酶，在心室重塑過程中具有重要作用，可降解所有細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）成分[1]。C反應(yīng)蛋白（CRP）是非特異性急性反應(yīng)蛋白，HF時(shí)其血漿中水平升高，是判斷組織損傷程度的較敏感的指標(biāo)，亦是判斷心肌受損程度的重要指標(biāo)。辛伐他汀作為降膽固醇藥物在臨床廣泛應(yīng)用，近20年來，關(guān)于其降脂外的多效性被廣為研究，如辛伐他汀抑制心肌細(xì)胞肥厚從而預(yù)防心衰的作用受到廣泛關(guān)注[2-4]。鑒于此，本文探討辛伐觀察辛伐他汀對慢性心力衰竭的心功能的影響和辛伐他汀抗心力衰竭的分子機(jī)制，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)雄性新西蘭大耳白兔60只，體質(zhì)量（1200±30）g，由新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。全部動(dòng)物飼養(yǎng)在正常晝夜周期的環(huán)境中，自由飲水，室溫控制在（22±2）℃。

1.2 主要儀器與試劑 美國Bio-rad imark酶標(biāo)儀，高速冷凍離心機(jī)（德國Heraeus公司），RM6240多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)（成都儀器廠），不銹鋼手提式壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠），精密電子天平（FA1004）（上海精宏電子儀器有限公司），微量加樣器（德國eppendorf公司），辛伐他汀片購自河南省迪康醫(yī)藥有限責(zé)任公司，氯化鈉注射液（河南天方藥業(yè)股份有限公司），鹽酸阿霉素（上海研生生化試劑有限公司），兔子MMP-13 ELISA試劑盒、兔子hs-CRP ELISA試劑盒（R&D）。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物模型制作及取材 60只雄性新西蘭大白兔適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為正常對照組（CON組，12只）、心衰模型組（CHF組，7只）、CHF+辛伐他汀低劑量組（LD-SIM，8只）、CHF+辛伐他汀中劑量組（MD-SIM，9只）、CHF+辛伐他汀高劑量組（HD-SIM，9只）。正常對照組（CON組）給予耳緣靜脈等體積生理鹽水，每周1次，共10周。其余組均給予生理鹽水注射液稀釋的鹽酸阿霉素，按4 mg/kg，每周1次，共10次，而辛伐他汀干預(yù)組同時(shí)給予低、中、高劑量辛伐他汀灌胃治療，劑量分別為0.3 mg/（kg·d），1.5 mg/（kg·d），3.0 mg/（kg·d）。藥物干預(yù)10周后，將兔稱體重（BW）后麻醉致死，迅速取血液、心臟及血管標(biāo)本并分別進(jìn)行相應(yīng)標(biāo)本處理。

1.3.2 心功能測定 動(dòng)物稱重后，用3%戊巴比妥鈉

（30 mg/kg）腹腔注射麻醉，切開頸部、分離右頸總動(dòng)脈，將之切開后并逆行插入內(nèi)充0.1%肝素-生理鹽水的導(dǎo)管至左心室，停置20 min后，利用RM6240多道生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，記錄壓力曲線，計(jì)算出mLVSP（平均心室收縮壓）、mLVDP（平均心室舒張壓）、mLVP（平均心室內(nèi)壓）、HR（心率）、mdP/dtmax（平均心室內(nèi)壓最大上升速率）、m-dP/dt max（平均等容舒張期室內(nèi)壓最大下降速率）、mt-dP/dtmax（平均心室開始收縮至發(fā)生dp/dtmax的間隔時(shí)間）。

1.3.3 心肌肥厚指數(shù)計(jì)算 處死兔子并取血后，迅速取出心臟，分離心底部大血管、心房及右心室，用預(yù)冷的生理鹽水充分沖洗，濾紙吸干，用分析天平稱取心肌重量（HW），左心室（含室間隔）濕重（LVW），以全心/體重和左心室濕重/體重計(jì)算心肌重量指數(shù)（CPI，HW/BW，mg/g）和左心室心肌肥厚指數(shù)（LVHI，LVW/BW，mg/g）。

1.3.4 血漿中CRP、MMP-13濃度的測定 按ELISA試劑盒說明配制標(biāo)本處理所需的抗凝劑，肝素10 U/mL，動(dòng)物處死后立即取血注入預(yù)冷的內(nèi)含肝素的試管中，混勻后即刻放入冰水中冷卻，隨后4 ℃ 3000 rpm離心15 min，取上清液，分別按試劑盒步驟檢測CRP、MMP-13的濃度。endprint