向 赟 王 剛 葉國(guó)鋒 陳兆明 楊世平, 王成桂 孫成波,①

(1.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院 湛江 524025;2.廣東高校熱帶海產(chǎn)無脊椎動(dòng)物養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心 湛江 524025)

白斑綜合癥病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是一種對(duì)蝦高致死性病毒,其宿主廣泛,傳染性強(qiáng),感染后出現(xiàn)癥狀 6—7d死亡率可達(dá) 80%—100%,造成的危害極大(Momoyanaet al,1994)。已使世界 30多個(gè)國(guó)家對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)蒙受巨大損失,部分地區(qū)對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)瀕臨絕境,嚴(yán)重制約了全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展(Tapayet al,1999;Flegelet al,2009),而在我國(guó)1993年開始大規(guī)模暴發(fā)流行。近年很多研究發(fā)現(xiàn)引起白斑綜合癥暴發(fā)的原因不僅與蝦體的免疫水平、病毒數(shù)量、感染方式有關(guān),還與環(huán)境因子密切相關(guān),例如溫度、鹽度、pH、氨氮含量等(吳信忠,2005;孫成波等,2006)。如高溫或者低溫可以抑制WSSV在對(duì)蝦體內(nèi)增殖(Jiravanichpaisalet al,2004;Duet al,2006;Granjaet al,2006)。pH升高可能提高斑節(jié)對(duì)蝦死亡率(Gunalanet al,2010)。鹽度在1h內(nèi)突變大于4,會(huì)引起中國(guó)對(duì)蝦體內(nèi)WSSV迅速增殖和抗病能力降低(Liuet al,2006)。環(huán)境中鹽度只有在對(duì)蝦體液的等滲點(diǎn)附近,對(duì)蝦才能保證正常的生理和生長(zhǎng)狀況。徐麗美等(2001)通過定量 PCR方法初步將每毫克組織含 103個(gè)病毒粒子作為疾病暴發(fā)的危險(xiǎn)臨界值;何建國(guó)等(1999)認(rèn)為WSSV的潛伏期感染具有很大的危害性,且潛伏期感染轉(zhuǎn)為急性感染受眾多氣候和水環(huán)境因子影響。凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)是我國(guó)乃至全世界最主要的對(duì)蝦養(yǎng)殖品種,本文研究不同鹽度變化對(duì)感染 WSSV的凡納濱對(duì)蝦的影響,對(duì)其產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 健康對(duì)蝦來源 健康凡納濱對(duì)蝦取自廣東海洋大學(xué)東海島海洋生物研究基地,體長(zhǎng)為(7.71±0.98)cm。實(shí)驗(yàn)前隨機(jī)抽取 10尾對(duì)蝦進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果為陰性。實(shí)驗(yàn)前暫養(yǎng)5d,投喂對(duì)蝦人工配合餌料 2次/d,換水 1次/d,日換水量接近100%。

1.1.2 WSSV粗提液制備 取感染W(wǎng)SSV癥狀明顯的凡納濱對(duì)蝦,去除甲殼,按 1︰1(W︰V)加入高鹽PBS,冰浴中勻漿,將勻漿液于4°C、7000r/min離心15min;離心后的上清液加入蔗糖至終濃度為30%(W/W),4°C、16000r/min超速離心 50min,棄上清,沉淀用PBS(pH 7.4)重懸,將重懸液用0.45μm的濾膜過濾,分裝后?80°C冰箱保存。

1.1.3 DNA模板提取和引物設(shè)計(jì) DNA模板提取方法參照Sun等(2013)的方法,PCR引物參照You等(2010)的引物設(shè)計(jì),由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。

1.1.4 標(biāo)準(zhǔn)品的制備 參照程曉燕等(2010)的方法制備重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品,用核酸分析儀測(cè)定重組質(zhì)粒的 DNA濃度,根據(jù)拷貝數(shù)公式計(jì)算重組質(zhì)粒的拷貝數(shù)。

式中,阿伏加德羅常數(shù)為 6.02×1023,重組質(zhì)粒分子量 = 1個(gè)堿基對(duì)的平均分子量(660g/mol)×重組質(zhì)粒的總長(zhǎng)度(bp)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 感染方式 本實(shí)驗(yàn)采用人工注射感染,在凡納濱對(duì)蝦第2腹節(jié)與第3腹肌之間往心臟方向注射40μL用PBS緩沖液稀釋104倍的病毒粗提液。

1.2.2 鹽度變化實(shí)驗(yàn) 鹽度變化為起始鹽度(23±1)往高鹽度(32±1)和低鹽度(14±1)進(jìn)行突變和漸變,突變時(shí)間為6h,漸變時(shí)間為72h;病毒感染分為變化前和變化后感染兩種方式,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均設(shè)置 3個(gè)平行組,每組對(duì)蝦各30尾;實(shí)驗(yàn)組注射40μL PBS緩沖液稀釋 104倍的病毒粗提液,對(duì)照組注射 40μL PBS緩沖液。實(shí)驗(yàn)中投喂對(duì)蝦人工配合餌料2次/日,24h充氣,定時(shí)吸出排泄物,日換水量 50%。及時(shí)取出死亡對(duì)蝦放入–20°C冰箱保存。各組在感染后0h、6h、12h、24h、48h、72h、96h取樣保存。觀察記錄對(duì)蝦發(fā)病及死亡率,定期檢測(cè)對(duì)蝦組織中病毒含量,并對(duì)死亡對(duì)蝦進(jìn)行病毒檢測(cè)。

1.2.3 病毒檢測(cè)方法 參考程曉燕等(2010)采用熒光定量PCR方法檢測(cè)WSSV。

2 結(jié)果

2.1 鹽度突變

2.1.1 鹽度先突變后感染W(wǎng)SSV的結(jié)果

(1)鹽度先突變后感染 WSSV對(duì)凡納濱對(duì)蝦死亡情況的影響

鹽度先突變后感染 WSSV對(duì)凡納濱對(duì)蝦死亡情況的影響見圖1,同一鹽度感染W(wǎng)SSV組對(duì)蝦累計(jì)死亡率顯著高于未感染 WSSV組,且感染W(wǎng)SSV后不同鹽度組的對(duì)蝦累積死亡率顯著提高,24h出現(xiàn)死亡高峰,此時(shí)低鹽度14±1突變組的累計(jì)死亡率(54.1±3.8)%明顯高于高鹽度32±1突變組的(36.7±5.8)%和起始鹽度 23±1組的(24.4±5.1)%。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中起始鹽度 23±1組累積死亡率顯著低于另外兩突變組(P<0.05),各組累計(jì)死亡率至 96h達(dá)到最大,起始鹽度23±1為(52.2±13.5)%,高鹽度32±1突變組為(75.6±3.8)%,低鹽度 14±1突變組為(63.3±3.3)%。

圖1 鹽度突變對(duì)凡納濱對(duì)蝦累積死亡率的影響Fig.1 Effects of salinity acute changes on the mortality of L.vannamei

(2)鹽度突變后感染 WSSV對(duì)凡納濱對(duì)蝦攜帶WSSV情況的影響

鹽度突變后感染W(wǎng)SSV對(duì)凡納濱對(duì)蝦攜帶WSSV情況的影響見表1,不同鹽度下病蝦體內(nèi)病毒含量隨感染時(shí)間推移逐漸升高。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,在6h、24h、48h、96h時(shí)高鹽度32±1突變組與起始鹽度23±1組存在顯著差異(P<0.05);在6h、12h、48h、72h時(shí)低鹽度14±1突變組與起始鹽度23±1組存在顯著差異(P<0.05)。高鹽度32±1突變組和起始鹽度23±1組對(duì)蝦體內(nèi)病毒含量都在96h達(dá)到最高值,分別為5.7×107copy/g,2.3×106copy/g,低鹽度突變組在72h達(dá)到最高值為2.8×107copy/g。

2.1.2 先感染W(wǎng)SSV后鹽度突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果

(1)先感染 WSSV后鹽度突變對(duì)凡納濱對(duì)蝦死亡情況的影響

先感染 WSSV后鹽度突變對(duì)凡納濱對(duì)蝦死亡情況的影響見圖2,同一鹽度感染W(wǎng)SSV組對(duì)蝦累計(jì)死亡率顯著高于未感染 WSSV組,感染 WSSV后鹽度突變導(dǎo)致對(duì)蝦累積死亡率顯著提高,在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中高鹽度32±1突變組與起始鹽度23±1組之間不存在顯著差異(P>0.05);低鹽度 14±1突變組與起始鹽度23±1組之間在12h、24h、48h、72h存在顯著差異(P<0.05);各組累計(jì)死亡率至96h達(dá)到最大,起始鹽度23±1為(48.8±1.9)%,高鹽度32±1突變組為(61.1±10.7)%,低鹽度14±1突變組為(63.3±12.0)%。

表1 鹽度突變后感染W(wǎng)SSV凡納濱對(duì)蝦攜帶白斑綜合癥病毒量的情況Tab.1 Effects of salinity acute changes on white spot syndrome virus copy number in L.vannamei infected with WSSV

圖2 先感染W(wǎng)SSV后鹽度突變對(duì)凡納濱對(duì)蝦累積死亡率的影響Fig.2 Effects of salinity acute changes on the mortality of L.vannamei infected with WSSV

(2)先感染 WSSV后鹽度突變對(duì) WSSV在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)增殖的影響

表2中不同鹽度下的病蝦體內(nèi)攜帶病毒量隨時(shí)間推移而逐漸增多。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,高鹽度32±1突變組與起始鹽度23±1組在12h、24h、72h、96h存在顯著差異(P<0.05);低鹽度 14±1突變組與起始鹽度 23±1組在 6h、12h、72h、96h存在顯著差異(P<0.05),兩鹽度突變組病毒復(fù)制高峰期出現(xiàn)在鹽度突變后 6h,而起始鹽度23±1組出現(xiàn)在48h。在0h各組病毒含量差異不大,至12h高鹽度32±1突變組病毒含量高出起始鹽度23±1組的30倍,低鹽度14±1突變組高出起始鹽度23±1組的400倍,到48h后各組病毒含量相差不顯著。

表2 感染W(wǎng)SSV后鹽度突變對(duì)凡納濱對(duì)蝦攜帶白斑綜合癥病毒量的影響Tab.2 Effects of salinity acute changes on white spot syndrome virus copy number in L.vannamei infected with WSSV

2.2 鹽度漸變

2.2.1 先鹽度漸變后感染W(wǎng)SSV實(shí)驗(yàn)結(jié)果

(1)不同鹽度對(duì)感染 WSSV凡納濱對(duì)蝦死亡情況的影響

不同鹽度對(duì)感染W(wǎng)SSV對(duì)蝦累積死亡率的影響見圖3,感染W(wǎng)SSV組,在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,在0—24h各組對(duì)蝦累計(jì)死亡率差異不顯著(P>0.05),高鹽度 32 ± 1漸變組累計(jì)死亡率與起始鹽度23 ± 1組在48h、72h存在顯著差異(P<0.05);低鹽度14 ± 1漸變組與起始鹽度23 ± 1組在48h、72h、96h存在顯著差異(P<0.05)。

圖3 不同鹽度對(duì)感染W(wǎng)SSV凡納濱對(duì)蝦累計(jì)死亡率的影響Fig.3 Effects of different salinity on the mortality of L.vannamei infected with WSSV

(2)鹽度漸變至相應(yīng)鹽度后感染W(wǎng)SSV對(duì)WSSV在凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)增殖的影響

不同鹽度對(duì) WSSV在對(duì)蝦體內(nèi)增殖的影響見表3,在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,0—24h凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)病毒平均含量較低,在 6h時(shí)低鹽度 14 ± 1漸變組與起始鹽度 23 ± 1組存在極顯著性差異(P<0.01),至 12h時(shí)高鹽度32 ± 1漸變組與起始鹽度23 ± 1組存在極顯著差異(P<0.01);至 48h出現(xiàn)病毒增殖高峰期,并伴隨死亡高峰期,且高鹽度 32 ± 1漸變組與起始鹽度23 ± 1組存在顯著差異(P<0.05);到 72—96h時(shí)凡納濱對(duì)蝦體內(nèi) WSSV平均含量趨于平穩(wěn),并伴隨著對(duì)蝦死亡。

表3 不同鹽度對(duì)感染W(wǎng)SSV凡納濱對(duì)蝦體內(nèi)病毒含量的影響Tab.3 Effects of different salinity on white spot syndrome virus copy number in L.vannamei infected with WSSV

2.2.2 先感染W(wǎng)SSV后鹽度漸變實(shí)驗(yàn)結(jié)果

(1)鹽度漸變對(duì)攜帶 WSSV的凡納濱對(duì)蝦死亡情況的影響

先感染 WSSV后鹽度漸變對(duì)對(duì)蝦累積死亡率的影響見圖4,在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,感染W(wǎng)SSV組中高鹽度32±1漸變組與起始鹽度23±1組在6h、12h、24h存在顯著差異(P<0.05);低鹽度 14±1漸變組與起始鹽度 23±1組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中都存在顯著差異(P<0.05);在鹽度漸變過程中,漸變組伴隨死亡率升高,至24 h后死亡明顯加快,并出現(xiàn)死亡高峰期。

圖4 先感染W(wǎng)SSV后鹽度漸變對(duì)凡納濱對(duì)蝦累積死亡率的影響Fig.4 Effects of salinity gradual changes on the mortality of L.vannamei infected with WSSV

(2)鹽度漸變對(duì)凡納濱對(duì)蝦攜帶WSSV情況的影響

不同鹽度下的病蝦體內(nèi)攜帶病毒量隨時(shí)間推移而逐漸增多見表4,高鹽度32±1漸變組與起始鹽度23±1組在 6h、48h存在顯著差異(P<0.05);低鹽度14±1漸變組與起始鹽度 23±1組在 6h、48h、96h存在顯著差異(P<0.05);在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中鹽度漸變組對(duì)蝦體內(nèi)病毒增殖速度與起始鹽度組的差不多,但后期死亡率明顯比起始鹽度高。

表4 感染W(wǎng)SSV后鹽度漸變至相應(yīng)鹽度凡納濱對(duì)蝦攜帶白斑綜合癥病毒量的情況Tab.4 Effects of salinity gradual changes on white spot syndrome virus copy number in L.vannamei infected with WSSV

2.3 各處理組中不同時(shí)期死亡對(duì)蝦病毒含量檢測(cè)

表5中對(duì)死亡個(gè)體病毒定量檢測(cè)結(jié)果可知,每個(gè)處理組的初期死亡個(gè)體病毒含量都低于死亡高峰期和后期,在感染W(wǎng)SSV后鹽度突變處理組中,死亡初期的高鹽度32±1組與起始鹽度23±1組存在顯著差異(P<0.05),死亡高峰中低鹽度 14±1組與起始鹽度23±1組存在顯著差異(P<0.05),且起始鹽度 23±1組病毒含量明顯高于另外兩鹽度組病毒含量;死亡后期不存在差異性。在先感染 WSSV后鹽度漸變和先鹽度漸變后感染 WSSV處理組中的不同鹽度組在不同死亡時(shí)期死亡個(gè)體病毒含量不存在顯著性差異;在鹽度突變后感染 WSSV處理組中,死亡初期和死亡高峰期中的起始鹽度 23±1組與另外兩鹽度組中死亡個(gè)體的病毒含量都存在顯著差異(P<0.05)。

3 討論

葉建生等(2008)報(bào)道鹽度突變會(huì)引起對(duì)蝦體內(nèi)產(chǎn)生一系列應(yīng)激反應(yīng),在短時(shí)間內(nèi)調(diào)節(jié)血液滲透壓,如對(duì)蝦體內(nèi)的超氧陰離子產(chǎn)量隨著鹽度突變值增加而增加,血清中酚氧化酶活性隨著鹽度突變值增加活性升高越快,血清中 SOD活性隨著鹽度突變值增加而降低,血清蛋白含量隨著降低。Perazzolo等(2002)也報(bào)道在鹽度從34降低至22或13會(huì)引起圣保羅對(duì)蝦(Farfantepenaeus paulensis)體內(nèi)血淋巴中血細(xì)胞數(shù)量減少了 20%,而且抗菌活力也下降了。Sudha等(1998)已將 WSSV與印度對(duì)蝦(Penaeus indicus)和斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeus monodon)的關(guān)系簡(jiǎn)單分為 3種類型:第1種為早期急性感染,對(duì)蝦感染癥狀為出現(xiàn)大面積紅體,機(jī)體組織高度感染 WSSV,將在 2—3d內(nèi)出現(xiàn)大面積死亡;第2種為急性或亞急性感染,對(duì)蝦組織感染程度為中度到高度之間,會(huì)在 7—10d內(nèi)出現(xiàn)高的死亡率,主要的臨床癥狀為被感染的對(duì)蝦甲殼有明顯的白斑;第3種類型為慢性感染(潛伏感染),組織僅被輕度感染,不會(huì)伴隨有白斑和紅體等癥狀,將在15—28d內(nèi)出現(xiàn)死亡。有研究認(rèn)為鹽度改變會(huì)引起對(duì)蝦體內(nèi)相關(guān)免疫指標(biāo)變化,特別是鹽度降低能引起對(duì)蝦血細(xì)胞數(shù)量明顯降低,導(dǎo)致酚氧化酶活性升高。血細(xì)胞計(jì)數(shù)作為對(duì)蝦免疫指標(biāo)的重要參數(shù)之一,是因?yàn)閷?duì)蝦血細(xì)胞具有溶菌作用、凝集作用,而且能合成與免疫相關(guān)的許多酶類如溶菌酶、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、酚氧化酶等(Le Moullacet al,2000)。

表5 不同處理組死亡凡納濱對(duì)蝦個(gè)體WSSV定量檢測(cè)結(jié)果Tab.5 WSSV amounts in the dead L.vannamei of different management group

兩組鹽度突變實(shí)驗(yàn)中都發(fā)現(xiàn)鹽度突變對(duì)健康凡納濱對(duì)蝦存活影響顯著,特別是低鹽度14±1突變組累積死亡率明顯高于另兩組(P<0.05),原因可能是鹽度突變幅度已超出部分體質(zhì)較弱對(duì)蝦的滲透調(diào)節(jié)能力。在先鹽度突變后感染 WSSV實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)各鹽度組對(duì)蝦的累積死亡率在前期較低;病毒檢測(cè)也發(fā)現(xiàn)前期對(duì)蝦體內(nèi)病毒含量維持在較低水平,未達(dá)到對(duì)蝦體內(nèi)病毒含量的瀕死臨界值,而且起始鹽度23±1組對(duì)蝦累積死亡率都顯著低于另外兩突變組(P<0.05),說明感染初期由起始鹽度23±1突變至 14±1和 32±1提高了對(duì)蝦對(duì)病原體的易感性;感染后期由起始鹽度23±1突變至14±1和32±1促使病毒在對(duì)蝦體內(nèi)迅速擴(kuò)增,伴隨著對(duì)蝦大量死亡。說明鹽度突變?cè)斐蓪?duì)蝦體質(zhì)損傷,抗病力下降,為病毒的擴(kuò)增提供了溫床。

對(duì)攜帶 WSSV的對(duì)蝦進(jìn)行鹽度突變實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知低鹽度14±1突變組在12 h突然出現(xiàn)大量死亡,且與另外兩組存在顯著差異(P<0.05);鹽度 14±1組累計(jì)死亡率比鹽度32±1突變組高,此結(jié)果與Joseph等(2007)報(bào)道的鹽度突變改變中國(guó)對(duì)蝦血淋巴代謝和降低了對(duì) WSSV免疫力的死亡結(jié)果相似。從病毒檢測(cè)結(jié)果中發(fā)現(xiàn)12h后低鹽度14±1突變組對(duì)蝦體內(nèi)病毒含量是起始鹽度23±1組的400倍,高鹽度32±1突變組是其的 30倍,也說明了此時(shí)各組之間累積死亡率的差異性;至實(shí)驗(yàn)后期病毒含量已經(jīng)高于簡(jiǎn)旭鳳(2003)報(bào)道的對(duì)蝦感染W(wǎng)SSV死亡時(shí)攜帶病毒的數(shù)量1×105copy/g,促使對(duì)蝦大量死亡。綜上可知:鹽度未突變時(shí),病毒在對(duì)蝦體內(nèi)處于潛伏感染期,未有大量死亡和明顯病癥出現(xiàn);鹽度突變后,對(duì)蝦出現(xiàn)大量死亡,期間伴隨著紅體,空胃、空腸、肝胰腺腫大等癥狀。鹽度突變引起對(duì)蝦與 WSSV之間的關(guān)系發(fā)生轉(zhuǎn)變,從潛伏感染轉(zhuǎn)為急性感染。

兩組鹽度漸變實(shí)驗(yàn)中都發(fā)現(xiàn)鹽度漸變過程中對(duì)對(duì)蝦存活影響不顯著;將對(duì)蝦馴化至不同鹽度后感染W(wǎng)SSV實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)0—24h各鹽度組對(duì)蝦累積死亡率無明顯差異,而且 0—12h內(nèi)檢測(cè)到對(duì)蝦體內(nèi)的病毒含量有下降趨勢(shì),到 24h時(shí)病毒含量開始升高,但是病毒含量明顯低于簡(jiǎn)旭鳳(2003)報(bào)道對(duì)蝦感染W(wǎng)SSV粗提液后死亡時(shí)攜帶病毒的數(shù)量超過 1×105copy/g,所以未見大量對(duì)蝦死亡;48h至實(shí)驗(yàn)結(jié)束鹽度14±1組累積死亡率與其它組存在顯著差異(P<0.05),且高于其它組的累積死亡率,這與李才文等(2002)研究不同鹽度條件下感染 WSSV日本對(duì)蝦累積死亡結(jié)果相似。48h后病毒在對(duì)蝦體內(nèi)出現(xiàn)增殖高峰期,此后對(duì)蝦體內(nèi)病毒含量為(3.6×105)—(1.01×107)copy/g,這與孫成波等(2009)研究的斑節(jié)對(duì)蝦在高位池養(yǎng)殖過程中體內(nèi)病毒含量(9.5×105copy/g)相似,表明隨著病毒含量升高,對(duì)機(jī)體造成嚴(yán)重?fù)p傷,最終導(dǎo)致對(duì)蝦出現(xiàn)大量死亡。

先感染W(wǎng)SSV后鹽度漸變實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)0—24h起始鹽度 23±1組與另外兩鹽度漸變組存在顯著性差異,在 24h時(shí)感染組的累計(jì)死亡率都低于 18.9%,未出現(xiàn)大量死亡,而且 0—12h內(nèi)對(duì)蝦體內(nèi)病毒含量較低,但累積死亡率存在差異,可能是個(gè)別對(duì)蝦感染W(wǎng)SSV后對(duì)蝦機(jī)體已有損傷,外界環(huán)境稍有變化,即出現(xiàn)個(gè)別死亡。48h時(shí)兩鹽度漸變組對(duì)蝦出現(xiàn)死亡高峰,起始鹽度23±1組死亡率有升高,到96h達(dá)到最大值78.9%。產(chǎn)生這樣的結(jié)果可能是對(duì)蝦長(zhǎng)期處于連續(xù)較大的鹽度漸變,導(dǎo)致對(duì)蝦必須長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行鹽度適應(yīng)調(diào)節(jié)降低了自身免疫能力,使 WSSV在體內(nèi)復(fù)制累積,當(dāng)累積到一定值時(shí)出現(xiàn)大量死亡。不管鹽度怎么變化,都會(huì)影響到對(duì)蝦與WSSV之間的關(guān)系,在未感染 WSSV時(shí),鹽度突變和漸變都會(huì)提高對(duì)蝦對(duì)WSSV的易感性,在感染W(wǎng)SSV后,鹽度變化可能引起對(duì)蝦與 WSSV之間的關(guān)系發(fā)生轉(zhuǎn)變,從潛伏感染轉(zhuǎn)為急性感染,因此鹽度是引起白斑綜合癥暴發(fā)的關(guān)鍵影響因子。

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