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        晶體氨基酸替代魚(yú)粉蛋白對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)消化酶和代謝酶活力的影響

        2014-03-17 00:38:36艾慶輝麥康森
        水生生物學(xué)報(bào) 2014年5期
        關(guān)鍵詞:舌鰨稚魚(yú)消化酶

        張 珊 艾慶輝 麥康森 徐 瑋 韓 冰

        (中國(guó)海洋大學(xué)教育部海水養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 青島 266003)

        晶體氨基酸替代魚(yú)粉蛋白對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)消化酶和代謝酶活力的影響

        張 珊 艾慶輝 麥康森 徐 瑋 韓 冰

        (中國(guó)海洋大學(xué)教育部海水養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 青島 266003)

        為研究人工微顆粒飼料中晶體氨基酸替代魚(yú)粉蛋白對(duì)半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis Günther)稚魚(yú)消化酶和代謝酶活力的影響, 以晶體氨基酸混合物分別替代0%、25%、50%、75%和100%魚(yú)粉蛋白(0%CAA、25%CAA、50%CAA、75%CAA和100%CAA), 在25%替代水平設(shè)計(jì)棕櫚酸甘油酯包被晶體氨基酸混合物組(C-25%CAA), 配制實(shí)驗(yàn)微顆粒飼料。每種微顆粒飼料隨機(jī)投喂三組實(shí)驗(yàn)魚(yú)[初始體重(0.094±0.02) g, 35日齡],每組實(shí)驗(yàn)魚(yú)放養(yǎng) 150尾, 養(yǎng)殖周期 28d。研究結(jié)果表明, 在不包膜條件下, 各處理組的胰蛋白酶活力隨替代水平的升高顯著下降(P<0.05), 且包膜處理組(C-25%CAA)與全魚(yú)粉組無(wú)顯著差異(P>0.05)。腸段胰蛋白酶活力與胰段胰蛋白酶活力比值隨氨基酸替代水平的升高顯著下降(P<0.05), 魚(yú)粉組顯著高于 75%和 100%處理組(P<0.05), 但與25%處理組、包膜處理組(C-25%CAA)和50%處理組無(wú)顯著差異(P>0.05)。各處理組淀粉酶活力隨替代水平的升高顯著上升(P<0.05)。亮氨酸氨肽酶(LA)和堿性磷酸酶(AP)活力(腸段與刷狀緣)均隨替代水平的升高顯著下降(P<0.05), 包膜處理組(C-25%CAA)與全魚(yú)粉組無(wú)顯著差異(P>0.05)。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/AST)活力隨替代水平的升高顯著上升(P<0.05), 50%、75%和100%處理組顯著高于魚(yú)粉組、25%處理組和包膜處理組(C-25%CAA)。研究結(jié)果顯示, 飼料中晶體氨基酸顯著影響了半滑舌鰨稚魚(yú)的消化酶和代謝酶活力, 而且在25%的替代水平下, 與未包膜組相比, 包膜處理組能顯著促進(jìn)半滑舌鰨稚魚(yú)消化系統(tǒng)的發(fā)育。

        半滑舌鰨; 仔稚魚(yú); 氨基酸; 酶; 營(yíng)養(yǎng); 代謝

        半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis Günther)屬鰈形目, 舌鰨科, 舌鰨屬, 俗稱牛舌頭、鰨目、鰨米, 為溫水性近海底層魚(yú)類, 在我國(guó)沿海均有分布, 尤以渤海、黃海為多[1,2], 是一種高檔的經(jīng)濟(jì)海產(chǎn)品, 其肉質(zhì)鮮美, 深受消費(fèi)者喜愛(ài)。半滑舌鰨育苗生產(chǎn)主要依靠輪蟲(chóng)、鹵蟲(chóng)等生物餌料, 其轉(zhuǎn)餌期間會(huì)出現(xiàn)大規(guī)模死亡, 主要原因可能是生物餌料營(yíng)養(yǎng)不平衡,仔稚魚(yú)消化系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟, 對(duì)餌料的消化吸收能力差等原因。

        在仔稚魚(yú)個(gè)體發(fā)育的早期, 消化系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟, 尤其是對(duì)蛋白質(zhì)的消化能力比較低, 無(wú)法通過(guò)對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收來(lái)滿足自身對(duì)氨基酸的需求[3,4]。仔稚魚(yú)早期階段就可以檢測(cè)到多種消化酶的活性[5,6]。仔稚魚(yú)可以通過(guò)攝取的食物來(lái)調(diào)節(jié)體內(nèi)消化酶的分泌水平[7]。因此推斷在仔稚魚(yú)的飼料中添加一定水平的晶體氨基酸, 將有利于促進(jìn)仔稚魚(yú)消化酶的分泌, 并提高對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的能力。不同的消化酶活力變化可以反映出仔稚魚(yú)消化系統(tǒng)的發(fā)育狀況, 而且還可以根據(jù)仔稚魚(yú)體內(nèi)消化酶活性的變化來(lái)判斷其對(duì)餌料的吸收情況。氨基酸代謝酶活性往往是作為魚(yú)體內(nèi)氨基酸代謝水平的指示器,可以反映出魚(yú)體內(nèi)氨基酸的代謝情況[8—11]。對(duì)仔稚魚(yú)消化酶和代謝酶活力的研究, 有助于深入了解海水仔稚魚(yú)的生長(zhǎng)、攝食、消化功能的發(fā)育和完善, 并對(duì)仔稚魚(yú)人工微顆粒飼料的選擇具有重要的意義。

        本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究人工微顆粒飼料中晶體氨基酸替代魚(yú)粉蛋白對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)的消化酶和代謝酶活力的影響, 進(jìn)一步探討晶體氨基酸對(duì)魚(yú)粉的最適替代量, 對(duì)優(yōu)化飼料成本, 保持魚(yú)類良好的生長(zhǎng)性能和提高飼料蛋白利用率具有重要意義。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)魚(yú)苗與養(yǎng)殖方法

        實(shí)驗(yàn)在山東省海陽(yáng)市黃海水產(chǎn)有限公司進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)用魚(yú)苗為該場(chǎng)人工繁育的35日齡半滑舌鰨魚(yú)苗,平均體重為(0.094±0.02) g。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)挑選外觀正常、體格均勻、健壯的魚(yú)苗2700尾, 隨機(jī)分成18組,每組150尾, 分別放于循環(huán)水系統(tǒng)中。實(shí)驗(yàn)期間, 水溫控制在24—25℃, pH在7.8—8.0, 鹽度在29‰—30‰。每桶內(nèi)設(shè)1個(gè)充氣石, 循環(huán)水系統(tǒng)。桶內(nèi)水表面的光強(qiáng)度在白天維持在7.9 W/m2左右。每日用自制虹吸器吸底2次, 以及時(shí)清除池底殘餌, 死苗用撈網(wǎng)及時(shí)撈出, 稱量計(jì)數(shù)。

        半滑舌鰨魚(yú)苗自15—30日齡投喂鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體,自30—35日齡用鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體和微顆粒飼料聯(lián)合投喂,其間逐漸減少鹵蟲(chóng)的投喂量。35日齡后停止投喂鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體, 每天手工投喂微顆粒飼料5次(7:00、10:00、15:00、19:00和22:00), 飽食投喂, 養(yǎng)殖周期28d。

        1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)飼料

        實(shí)驗(yàn)飼料配制參照劉峰等[12]的方法。以晶體氨基酸混合物梯度替代0%、25%、50%、75%和100%魚(yú)粉蛋白(0%CAA、25%CAA、50%CAA、75%CAA和100%CAA), 其中 25%替代水平下設(shè)計(jì)不包被晶體氨基酸混合物和包被晶體氨基酸混合物(C-25%CAA)兩個(gè)對(duì)比處理組(表1)。飼料氨基酸組成見(jiàn)表2。晶體氨基酸混合物中氨基酸組成模式參照所用白魚(yú)粉的氨基酸組成, 包膜晶體氨基酸組(C-25%CAA組)氨基酸以棕櫚酸甘油酯包被, 包被方法參照 López-Alvarado[13]的方法。飼料保存于–20℃以備用。

        1.3 取樣與分析方法

        實(shí)驗(yàn)結(jié)束(63日齡)時(shí), 停食24h后取樣, 全部魚(yú)苗用2 mL和5 mL離心管液氮冷凍保存以備進(jìn)行酶活力分析。飼料常規(guī)成分分析測(cè)定方法參照AOAC[14],樣品置于105℃烘箱中至恒重, 水分的含量由烘干前后樣品的質(zhì)量變化量計(jì)算而得; 粗蛋白采用凱氏定氮儀(Kjeltec-2300, Sweden)測(cè)定樣品而得; 粗脂肪采用索氏抽提儀(B-801, Switherland)測(cè)定; 灰分采用灼燒法測(cè)定。用于氨基酸成分分析的樣品均經(jīng)冷凍干燥至恒重, 取0.02 g左右樣品用 6 mol/L 鹽酸在110℃下消化22h以上, 過(guò)濾至50 mL容量瓶中并用超純水(Milli-Q system)定容后混合均勻, 取2 mL溶液至5 mL玻璃瓶中并放置于真空干燥箱(VD23, Germany)干燥, 干燥完后加2 mL超純水溶解殘留物后至瓶?jī)?nèi)液體全部蒸發(fā), 重復(fù)3次, 然后加2 mL loading-buffer溶解殘留物, pH為2.0—2.5。上清液用氨基酸自動(dòng)分析儀(Biochrom 30, GE, England)通過(guò)柱后衍生法測(cè)定氨基酸組成。

        分析消化酶活力時(shí), 按照Ribeiro, et al.[15]的方法, 于0℃的冰上, 在解剖鏡下將消化道在食道與幽門(mén)括約肌的連接處切開(kāi)獲得胰段和腸段, 胰段部分包括胰腺、胃和肝臟。胰蛋白酶活力的分析按照Holm, et al.[16]的方法, 用Nα–Benzoyl–DL–arginine–p–nitroanilide (BAPNA, B–4875, Sigma)作底物。淀粉酶活力按照Métais和Bieth[17]的方法測(cè)定。堿性磷酸酶和亮氨酸氨肽酶酶活力按照Bessey, et al.[18]和Maroux, et al.[19]的方法測(cè)定。腸道刷狀緣的分離按照Cahu, et al.[20]的方法, 將腸段用50 mmol/L甘露醇和2 mmol/L Tris混合溶液勻漿, 然后加入0.1 mol/L的CaCl2溶液, 9000×g離心10min, 取上清液, 340000×g離心20min。最后用配制好的0.1 mol/L KCl, 5 mmol/L Tris-Hepes 和1 mmol/L DTT 混合溶液溶解沉淀,即分離出腸上皮刷狀緣。谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST/GOT)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)采用賴氏法測(cè)定。活力用比活力表示(mU/mg·protein)。蛋白濃度的測(cè)定參照Bradford[21]的方法, 用牛血清蛋白(BSA, A–2153, Sigma)作底物。測(cè)定時(shí)先將樣品用5倍體積(v/w)的0℃蒸餾水勻漿, 用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(Shimadzu, UV–2401PC)進(jìn)行分析。

        1.4 統(tǒng)計(jì)方法

        采用 SPSS 17.0對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差(ANOVA)分析, 若各處理組之間差異達(dá)到顯著(P<0.05), 則進(jìn)行Tukey多重比較。分析結(jié)果均用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

        2 結(jié)果

        2.1 晶體氨基酸替代魚(yú)粉蛋白對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)的消化酶活力的影響

        在不包膜條件下, 各處理組的胰段胰蛋白酶活力隨替代水平的升高顯著下降, 包膜處理組(C-25% CAA 處理組)(22.36 mU/mg·protein)與全魚(yú)粉組(22.17 mU/mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05), 但顯著高于其余各組(P<0.05)。腸段胰蛋白酶活力與胰段胰蛋白酶活力呈相似的變化趨勢(shì), 包膜處理組(C-25%CAA處理組)(24.16 mU/mg·protein)與全魚(yú)粉組(24.92 mU/mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05), 但顯著高于其他各組(P<0.05), 100%CAA 處理組(11.11 mU/mg·protein)顯著低于其余各組(P<0.05)。腸段胰蛋白酶活力與胰段胰蛋白酶活力比值隨氨基酸替代水平的升高顯著下降, 魚(yú)粉組顯著高于75%和100%處理組(P<0.05), 但與25%處理組、包膜處理組(C-25%處理組)和 50%處理組無(wú)顯著差異(P>0.05)(表3)。

        表1 實(shí)驗(yàn)飼料配方(%,干重)Tab. 1 Formulation and chemical composition of the experimental diets (%, dry matter)

        胰段淀粉酶活力, 隨著氨基酸替代水平的升高,呈上升的趨勢(shì)。包膜處理組(C-25%CAA處理組)(1.04 U/mg·protein)與全魚(yú)粉組(1.05 U/mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05), 但顯著低于其他各組(P<0.05)。腸段淀粉酶活力, 隨氨基酸替代水平的升高也呈上升的趨勢(shì)。包膜處理組(C-25%CAA處理組)(1.22 U/mg·protein)顯著低于 100%處理組(2.56 U/mg·protein)(P<0.05)(表3)。

        腸刷狀緣亮氨酸氨肽酶(LA)活力隨替代水平的升高顯著下降, 包膜處理組(C-25%CAA 處理組)(782.30 mU/mg·protein)與全魚(yú)粉組(782.40 mU/ mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05), 顯著高于其余各組(P<0.05)。腸LA活力與刷狀緣LA有相似的變化趨勢(shì), 25%處理組(80.29 mU/mg·protein)、包膜處理組(C-25%CAA處理組)(95.18 mU/mg·protein)與全魚(yú)粉組(95.09 mU/mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05), 顯著高于其他各組(P<0.05)。在不包膜條件下, 腸刷狀緣堿性磷酸酶(AP)活力隨氨基酸替代水平的升高顯著下降。25%處理組(932.37 U/mg·protein)、包膜處理組(C-25%CAA處理組)(1053.66 U/mg·protein)與全魚(yú)粉組(1014.25 U/mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05)。腸AP活力與刷狀緣AP活力有相似的變化趨勢(shì)。包膜處理組(C-25%CAA處理組) (122.69 U/mg·protein)與全魚(yú)粉組(118.06 U/mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05),顯著高于其余各組(P<0.05)(表3)。

        表2 實(shí)驗(yàn)飼料氨基酸組成(%, 干重)Tab. 2 Amino acid profiles of the experimental diets (%, dry matter)

        2.2 晶體氨基酸替代魚(yú)粉蛋白對(duì)半滑舌鰨稚魚(yú)的代謝酶活力的影響

        各處理組谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST/GOT)活力均隨替代水平的升高顯著上升。GPT活力在全魚(yú)粉組(27.68 U/mg·protein)最低, 與25%處理組(33.30 U/mg·protein)和包膜處理組(C-25% CAA處理組)(28.30 U/mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05), 但顯著低于 50%、75%和 100%處理組(P<0.05)。GOT活力也在全魚(yú)粉組(27.75 U/mg·protein)最低, 但與25%處理組(32.75 U/mg·protein)和包膜處理組(C-25% CAA處理組)(29.50 U/mg·protein)無(wú)顯著差異(P>0.05), 顯著低于50%、75%和100%處理組(P<0.05) (表3)。

        3 討論

        在仔稚魚(yú)發(fā)育過(guò)程中, 胰腺外分泌能力的大小體現(xiàn)了仔稚魚(yú)消化系統(tǒng)的成熟與否[22]。一般認(rèn)為,腸段胰蛋白酶活力與胰段胰蛋白酶活力比值(Trypsin(I) / Trypsin(P))的大小是反映胰腺外分泌能力高低的指標(biāo)[19], 本實(shí)驗(yàn)中魚(yú)粉組的腸段胰蛋白酶活力與胰段胰蛋白酶活力比值顯著高于 75%和100%處理組, 但與25%處理組、包膜處理組(C-25%處理組)和50%處理組無(wú)顯著差異。這說(shuō)明替代水平低于 50%時(shí), 半滑舌鰨稚魚(yú)的胰腺外分泌功能不受影響。另外, 淀粉酶也可以作為衡量胰腺外分泌發(fā)育成熟與否的指標(biāo)[23]。淀粉酶活力在仔稚魚(yú)的發(fā)育中隨著胰腺外分泌的發(fā)育而下降[20], 因此, 可以認(rèn)為淀粉酶活力的下降在一定程度上反映了仔稚魚(yú)消化系統(tǒng)趨于成熟。本實(shí)驗(yàn)淀粉酶活力隨著氨基酸替代水平的升高顯著上升, 包膜處理組(C-25%處理組)與魚(yú)粉組無(wú)顯著差異。這表明適宜的氨基酸替代水平有助于稚魚(yú)胰腺外分泌功能的發(fā)育。但也有研究發(fā)現(xiàn), 淀粉酶活力可能受食物中淀粉的誘導(dǎo)影響[20]。王重剛等[24]研究發(fā)現(xiàn), 用不同餌料投喂真鯛 (Pagrosomus major) 稚魚(yú)時(shí), 淀粉酶活性與餌料中淀粉含量呈正相關(guān)的關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)中, 隨著氨基酸替代水平的升高, 飼料中淀粉含量也逐漸升高, 這可能也與淀粉酶活力升高有一定的關(guān)系。

        仔稚魚(yú)發(fā)育過(guò)程中另一個(gè)重要方面就是腸道刷狀緣消化酶的分泌與其功能的完善[22,25—28]。堿性磷酸酶(AP)和亮氨酸氨肽酶(LA)存在于魚(yú)類前腸上皮細(xì)胞和刷狀緣上, 可以作為評(píng)價(jià)脊椎動(dòng)物幼體腸道吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能力的指標(biāo), 且兩者活力的高低可以反映出腸道刷狀緣細(xì)胞的發(fā)育程度[29,30]。Galaviz等[31]在尖吻鱸(Atractoscion nobilis)仔稚魚(yú)上研究發(fā)現(xiàn), 亮氨酸氨肽酶(LA)隨著個(gè)體發(fā)育的逐漸成熟呈升高的趨勢(shì), 最后趨于平穩(wěn)。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示, 稚魚(yú)的亮氨酸氨肽酶在腸和刷狀緣均呈現(xiàn)相似的趨勢(shì),說(shuō)明半滑舌鰨稚魚(yú)腸道已發(fā)育完全, 而亮氨酸氨肽酶活力隨替代水平升高顯著降低, 包膜氨基酸處理組(C-25% CAA處理組)與全魚(yú)粉組無(wú)顯著差異, 顯著高于不包膜 25% CAA處理組, 表明飼料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)影響了稚魚(yú)的腸道發(fā)育水平。堿性磷酸酶也具有相同的趨勢(shì), 而且實(shí)驗(yàn)中較高的氨基酸替代水平堿性磷酸酶活力下降, 也可以推斷出稚魚(yú)對(duì)營(yíng)養(yǎng)的吸收不良[20]。本實(shí)驗(yàn)在 25%替代水平下, 包膜組的消化酶活力顯著高于不包膜組, 說(shuō)明氨基酸經(jīng)包膜處理后有利于稚魚(yú)腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。將晶體氨基酸用耐消化的壁材包被起來(lái), 其在腸道中的釋放速度可能會(huì)達(dá)到與完整蛋白中氨基酸相似的釋放速度[32]。同時(shí), 包被處理也可以減少晶體氨基酸在養(yǎng)殖水環(huán)境中的溶失。

        谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST/ GOT)是廣泛存在于動(dòng)物組織線粒體中的氨基轉(zhuǎn)移酶, 在機(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起重要作用, 氨基酸代謝增強(qiáng)會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)氨酶活性升高。從兩種氨基酸代謝酶的結(jié)果來(lái)看, 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT/ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST/GOT)活力均隨替代水平的升高顯著上升, 50%、75%和100%處理組顯著高于25%處理組、包膜處理組和魚(yú)粉組。適宜的氨基酸替代水平可以有利于氨基酸的代謝和魚(yú)體蛋白質(zhì)的合成, 而過(guò)高的氨基酸替代水平將加速氨基酸的氧化代謝, 不利于蛋白質(zhì)在魚(yú)體內(nèi)的沉積。主要原因可能為過(guò)高的氨基酸水平導(dǎo)致了晶體氨基酸的高效吸收, 進(jìn)而引起氨基酸的過(guò)度分解代謝從而降低其利用率[33], 而且晶體氨基酸與蛋白結(jié)合態(tài)氨基酸吸收速率不同步亦將造成氨基酸的不平衡, 影響到氨基酸庫(kù)中其他氨基酸的利用效率, 并因而降低蛋白質(zhì)的合成效率[34],當(dāng)氨基酸組成不平衡時(shí), 被氧化的氨基酸就會(huì)增加,大量的氨基酸被脫去氨基, 進(jìn)入三羧酸循環(huán)被氧化供能, 或轉(zhuǎn)化成糖和脂肪[35,36], 從而影響蛋白質(zhì)在魚(yú)體內(nèi)的沉積。

        綜上所述, 飼料中晶體氨基酸顯著影響了半滑舌鰨稚魚(yú)的消化酶和代謝酶活力, 且在 25%的替代水平下, 與未包膜組相比, 包膜處理組能顯著促進(jìn)半滑舌鰨稚魚(yú)的消化系統(tǒng)的發(fā)育, 因此推斷在半滑舌鰨稚魚(yú)微顆粒飼料中添加適量的包膜氨基酸替代魚(yú)粉蛋白是可行的。本研究認(rèn)為在不降低蛋白利用的前提下, 晶體氨基酸替代魚(yú)粉蛋白的比例可能要小于25%, 即小于飼料干重的9%, 具體適宜替代比例仍有待進(jìn)一步研究。

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        [36] Ballantyne J S. Amino Acid Metabolism [M]. In: Wright P A, Anderson A J (Eds.), Fish Physiology, 2001, 77—107Abstract:The study was conducted to investigate the effects of replacement of fish meal protein by crystalline amino acids on digestive enzymes and metabolism enzymes in tongue sole larvae. Five isoproteic and isolipidic diets were formulated to replace 0%, 25%, 50%, 75%, 100% fish meal (0% CAA, 25% CAA, 50% CAA, 75% CAA and 100% CAA) respectively. At the replacement level of 25%, another diet was formulated with amino acids coated with tripalmitin (C-25% CAA). Each micro diet was randomly fed to triplicate groups of fish, and each group had 150 fish. The results showed that the activities of trypsin significantly decreased with increasing dietary crystalline amino acids, but there were no significant differences between C-25% CAA and 0% CAA (P>0.05). The ratio of Trypsin(I) to Trypsin(P) significantly decreased with increasing dietary crystalline amino acids, and 0% CAA was significantly higher than 75% CAA and 100% CAA. The activities of amylase significantly increased with increasing dietary crystalline amino acids. The activities of leucine-amino peptidase and alkaline-phosphatase in intestine and purified brush border membrane of intestine significantly decreased with increasing dietary crystalline amino acids, but no significant differences were observed between C-25% CAA and 0% CAA (P>0.05). Glutamic-pyruvic transaminase and Glutamic-oxalacetic transaminease significantly increased with increasing dietary crystalline amino acids. In conclusion, crystalline amino acids in the micro diet significantly influenced the digestive and metabolic enzymes of tongue sole larvae. In the replacement level of 25%, Comparing with 25% CAA group crystalline amino acids coated with tripalmitin (C-25% CAA) could promote the development of digestion system in tongue sole larvae.

        EFFECTS OF FISH MEAL REPLACEMENT WITH CRYSTALLINE AMINO ACID ON DIGESTIVE AND METABOLIC ENZYMES OF TONGUE SOLE (CYNOGLOSSUS SEMILAEVIS GüNTHER, 1873) LARVAE

        ZHANG Shan, AI Qing-Hui, MAI Kang-Sen, XU Wei and HAN Bing
        (Key Laboratory of Mariculture, Certificated by Education Ministry of China, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)

        Tongue sole; Larval; Amino acid; Enzymes; Nutrition; Metabolism

        S965.3

        A

        1000-3207(2014)05-0801-08

        10.7541/2014.121

        2013-01-22;

        2013-11-28

        國(guó)家鲆鰈類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(編號(hào): CARS50-G08)資助

        張珊(1987—), 女, 山東蓬萊人, 碩士; 研究方向?yàn)樗a(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料。E-mail: zhangshan719@126.com

        艾慶輝, 教授, E-mail: qhai@ouc.edu.cn

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