雷樹(shù)明，張燕新，楊娟，陳順安

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所，云南蒙自661101）

不同蜂膠制品的品質(zhì)和黃酮含量分析

雷樹(shù)明，張燕新，楊娟，陳順安*

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所，云南蒙自661101）

比較分析了同一品牌不同蜂膠制品的品質(zhì)，并參照蜂膠國(guó)標(biāo)對(duì)蜂膠主要有效成分黃酮類(lèi)物質(zhì)的含量進(jìn)行了分析，使用分光光度比色法測(cè)定了提純蜂膠、蜂膠膠囊、毛膠、蜂膠片、蜂膠液中的黃酮含量。由于不同蜂膠制品的加工工藝不同，其黃酮類(lèi)物質(zhì)含量有所差異。提純蜂膠是由毛膠提純而來(lái)，未加入任何添加劑，黃酮含量為較高（45.56％）；蜂膠膠囊中的添加輔料較少，黃酮含量也相對(duì)較高（27.78％）；而毛膠含的雜質(zhì)較多，黃酮含量稍低（14.25％）；而蜂膠片、蜂膠液制品中的輔料相對(duì)較多，故黃酮含量相對(duì)低（分別為8.91％、3.99％）。

蜂膠制品；黃酮類(lèi)物質(zhì)；分光光度比色法；黃酮含量；感官

蜂膠具有抗菌消炎、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫能力等藥理作用，其所含黃酮類(lèi)化合物是蜂膠發(fā)揮藥理作用的主要基礎(chǔ)物質(zhì)[1]。由于蜂膠所具有很多的保健功能，近年來(lái)，蜂膠成為了人們比較喜歡的保健品之一，國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究者對(duì)蜂膠及其制品的開(kāi)發(fā)研究和應(yīng)用越來(lái)越多，市場(chǎng)上出現(xiàn)了繁多的蜂膠產(chǎn)品。但大多數(shù)消費(fèi)者對(duì)蜂膠產(chǎn)品的主要成分和質(zhì)量等情況了解甚少，相關(guān)的調(diào)查研究也不多。

蜂膠原料的主要成分包括黃酮類(lèi)、萜烯類(lèi)等化合物，其出產(chǎn)地和膠源植物不同其所含黃酮類(lèi)、萜烯化類(lèi)合物的種類(lèi)和含量有所不同[2]。蜂膠制品的主要成分受其原料品質(zhì)、加工工藝等因素影響，原料和加工工藝不同都會(huì)導(dǎo)致其最終成分不同。

目前對(duì)中華圓田螺的研究和資源開(kāi)發(fā)利用主要集中在飼養(yǎng)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的研究，但對(duì)其體內(nèi)的抗菌肽的分離、純化及其抗癌生物活性作用的研究至今未見(jiàn)報(bào)道。

目前對(duì)蜂膠制品的研究和開(kāi)發(fā)利用主要集中在蜂膠加工工藝技術(shù)和營(yíng)養(yǎng)成分的研究，但對(duì)不同蜂膠制品品質(zhì)和黃酮含量差異的研究報(bào)道較少。因此，本研究以同一廠家的提純蜂膠、蜂膠膠囊、毛膠、蜂膠片、蜂膠液制品進(jìn)行了品質(zhì)和黃酮含量的分析研究。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

蜂膠制品：購(gòu)自昆明市；蜂膠膠囊、蜂膠片、蜂膠液、提純膠、毛膠：市售（均來(lái)自同一生產(chǎn)廠家）。

1.2 儀器、試劑

1.2.1 儀器

722S型可見(jiàn)分光光度計(jì)：上海精密科學(xué)儀器有限公司制造；DZF-6020型真空干燥箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司；電子天平PL2002型：梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；超聲清洗儀KQ52001：昆山市超聲儀器有限公司。

1.2.2 試劑

95％乙醇（分析純）、無(wú)水乙醇（分析純）：云南省楊林工業(yè)開(kāi)發(fā)區(qū)汕滇藥業(yè)有限公司；硝酸鋁溶液（100 g/L）：稱(chēng)取Al（NO3）·9H2O17.60 g，加水溶解，定容于100mL容量瓶中，搖勻；醋酸鉀溶液（9.8 g/L）：稱(chēng)取錯(cuò)酸鉀9.814 g，加水溶解，定容至100mL容量瓶中，搖勻；蘆丁對(duì)照品儲(chǔ)備液（1.0 g/L）：精密稱(chēng)取經(jīng)120℃真空干燥箱干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品50 mg，至于50mL容量瓶中，加無(wú)水乙醇溶解并稀釋至刻度；蘆丁對(duì)照品使用溶液（0.2 g/L）：精密吸取蘆丁對(duì)照品儲(chǔ)備溶液10mL，至于50mL容量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻。

1.3 檢測(cè)方法

本次實(shí)驗(yàn)參照蜂膠國(guó)標(biāo)（GB/T 20574-2006《蜂膠中總黃酮含量的測(cè)定方法分光光度比色法》），采用分光光度比色法[3]。

1.3.1 品質(zhì)分析

通過(guò)參照蜂膠國(guó)標(biāo)對(duì)不同蜂膠制品的清潔度、狀態(tài)、氣味等感官進(jìn)行品質(zhì)評(píng)價(jià)。

1.3.2 試樣的制備

樣品的處理：將蜂膠片，提純膠和毛膠置于冷凍條件下冷凍，待其變硬變脆后，用木錘砸成小碎塊。稱(chēng)取毛膠碎塊、蜂膠膠囊粉、蜂膠片碎劑、和提純膠碎片各0.5 g，精確到1mg。加入95％乙醇溶解，過(guò)濾去除雜質(zhì)，最后用95％定容至50mL搖勻，待測(cè)。蜂膠液樣品直接取出，檢測(cè)時(shí)吸取蜂膠液5mL～10mL，置入50mL容量瓶中加95％乙醇定容至刻度，搖勻，待測(cè)。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制所需溶液配制：精密吸取蘆丁對(duì)照品使用溶液1、2、3、4、5、6mL，分別置于50mL容量瓶中。加95％乙醇至總體積為15mL，依次加入硝酸鋁溶液1mL，醋酸鉀溶液1mL，加水至刻度，搖勻，靜置1h。

用1 cm比色杯于415 nm處，以30％乙醇溶液為空白，測(cè)定吸光度。以50mL中蘆丁質(zhì)量（mg）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)或按直線(xiàn)回歸方程計(jì)算。

1.3.4 對(duì)照實(shí)驗(yàn)

空白對(duì)照樣液配制：精密吸取待測(cè)試料溶液1.0mL，至于50mL容量瓶中，加入95％乙醇至總體積為15mL，加水稀釋至刻度，搖勻。

1.3.5 黃酮含量測(cè)定

精密吸取待測(cè)試料溶液1.0mL，至于50mL容量瓶中，按照蘆丁對(duì)照品使用溶液的方法進(jìn)行操作。以空白試液做參比測(cè)定試料溶液的吸光度。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分組整理，并使用Spss 10.0對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，顯著性P＜0.01。

2 結(jié)果

2.1 不同蜂膠制品的感官分析

選擇年齡在20～40歲之間，性別不限，對(duì)感官評(píng)價(jià)活動(dòng)有興趣，不抽煙、不嗜酒，無(wú)任何感官方面的缺陷，身體健康，無(wú)過(guò)敏史，有一定的理解能力、分析能力和語(yǔ)言表達(dá)及文字描述能力者為食品感官評(píng)價(jià)候選人，共計(jì)：20人。候選人分別對(duì)5種樣品進(jìn)行詳細(xì)的描述，對(duì)樣品的清潔度、狀態(tài)、氣味進(jìn)行描述，并進(jìn)行打分。每項(xiàng)最高得5分，最低0分，總分15分，9～10分為合格，11～12分為良好，13分以上為優(yōu)秀。

蜂膠制品的狀態(tài)、顏色、氣味等由于其產(chǎn)品種類(lèi)不同而存在差異，對(duì)所采集樣品進(jìn)行感官分析，發(fā)現(xiàn)各種蜂膠制品的感官狀態(tài)差異較大，見(jiàn)表1。

表1 感官分析Table1 Sensory analysis

2.2 不同蜂膠制品的黃酮類(lèi)物質(zhì)含量分析

黃酮類(lèi)物質(zhì)為蜂膠中主要有效成分之一，對(duì)收集的樣品進(jìn)行黃酮類(lèi)物質(zhì)分析發(fā)現(xiàn)，提純膠制品的黃酮類(lèi)物質(zhì)含量最高（（45.56±2.05）％D）與后4種樣品差異極顯著（P＜0.01）；蜂膠膠囊的黃酮含量（（27.78± 4.56）％E）次之，與后三者差異極顯著（P＜0.01）；毛膠為（（14.25±2.36）％a）、蜂膠片（（8.91±1.53）％c）、蜂膠液的為（（3.99±0.07）％c），三者間差異顯著（P＜0.05），見(jiàn)圖1。

圖1 蜂膠制品的黃酮含量Fig.1 The flavonoids content of samples

3 結(jié)論與討論

黃酮類(lèi)物質(zhì)為蜂膠中的主要功能成分物質(zhì)之一，原料出產(chǎn)地不同的蜂膠黃酮含量不同[4-6]，提取加工工藝、檢測(cè)方法等因素影響[7-9]。蜂膠制品所使用的原輔料種類(lèi)和加工工藝也是決定蜂膠制品感官、黃酮類(lèi)物質(zhì)含量的主要因素。調(diào)查的蜂膠膠囊、蜂膠片、蜂膠液中含有加工輔料，加工輔料所占比例直接決定了蜂膠中黃酮類(lèi)等有效物質(zhì)成分的多少。蜂膠液中乙醇含量的多少?zèng)Q定了蜂膠液中黃酮類(lèi)物質(zhì)成分的含量比例。毛膠由于生產(chǎn)過(guò)程中混雜了蜂蠟、蜂尸、木屑等雜質(zhì)，影響了其黃酮含量。提純膠經(jīng)過(guò)融化、溶解過(guò)濾等方法提取，去除了原料膠中的雜質(zhì)，其中的有效成分較高。

不同蜂膠制品除黃酮類(lèi)物質(zhì)等有效成分的含量不同外，其制品形式多樣。蜂膠膠囊、蜂膠片的各批次成品中黃酮類(lèi)物質(zhì)等有效成分的含量偏差小，且攜帶食用方便。蜂膠液制品中的黃酮類(lèi)物質(zhì)等有效成分也能進(jìn)行調(diào)配，但其攜帶和食用的方便性稍差。毛膠含雜質(zhì)較多，不適合直接使用。提純膠去除了雜質(zhì)，但其保存和攜帶、實(shí)用性稍差。

[1]房柱.蜂膠[M].山西:山西科學(xué)技術(shù)出版社,1984:2-3

[2]沈海濤.蜂膠提取工藝和抗氧化活性研究[D].浙江大學(xué),2002:3-10

[3]中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局,中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì),國(guó)家蜂產(chǎn)品質(zhì)檢中心.GB/T20574-2006蜂膠中總黃酮含量的測(cè)定方法分光光度比色法[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2006-09-14

[4]胡福良.蜂膠植物來(lái)源的研究進(jìn)展[J].養(yǎng)蜂科技,2001(4):29-30

[5]彭增起.蜂膠中的類(lèi)黃酮及類(lèi)黃酮的保健作用[J].中國(guó)養(yǎng)蜂,1996, 135(4):14-15

[6]曹瑤,凌婭,等.蜂膠中黃酮類(lèi)化合物含量測(cè)定方法的改進(jìn)[J].蜜蜂雜志,1997,12:3

[7]陳崇羔.蜂膠水溶工藝的研究(一)[J].中國(guó)養(yǎng)蜂,1999,50(5):3-5

[8]陳崇羔.蜂膠水溶工藝的研究(二)[J].中國(guó)養(yǎng)蜂,1999,50(6):5-6

[9]陳崇羔.不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇對(duì)蜂膠有效成分提取率的影響[J].福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1996,25(3):361-363

Comparative Study on Flavonoid in Different Propolis Products

LEI Shu-ming，ZHANG Yan-xin，YANG Juan，CHEN Shun-an*
（Institute of Sericulture and Apiculture，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Mengzi661101，Yunnan，China）

Comparative analysis of the same brand of different propolis products quality，and with reference to the propolis national standard（GB/T20574）main effective components content of flavonoids of propolis were analyzed，using spectrophotometric colorimetry to determine the purified propolis，propolis capsule，propolis material，propolis tablet，propolis flavonoid content in liquid.Due to the different propolis products processing technology was different，the difference between the flavonoids content.Purified propolis is by propolis material purification，did not add any additives，flavonoids content was highest（45.56％）.Less add supplementary materials in the propolis capsule of flavonoids content is relatively higher（27.78％）.And propolis contains more impurities，flavonoids content was slightly lower（14.25％）；And propolis tablet，propolis liquid products of complementary makings relatively more，so the flavonoids content is relatively low（8.91％，3.99％respectively）.

propolies products；flavonoids；spectrophotometric colorimetry；flavone content；sense organ

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.04.019

2013-11-20

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)資金（編號(hào)：CARS-45-SYZ-17）；云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所基金項(xiàng)目（QC2013001）

雷樹(shù)明（1968—），男（漢），實(shí)驗(yàn)師，主要從事蜂產(chǎn)品加工及飼養(yǎng)技術(shù)研究工作。

*通信作者：陳順安（1983—），男，主要從事蜜蜂生物學(xué)研究。