司民真，張川云，李 倫，張德清

(楚雄師范學(xué)院光譜應(yīng)用技術(shù)研究所，云南 楚雄 675000)

1.引言

蔥屬植物是多年生草本百合科植物，具有殺菌、降血脂、降膽固醇、減少血小板凝集、調(diào)節(jié)血糖、提高免疫力和抗癌等作用。［1，2］中國共有110種蔥屬植物，絕大部分的種具特殊的蔥蒜氣味。國內(nèi)外對蔥屬植物如大蔥、香蔥、洋蔥的揮發(fā)油成分提取、分離和檢測進(jìn)行過較多的報道，主要方法是采用水蒸氣蒸餾萃取 (Steam Distillation，SD)［3，4］、同時蒸餾萃取 (Simultaneous Distillation extraction，SDE)［5—8］等方法萃取蔥油，然后進(jìn)行分析檢測。然而，這些方法所需要的樣品前處理時間較長，提取試劑用量大、步驟多。固相微萃取 (Solid Phase Microextraction，SPME)是由加拿大Waterloo大學(xué)Pawliszyn及其合作者于1990年提出的，由Supelco公司 (美國)1994年推出其商業(yè)化產(chǎn)品。與其他常用的揮發(fā)性物質(zhì)測定技術(shù)相比，固相微萃取簡便、快速、經(jīng)濟(jì)安全、無溶劑、選擇性好且靈敏度高，集采樣、萃取、濃縮、進(jìn)樣于一體，大大加快了分析檢測的速度。［9］因此，頂空微萃?。瓪庀嗌V/質(zhì)譜聯(lián)用法或氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法是目前常用方法，該方法可以對樣品中全部或指定成分作定性和定量分析，是一種有效確定化合物分子結(jié)構(gòu)的方法，并且具有靈敏度高的特點(diǎn)。然而，該方法所需要的流程為微萃取—?dú)庀嗌V柱分離－質(zhì)譜儀定性或定量，其中，在進(jìn)行氣相色譜分離時需要在較高的溫度下進(jìn)行，可能會引起生物活性分子的結(jié)構(gòu)改變，而且不同萃取頭的選取，會對測量的結(jié)果有影響。下面就頂空微萃?。瓪庀嗌V/質(zhì)譜聯(lián)用法或氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法對各種蔥屬植物揮發(fā)性物質(zhì)的研究進(jìn)展作一簡要介紹，并介紹我們課題組目前用頂空及表面增強(qiáng)拉曼 (SERS)對蔥屬植物揮發(fā)性物質(zhì)的研究所取得的結(jié)果。

2.蔥的揮發(fā)性物質(zhì)的研究

大蔥、洋蔥、細(xì)香蔥是人們?nèi)粘Ｉ钪谐Ｊ车氖卟撕驼{(diào)味品，除含碳水化合物和豐富的礦物鹽、氨基酸、維生素外，還含有特殊的揮發(fā)性香辛物質(zhì)。為進(jìn)一步開發(fā)利用新的種質(zhì)資源提供科學(xué)依據(jù)，楊天慧［10］等利用頂空固相微萃取與氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用 (GC—MS)技術(shù)對大蔥、洋蔥遠(yuǎn)緣雜交后代及其親本揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，5個試驗(yàn)材料的GC－MS分析結(jié)果表明，一硫代有機(jī)物主要以1－丙硫醇、甲基丙基硫醚、1－乙烯基硫代丙烷為主.其中5個樣品中1－丙硫醇的含量最高的為黃皮洋蔥，達(dá)到總萃取成分的70.98%，最低的為大蔥×黃皮洋蔥雜交后代種，達(dá)到總萃取成分的57.96%。見表1。

這一結(jié)果與Zhuomin Zhan對大蔥、洋蔥的測量結(jié)果不一致。Zhuomin Zhan［11］等采用頂空固相微萃取與氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對細(xì)香蔥 (chive)、洋蔥 (onion)、大蔥 (scallion)、火蔥(shallot)的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行了檢測，發(fā)現(xiàn)四種蔥中的主要揮發(fā)物質(zhì)并不一樣，分別是細(xì)香蔥中丙烯醛 (propenal，22.85%)、洋蔥中的 2，5－二甲基噻吩 (2，5－dimethyl－thiophene，17.36%)、大蔥中的 ［E］－2－已烯醛 (［E］－2－h(huán)exenal，39.40%)、火蔥中的丙烯醛 (propenal，12.09%)。見表一。

為了測試細(xì)香蔥的風(fēng)味成分，劉源［12］等采用手動SPME進(jìn)樣器，75LmCAR/PDMS萃取頭，對市售細(xì)香蔥用頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用，于45℃ 吸附40min，隨后抽回纖維頭，再將萃取頭插入氣相色譜儀于2500C解吸2min。試驗(yàn)條件下共檢測到30種化合物，其中主要成分是二丙基二硫醚 (31.94%)、二丙基三硫醚 (16.4%)、1－丙硫醇 (11.27%)、二甲基硫醚 (10.36%)、甲基－2－丙烯基二硫 (6.11%)、1－丙烯－1－甲基硫醇 (3.49%)，占總提取成分的79.57%。見表一。

表1 各種蔥的揮發(fā)性物質(zhì)

從表中可見，在楊天慧研究組的研究中，大蔥、洋蔥及雜交后代蔥的主要揮發(fā)性物質(zhì)為1－丙硫醇，顯然與Zhuomin Zhan的研究結(jié)果不一致，后者的研究洋蔥的主要揮發(fā)性物質(zhì)為2，5－二甲基噻吩 (2，5－dimethyl－thiophene);Zhuomin Zhan對細(xì)香蔥主要揮發(fā)物的測定與劉源的測定也不一致，前者所測的主要揮發(fā)物為丙烯醛，后者所測的主要揮發(fā)物為二丙基二硫醚，這可能與不同研究組的實(shí)驗(yàn)條件不同有關(guān)。Eila P.J?rvenp??［13］等用頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用方法研究了萃取頭吸附時間對洋蔥 (fresh onion，Allium cepa L.)揮發(fā)性物質(zhì)的影響，發(fā)現(xiàn)吸附時間是1分鐘時，主要揮發(fā)性氣體為丙硫醛 (thiopropanal S－oxide);吸附時間是30分鐘時，主要揮發(fā)性物質(zhì)變?yōu)楸┗蛎?(Di－1－propenyl propengl disulphide);吸附時間是170分鐘時主要揮發(fā)性物質(zhì)變?yōu)槎蛎?(Dipropyl disulphide)，但在整個時間段的所測揮發(fā)物中并未見有1－丙硫醇 (1－Propanethiol)，這與楊天慧的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也是明顯不同。

3.大蒜揮發(fā)性物質(zhì)研究

大蒜 (Alium sativum L)是百合科蔥屬的多年生草本植物，以鱗莖、花莖、嫩葉為主要產(chǎn)品。我國是大蒜的主要生產(chǎn)國，約占世界總產(chǎn)量的1/4，鮮蒜及其加工制品除供國內(nèi)消費(fèi)外，還大量出口日本、東南亞等國家。由于大蒜具有較高的營養(yǎng)保健功效，使得測定大蒜中揮發(fā)性物質(zhì)成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)。不同的栽培品種能否用頂空固相微萃取—?dú)赓|(zhì)聯(lián)用 (GC—MS)法及主成分分析將其分開，Jessica G.Clemente［14］等進(jìn)行了這方面的研究，根據(jù)他們的研究數(shù)據(jù)我們可以看出(見表二)，不同栽培品種大蒜的主要揮發(fā)性成分為二烯丙基二硫。Ruta Galoburda等對來自于拉脫維亞及法國比利牛斯山的大蒜的不同亞種用相同的方法進(jìn)行分析，得出兩種樣品的主要揮發(fā)物同樣為二烯丙基二硫，其峰面積占總峰面積為90.00%，92.00%。［15］

為了比較不同的提取過程對大蒜的主要揮發(fā)物是否會有影響，Sun－Neo Lee等［16］比較了同時蒸餾溶劑提取、水蒸氣蒸餾、用固相捕獲溶劑萃取、頂空固相微萃取與氣質(zhì)聯(lián)用研究大蒜的揮發(fā)性物質(zhì)，從所得結(jié)果 (見表2)可見，提取方法對主要揮發(fā)物成分沒有影響，都為二烯丙基二硫。

不同的處理方法，是否會影響大蒜的揮發(fā)性物質(zhì)的相對含量，Na Young Kim［17］等對大蒜采用了八種不同的處理方式即生大蒜瓣 (raw garlic cloves，for short GC)，壓榨生大蒜 (raw－crushed garlic，for short CG)，高壓蒸汽處理大蒜瓣 (autoclaved garlic clove－AGC)，高壓蒸汽處理壓榨大蒜 (autoclaved－crushed garlic－ACG)，高溫陳化處理大蒜瓣 (aged－black garlic clove－BGC)，高溫陳化處理壓榨大蒜 (aged－black－crushed garlic－BCG)，烘烤大蒜瓣 (roasted garlic clove－RGC)，以及烘烤壓榨大蒜roasted－crushed garlic－RCG)后，用頂空固相微萃取－氣質(zhì)聯(lián)用法對揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行了測定，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)八個樣品的主要揮發(fā)性物質(zhì)為二烯丙基二硫，但高壓處理及烘烤處理后，其二烯丙基三硫、烯丙基甲基三硫含量增高。

表2 大蒜的主要揮發(fā)性物質(zhì)

從上面的研究可見，各研究組對大蒜的主要揮發(fā)物的研究結(jié)果是一樣的，大蒜的主要揮發(fā)物為二烯丙基二硫，而不論大蒜的栽種地區(qū)是什么地區(qū)及栽種品種是什么品種，這預(yù)示對大蒜可通過主要揮發(fā)物的測定，來進(jìn)行種的鑒定。

4.韭菜揮發(fā)性物質(zhì)研究

韭菜 (Allium tuberosum Roettler ex Sprengel)多年生草本植物，原產(chǎn)亞洲東南部，全國及世界各地均有栽培，是人們喜愛的蔬菜，花序腌制可做作咸菜，種子可入藥，用于胸痛、胸悶、心絞痛、脅肋刺痛、咳嗽、慢性支氣管炎、慢性胃炎、痢疾。韭菜中所含的揮發(fā)性含硫化合物，既可使韭菜具有特殊的香味，又有降低血脂作用，對治療高血壓及冠心病也有一定的療效，國內(nèi)外對韭菜的香味來源作了一些研究但其結(jié)果不盡相同。R.S.Mann等［18］用頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用法得到了韭菜的五種主要揮發(fā)性物質(zhì)是烯丙基甲基硫醚 (allyl methyl sulfide)，二烯丙基二硫醚(diallyl disulfide)，烯丙基甲基二硫(Allyl methyl disulfide)，二甲基二硫醚 (Dimethyl disulfide)及二甲基三硫醚 (dimethyl trisulfide)。而Gongke Li等［19］同樣用頂空固相微萃取氣質(zhì)連用法得到了韭菜的五種主要揮發(fā)性物質(zhì)是烯丙基甲基二硫(allyl methyl disulfide)，二烯丙基二硫 (diallyl disulfide)，二甲基三硫醚 (dimethyl trisulfide)以及二烯丙基硫醚(diallyl sulfide)，其中烯丙基甲基二硫的含量達(dá)到46.4ug/g。這與Yuji Yabuki［20］用氣相色譜和液相色譜分析16個樣品得出的結(jié)論不同。后者分析得出的主要揮發(fā)性物質(zhì)為二甲基二硫醚 (Dimethyl disulphide)、丙烯基甲基二硫(Allyl methyl disulfide)、甲基丙烯基二硫醚 (Methyl 1－ (E)－propenyl disulphide)、二甲基三硫醚 (Dimethyl trisulphide)。

Mi－Sook Chung［21］對于和韭菜一樣同屬根莖組的山韭用頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用法研究其揮發(fā)性物質(zhì)，得出無論是溫室種植的還是野生的都是二丙基二硫醚 (Dipropyl disulfide)、丙烯基丙基二硫醚 (Propyl allyl disulfide)為主要揮發(fā)性物質(zhì)，以野生為例，分別占揮發(fā)性成分的40.95%和27.3%。為便于比較將上面結(jié)果列于表3中。

表3 韭菜及山韭的主要揮發(fā)物

5.對藠頭和小根蒜的揮發(fā)性物質(zhì)研究

藠頭 (Allium chinensis G.Don.)，為多年生宿根草本植物，原產(chǎn)我國，分布廣泛:中國，朝鮮，日本以及東南亞等地均可見到，以我國南方各省栽培最多。全株供食用，作蔬菜、調(diào)料。鱗莖常用以制腌菜、醬菜。鱗莖入藥，古稱薤白，為健胃藥，也對心臟有益。小根蒜 (Allium Macrostemon Bunge)除新疆、青海外，全國有分布。俄羅斯、朝鮮、日本也有。鱗莖供藥用，現(xiàn)為中藥中的“薤白”內(nèi)服有理氣、寬胸、散結(jié)、祛痰之效，用于痢疾、慢性支氣管炎、慢性胃炎等;外用治火傷。由于兩者在中藥中都作為薤白使用，因此彭軍鵬等［22—23］用水蒸氣蒸餾石油醚收集后，進(jìn)行GS－MS分析，其主要結(jié)果見表4，從表4可見兩者有共同的揮發(fā)物為二甲基三硫。但Kameoka等［24］研究了日本產(chǎn)同種植物的揮發(fā)油成分，其主要揮發(fā)物為二丙基二硫，占總揮發(fā)油的30.6%。

表4 藠頭及小根蒜的主要揮發(fā)物

從上面可見，同是蔥屬植物但不同的種其主要的揮發(fā)性物質(zhì)不一樣;即使是對同一種蔥屬植物主要揮發(fā)性物質(zhì)的研究，不同文獻(xiàn)報道得出的結(jié)論不盡相同 (見表1、表3)。這與萃取頭的選取、氣相色譜儀進(jìn)樣口的溫度及解吸時間 (一般在200攝氏度以上)不同有關(guān)。由于蔥屬植物的揮發(fā)性物質(zhì)的熱不穩(wěn)定性，在溫度較高時會發(fā)生熱分解。要在室溫下對蔥屬植物揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行檢測，必須尋找另外的方法，表面增強(qiáng)拉曼光譜 (SERS)就是滿足該條件的方法之一。

6.頂空及表面增強(qiáng)拉曼散射 (SERS)結(jié)合對蔥屬植物的研究

頂空技術(shù)通常是與色譜分析聯(lián)用的一種分析方法，其原理是將待測樣品放置于一密閉容器中，靜止或加溫使待測樣品的揮發(fā)性組分從樣品基質(zhì)中揮發(fā)出來，達(dá)到平衡后直接抽取上部氣體進(jìn)行色譜分析，從而檢測樣品中可揮發(fā)性組分的成分及含量。該技術(shù)的優(yōu)勢在于直接收集樣品中的易揮發(fā)成分，無需溶劑提取減少了對分析人員及環(huán)境的危害。

表面增強(qiáng)拉曼散射 (Surface－Enhanced Raman Scattering，SERS)是指在納米級粗糙金屬表面或溶膠中，吸附分子的拉曼散射信號比普通拉曼散射信號大大增強(qiáng)的現(xiàn)象。

當(dāng)單色入射光照射到具有一定粗糙度的貴金屬表面時，吸附在金屬表面的某些有機(jī)物的拉曼散射信號可以得到大大增強(qiáng)，其增強(qiáng)因子可以達(dá)到105—106倍［25］。自從1974年，F(xiàn)leischmann等人［26］首次在粗糙的銀電極表面單分子層吡啶吸附物的拉曼散射實(shí)驗(yàn)中觀察到這種現(xiàn)象，此后SERS逐漸發(fā)展為一個非常活躍的研究領(lǐng)域。目前，SERS檢測已達(dá)到了單分子探測水平［27—28］。

SERS在揮發(fā)性氣體檢測方面的文獻(xiàn)較少，1995年Keith T.Carron將SERS與氣相色譜結(jié)合，獲得了苯、甲苯、乙苯及二甲苯的表面增強(qiáng)拉曼光譜［29］。為了遠(yuǎn)距離、實(shí)時、在線檢測揮發(fā)性有機(jī)化合物，P.A.Mosier－Boss研究小組，將表面有硫醇膜的SERS基底安裝在熱電冷卻器上，制成傳感器，用該傳感器成功獲得了有機(jī)氯溶劑 (三氯乙烯、氯仿、全氯乙烯)、芳香族化合物(苯、甲苯、乙苯及二甲苯)、甲基叔丁基醚的SERS譜［30］。最近，韓國首爾大學(xué)的Kwan kim等將2，6－二甲基苯異腈吸附在聚 (乙烯亞胺)包覆的納米金上，構(gòu)建傳感器。當(dāng)傳感器探測到植物揮發(fā)性有機(jī)物，如異戊二烯、法尼醇、(+)－α－蒎烯時，2，6－二甲基苯異腈的N－C伸縮振動峰的峰位會發(fā)生移動，從而間接的檢測植物揮發(fā)性有機(jī)物［31］。目前未見用表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)直接研究植物揮發(fā)性有機(jī)物的報道。

本課題組用頂空 (headspace)與SERS技術(shù)結(jié)合的方式，對蔥屬植物大蒜 (garlic)、韭菜(Chinese chive)、大蔥 (scallion)、多星韭、大花韭、木里韭、藠頭等的揮發(fā)性物質(zhì)進(jìn)行初步研究，并與標(biāo)準(zhǔn)樣品的SERS譜對比。

大蒜的主要揮發(fā)性物質(zhì)為二丙烯基二硫;大蔥揮發(fā)性氣體SERS譜主要為1－丙硫醇和丙烯基甲基硫醚氣體的SERS譜帶組成;韭的揮發(fā)性氣體SERS譜主要以烯丙基甲基硫醚和二烯丙基二硫氣體的SERS譜帶組成;多星韭?lián)]發(fā)物中含有1－丙硫醇成分;大花韭的揮發(fā)物中含有丙烯基甲基硫醚和二烯丙基二硫成分;木里韭?lián)]發(fā)物中含有二烯丙基二硫、1－丙硫醇、丙烯基甲基硫醚成分;藠頭、小根蒜揮發(fā)性氣體的SERS譜主要為丙烯基甲基硫醚和1－丙硫醇?xì)怏w的SERS譜帶組成。具體見表5。

表5 所測樣品主要揮發(fā)物

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，大蒜的主要揮發(fā)物與文獻(xiàn) ［14］、［15］、［16］、［17］的一致都為二烯丙基二硫，大蔥的主要揮發(fā)物與文獻(xiàn) ［10］一致，主要為1－丙硫醇，韭菜的主要揮發(fā)物與文獻(xiàn)［18］中的兩種一樣，即烯丙基甲基硫醚和二烯丙基二硫醚，而小根蒜、藠頭的主要揮發(fā)物與文獻(xiàn) ［22］、［23］、［24］都不一樣;蔥屬植物不同種的主要揮發(fā)物不一樣。說明頂空技術(shù)SERS結(jié)合可直接用于蔥屬植物的主要揮發(fā)物的鑒別研究。從實(shí)驗(yàn)的過程看，所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性好。

某些種類植物在生長過程中會釋放出揮發(fā)性氣體物質(zhì)，而且這些揮發(fā)性氣體物質(zhì)對某一種植物具有一定特異性 (如:根據(jù)其氣味我們能分辨是大蒜還是藠頭)。因此能否用頂空－SERS方法結(jié)合化學(xué)計量方法進(jìn)行蔥屬植物種的分類，該方法是否可用于其他屬植物揮發(fā)性物質(zhì)研究，都是非常值得研究的課題，而且，這些研究對合理開發(fā)云南省豐富的植物資源具有重要的意義。

［1］Seo KI，MoonYH，Choi Su，Park KH.Antibacterial activity of S－methyl methane thiosulfinate and S－methyl 2－propene－1－thiosulfinate from Chinese chive toward Escherichia coli O157:H7［J］.Biosci.Biotechnol Biochem，2001，65(4):966—968.

［2］Shun－ JenT.Physiological effects of bioactivecom －ponents of Allium species［J］.FoodSci.Taiwan，1997，24(6):629—648.

［3］BernhardRA.The sulphur components of Allium species as flavoring matter［J］.Qual.Plant Mater.Veg.，1969，18:72— 80.

［4］Iida H，Hashimoto S，Miyazawa M，Kameoka H.Volatile flavor components of NIR(Alliumtube－rosumRottl.) ［J］.J.FoodSci.，1983，48:663—666.

［5］何洪巨，王希麗，張建麗.GC－MS法測定大蔥、細(xì)香蔥、小蔥中的揮發(fā)性物質(zhì) ［J］.分析測試學(xué)報，2004，(23):98—101.

［6］黃雪松.大蔥揮發(fā)油含量與化學(xué)成分的分析 ［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2004， (10):114—117.

［7］Pino JA，RosadoA，F(xiàn)uentesV.Volatile flavor compounds from Allium fistulosumL.J.Essent［J］.Oil Res. ，2000，12(5):553— 555.

［8］Pino J A，F(xiàn)uentes V.Volatile constituents of Chinese chive(Allium tuberosum Rottl.ex Sprengel)and rakkyo(Allium chinense G.Don) ［J］.Agric.Food.Chem. ，2001，49(3):1328— 1330.

［9］劉源，周光宏，徐幸蓮.固相微萃取及其在食品分析中的應(yīng)用 ［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2003，29(7):83— 87.

［10］楊天慧，魏佑營，王超，王馨笙，劉莎莎，段曦.大蔥、洋蔥遠(yuǎn)緣雜交后代及其親本揮發(fā)性成分分析 ［J］.山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，(6):35—39.

［11］ZHANG Zhuo－min，WU Wen－wei，LI Gong－ke.HSSPME－GC/MC study of the aroma volatiles of allium species and chemometric interpretation for the aroma characteristics ［J］.Plant.Sci，2006，I(4):315—323.

［12］劉源，周光宏，王錫昌，劉揚(yáng)岷，王利平.頂空固相微萃取氣質(zhì)聯(lián)用分析香蔥揮發(fā)性風(fēng)味成分 ［J］.中國調(diào)味品，2007，(9):61—64.

［13］Eila P.J?rvenp??，Zhouyao Zhang，Rainer Huopalahti，Jerry w.king.Determination of fresh onion(Allium cepa L.)volatiles by solid phase microextraction combined with gas chromatography－mass spectrometry［J］.Z Lebensm Unters Forsch A，1998，207:39—43.

［14］Jessica G.Clemente，Jack D.Williams，Marlene Cross，Candace C.Chambers.Analysis of Garlic Cultivars Using Head Space Solid Phase Microextrac－tion/Gas Chromatography/Mass Spectroscopy［J］.The Open Food Science Journal，2011，(6):1—4.

［15］Ruta Galoburda，Karina Bodniece，Thierry Talou.Allium sativum Flavor Compounds as an Indicator for Garlic Identity and Quality Determination ［J］.Journal of Food Science and Engineering 2013，(3):226—234.

［16］Sun－Neo Lee，Nam －Sun Kim，Dong－Sun Lee.Comparative study of extraction techniques for determination of garlic flavor components by gas chromatography–mass spectrometry ［J］.Anal Bio－anal Chem，2003，377:749.

［17］Na Young Kim，Min Hee Park，Eun Yeong Jang，JaeHwan Lee.Volatile Distribution in Garlic(Allium sativum L.)by Solid Phase Microextraction(SPME)with Different Processing Conditions ［J］.Food Sci.Biotechnol.2011，20(3):775—782.

［18］R.S.Mann，R.L.Rouseff，J.M.Smoot，W.S.Castle，L.L.Stelinski.Bulletin of Entomological Research ［J］.Cambridge Journals，2011，101:89—97.

［19］Suling Zhang，Zhuo Du，Gongke Li.Graphene－supported zinc oxide solid－phase microextraction coating with enhanced selectivity and sensitivity for the determination of sulfur volatiles in Allium species［J］.Journal of Chromatography A，2012 ，1260:1—8.

［20］Yuji Yabuki，Yoshitaka Mukaida，Yoshinori Saito，Kazunori Oshima，Tatsuo Takahashi，Eiichi Muroi，Kei Hashimoto，Yasushi Uda.Characterisation of volatile sulphur－ containing compounds generated in crushed leaves of Chinese chive(Allium tuberosum Rottler) ［J］.Food Chemistry，2010，120:343—348.

［21］Mi－Sook Chung.Volatile Compounds of the Cultivated Dumebuchu(Allium senescens L.var.senescens) ［J］.Food Sci.Biotechnol.2010，19(6):1679—1682.

［22］吳雁，彭軍鵬，姚利強(qiáng)，姚新生.蔥屬植物揮發(fā)油研究－1中藥薤白 (Allium macrostcmon Bunge)揮發(fā)油成分的研究 ［J］.沈陽藥學(xué)院學(xué)報，1993，10(1):45—46.

［23］彭軍鵬、喬艷秋，肖克岳，姚新生.蔥屬植物揮發(fā)油研究Ⅲ－薤 (Allium chinense G.Don)揮發(fā)油成分的研究 ［J］.中國藥物化學(xué)雜志，1994，4(4):282—283.

［24］Hiromu Kameoka，Hiroshi Iida，Seiji Hashimoto，Mituo Miyazawa.Sulphides and furanones from steam volatile oils of Allium fistulosum and Allium chinense phytochemistry ［J］.Phytochemistry ，1984.23(1):155—157.

［25］Fleischmann M，Hendra P J，Mcquillan A J.Raman Spectra of Pyridine Adsorbed at a Silver Electrode ［J］.Chemical Physics Letters，1974，26(2):163—166.

［26］Jinghuai Fang，Yunxia Huang，Xia Li，Xiaoming Dou.Aggregation and surface enhanced Raman activity study of dye coated mixed silver gold colloids［J］.Raman Spectroscopy.2004，35(11):914—920.

［27］Ying Hui Zhang，Dong Ming Chena，Tianjing Hea and Fan Chen Liu.Reaction of metallotetraphenylporphyrins on hydroxyl modified silver colloid and Ag2O colloid by surface enhanced Raman scattering ［J］.Spectrochimica Acta Part A.2001，57(13):2599—2605.

［28］Dong Kwon Lim，Ki Seok Jeon，HyungMin Kim，Jwa Min Nam，Yung Doug Suh.Nanogap engineerable Raman active nanodumbbells for single molecule detection ［J］.Nuture Materials.2010，(9):60—67.

［29］EeithT.Carron，BrianJ.Kennedy.Molecular specific chromatographic detector using modified SERS substrates Anal［J］.Chem.，1995，67(18):3353—3356.

［30］P.A.Mosier Boss，S.H.Lieberman.Detection of volatile organic compounds using surface enhanced Raman spectroscopy substrates mounted on a thermoelectric cooler ［J］.Analytica Chimica Acta.2003，488:15—23.

［31］Kwan Kim，Ji Won Lee，Kuan Soo Shin.Detection of a few of biogenic volatile organic compounds by means of Raman scattering of isocyanide adsorbed gold nanostructures ［J］.Spectrochimica Acta Part A.2013，100:15—20.